[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


  
==== ФС.2.1.0049 Азитромицин дигидрат (Azithromycinum dihydricum)

*Азитромицин* 

*Взамен ФС.2.1.0049.18*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0049_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-__C__-метил-3-__O__-метил-α-L-__рибо__-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-__ксило__-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
дигидрат.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % азитромицина
С~38~H~72~N~2~O~12~ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

1 мкг азитромицина С~38~H~72~N~2~O~12~ соответствует специфической
активности, равной 1 единице действия (ЕД).

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый порошок.

*Растворимость*. Легко растворим в метиленхлориде и спирте 96 %,
практически нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектроскопия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения соответствует спектру
фармакопейного стандартного образца азитромицина.

[none]
* Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный
стандартный образец азитромицина по отдельности растворяют в минимальных
объёмах метанола, выпаривают досуха, высушивают в вакууме при
температуре 80 °С в течение 30 мин и записывают спектры сухих остатков.

[arabic,start=2]
. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика азитромицина на
хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение*. От –45 до –49 в пересчёте на безводное, не
содержащее органических растворителей вещество (2 % раствор субстанции в
этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл этанола должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора*. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

*рН раствора*. От 9,0 до 11,0 (0,1 г субстанции растворяют в 25 мл
метанола и доводят объём водой до 50 мл, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие азитромицин и его примеси, используют
свежеприготовленными.

_Буферный раствор_. Растворяют 1,73 г аммония дигидрофосфата в 900 мл
воды и доводят рН раствора до 10,00 аммиака раствором концентрированным
25 %. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу
вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза А (ПФА)_. Растворяют 1,80 г динатрия гидрофосфата
безводного в 800 мл воды и доводят рН раствора до 8,90 фосфорной
кислотой разведённой 10 % или натрия гидроксида раствором 10 %.
Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью
1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Метанол—ацетонитрил 250:750.

_Растворитель._ Ацетонитрил—буферный раствор—метанол 30:35:35.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,2 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца азитромицина_. В мерную колбу вместимостью
20 мл помещают 16 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца азитромицина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы_. Растворяют содержимое флакона с фармакопейным стандартным
образцом азитромицина для проверки пригодности хроматографической
системы (содержит примеси F, H и J) в 1 мл растворителя, выдерживают на
ультразвуковой бане в течение 5 мин и охлаждают до комнатной
температуры.

_Раствор для идентификации пиков примесей._ Растворяют содержимое
флакона с фармакопейным стандартным образцом азитромицина для
идентификации примесей (содержит примеси A, B, C, E, F, G, I, J, L, M,
N, O и Р) в 1 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в
течение 5 мин и охлаждают до комнатной температуры.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы_. В
мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца азитромицина и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===
|Колонка |250 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный,
октадецилсилильный, эндкепированный, 5 мкм; | |

|Температура колонки |60 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 210 нм; | |

|Объём пробы |50 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^36%,^35%,^29%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–25 |50 → 45 |50 → 55
|25–30 |45 → 40 |55 → 60
|30–80 |40 → 25 |60 → 75
|80–81 |25 → 50 |75 → 50
|81–93 |50 |50
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков
примесей, раствор стандартного образца азитромицина и испытуемый
раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Относительное время
удерживания (RRT) приведено в <<tab_fs_2.1.0049_1,табл. 1.>>

[[tab_fs_2.1.0049_1]]
[caption="Таблица 1. "]
.Относительное время удерживания соединений (RRT)

[cols="^16%,63%,^13%,^8%",options="header",]
|===
|Сокращённое название ^|Химическое название по ИЮПАК |CAS |RRT
|Примесь А
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-__C__-метил-3-__O__-метил-α-L-__рибо__-гексопиранозил)окси]-3,5,8,10,12,14-гексаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-__ксило__-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|76801-85-9 |Около 0,83

|Примесь В
|(2__R__,3__R__,4__S__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-4,10-Дигидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-__C__-метил-3-__O__-метил-α-L-__рибо__-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-__ксило__-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|307974-61-4 |Около 1,31

|Примесь С
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-__C__-метил-α-L-__рибо__-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-__ксило__-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|620169-47-3 |Около 0,73

|Примесь D
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-14-гидроксиметил-13-[(2,6-дидезокси-3-__C__-метил-3-__O__-метил-α-L-__рибо__-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12-гексаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-__ксило__-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|612069-26-8 |Около 0,54

|Примесь E
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-11-[(3-Амино-3,4,6-тридезокси-β-D-__ксило__-гексопиранозил)окси]-3,4,10-тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-__рибо__-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|612069-27-9 |Около 0,43

|Примесь F
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-_рибо_-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(_N_-метилформамидо)-β-D-_ксило_-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|612069-28-0 |Около 0,51

|Примесь G
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-_рибо_-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(4,_N_-диметилбензол-1-сульфонамидо)-β-D-_ксило_-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|612069-31-5 |Около 1,36

|Примесь H
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-11-{[3-(4-Ацетамидо-_N_-метилбензол-1-сульфонамидо)-3,4,6-тридезокси-β-D-_ксило_-гексопиранозил]окси}-3,4,10-тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-_рибо_-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|612069-30-4 |Около 0,79

|Примесь I
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-_рибо_-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(метиламино)-β-D-_ксило_-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|172617-84-4 |Около 0,61

|Примесь J
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10,13-Тетрагидрокси-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-_ксило_-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|117693-41-1 |Около 0,54

|Примесь L
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-_рибо_-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметилоксо-λ^5^-азанил)-β-D-_ксило_-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|90503-06-3 |Около 0,29

|Примесь M
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-_рибо_-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-[(3,4,6-тридезокси-3-формамидо-β-D-_ксило_-гексопиранозил)окси]-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|765927-71-7 |Около 0,37

|Примесь N
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-_рибо_-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-[(3,4,6-тридезокси-3-оксо-β-D-_ксило_-гексопиранозил)окси]-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|612069-25-7 |Около 0,76

|Азитромицин | | |1,00

|Примесь O
|(2__R__,3__S__,4__R__,5__R__,8__R__,10__R__,11__R__,12__S__,13__S__,14__R__)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-_C_-метил-3-_O_-метил-α-L-_рибо_-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-2-пропил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-_ксило_-гексопиранозил]окси}-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он
|763924-54-5 |Около 1,23

|Примесь P |Неизвестная структура | |Около 0,92
|===

Хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу
азитромицина для проверки пригодности хроматографической системы, и
хроматограмму раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы используют для идентификации пиков примесей
F, H и J. Хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному
образцу азитромицина для идентификации примесей, и хроматограмму
раствора для идентификации пиков примесей используют для идентификации
пиков примесей A, B, C, E, F, G, I, J, L, M, N, O и Р.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика азитромицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _отношение максимум/минимум (p/v)_ между
пиками примеси J и примеси F должно быть не менее 3,0;

На хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина:

- _фактор асимметрии_ _пика_ _(A~S~)_ азитромицина должен быть не более
2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика азитромицина
должно быть не более 5,0 % (6 введений).

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные
коэффициенты: примесь F – 0,3; примесь G – 0,2; примесь Н – 0,1; примесь
L – 2,3; примесь М – 0,6; примесь N – 0,7.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0049_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика азитромицина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина;   +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг;  +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца азитромицина, мг; +
	_P_	–	содержание азитромицина в фармакопейном стандартном образце азитромицина,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь В – не более 2,0 %;

- сумма примесей D, J и Q – не более 0,5 %;

- примесь G – не более 0,2 %;

- примеси А, С, Е, F, H, I, L, М, N, О, Р – не более 0,5 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,2 %;

- сумма примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, относительное время удерживания которых менее
относительного времени удерживания примеси L и более относительного
времени удерживания примеси В, а также пики, площадь которых менее
площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки
чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

*Вода*. От 4,0 % до 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,0025 %. Определение проводят в
соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном
остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием
эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная
хроматография»).

_Буферный раствор рН 8,0._ Растворяют 6,7 г дикалия гидрофосфата в
900 мл воды и доводят рН раствора до 8,00 фосфорной кислотой
концентрированной. Количественно переносят полученный раствор в мерную
колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Буферный раствор рН 11,0_. Растворяют 6,7 г дикалия гидрофосфата в
900 мл воды и доводят рН раствора до 11,00 калия гидроксида раствором
10 %. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу
вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза (ПФ)_. Буферный раствор рН 11,0—ацетонитрил 400:600.

_Растворитель._ Буферный раствор рН 8,0—ацетонитрил 40:60.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят
объём раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца азитромицина._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца азитромицина, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===
|Колонка |250 × 4,6 мм, винилполимер октадецилсилильный для
хроматографии, 5 мкм; | |

|Температура колонки |40 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 210 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования |1,5-кратное от времени удерживания пика
азитромицина. | |
|===

Хроматографируют раствор стандартного образца азитромицина и испытуемый
раствор.

Время удерживания пика азитромицина – около 10 мин.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца азитромицина:

- _фактор асимметрии_ _пика_ _(A~S~)_ азитромицина должен быть не более
2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика азитромицина
должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание азитромицина С~38~H~72~N~2~O~12~ в субстанции в пересчёте на
безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество
в процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0049_3.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика азитромицина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика азитромицина на хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца азитромицина, мг; +
	_P_	-	содержание азитромицина в фармакопейном стандартном образце азитромицина,%; +
	_W_	-	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


