[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0643 Валацикловира гидрохлорид

*Валацикловир* +
*Valacicloviri hydrohcloridum* 

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0643_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2__S__)-2-амино-3-метилбутаноата]
гидрохлорид (1:1).

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % валацикловира гидрохлорида
C~13~H~20~N~6~O~4~·HCl в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

+*+ Гигроскопичный, проявляет полиморфизм.

*Растворимость*. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте
96 %, практически не растворим в метиленхлориде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия._ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»)_._ Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^-1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца валацикловира гидрохлорида.

[none]
* Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный
стандартный образец валацикловира гидрохлорида по отдельности растворяют
в минимальном объёме этанола и выпаривают досуха в эксикаторе под
вакуумом над фосфора(V) оксидом и записывают спектры сухих остатков.

[arabic,start=2]
. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика валацикловира
на хроматограмме раствора стандартного образца валацикловира
гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

. _Качественная реакция_. В 4 мл воды растворяют 40 мг субстанции.
Раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции
на подлинность», реакция А).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От –8,5 до –11,5 в пересчёте на безводное и
свободное от органических растворителей вещество (4 % раствор субстанции
в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

*pH раствора*. От 4,0 до 6,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси.* Сумма примесей (метод 2 и 3) – не более 5,0 %.

*_1. Примеси E, F, G._* Определение проводят методом ТСХ
(ОФС «Тонкослойная хроматография»).

_Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем силикагеля F~254~.

Пластину предварительно обрабатывают метанолом. Когда фронт метанола
пройдёт около 4/5 длины пластинки от линии старта, её вынимают из
камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителя.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Аммиака раствор концентрированный
25 %—тетрагидрофуран—метанол-метиленхлорид 3:12:34:54.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,25 г
субстанции (точная навеска), прибавляют 2 мл воды и доводят объём
раствора спиртом 96 % до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают по
5 мг фармакопейных стандартных образцов примеси D валацикловира,
примеси G валацикловира и примеси E валацикловира, 8,4 мг примеси F
пара-толуенсульфоната, прибавляют 2 мл воды и 6 мл спирта 96 % и доводят
объём раствора спиртом 96 % до метки.

_Стандартный раствор А._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до
метки.

_Стандартный раствор Б_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
2,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до
метки.

_Стандартный раствор В_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
0,5 мл стандартного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до
метки.

_Реактив для детектирования._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
5 мг флуорескамина, растворяют в этиленхлориде и доводят объём раствора
этиленхлоридом до метки.

*Примечание*

Примесь Е: +
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2__S__)-2-{[(бензилокси)карбонил]амино}-3-метилбутаноат]
[124832-31-1].

Примесь F: +
(2-гидроксиэтил)[(2__S__)-2-амино-3-метилбутаноат]
[86150-60-9].

Примесь G: +
_N,N_-диметилпиридин-4-амин [1122-58-3].

На линию старта пластинки наносят по 4 мкл испытуемого раствора
(200 мкг), стандартного раствора, стандартного раствора А, стандартного
раствора Б и стандартного раствора В. Пластинку с нанесёнными пробами
высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и
хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около
80—90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в
потоке воздуха до удаления следов растворителей, просматривают в
УФ-свете при 254 нм и определяют зоны адсорбции примеси E и примеси G.
Затем пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, просматривают
в УФ-свете при длине волны 365 нм и определяют зону адсорбции примеси F.

_Фактор удерживания (R~f~) соединений_. Примесь А – около 0; примесь В –
около 0,2; валацикловир – около 0,3; примесь С – около 0,5; примесь D –
около 0,6; примесь E – около 0,7; примесь F – около 0,75; примесь G –
около 0,79; примесь С маскируется передним краем пятна из-за
валацикловира; примеси F и G могут совместно элюироваться, но это не
оказывает отрицательного влияния на их количественную оценку, поскольку
они визуализируются по-разному.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограммах стандартного
раствора А, стандартного раствора Б и стандартного раствора В чётко
видны по три зоны адсорбции.

Зона адсорбции примеси Е на хроматограмме испытуемого раствора по
совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна
превышать зону адсорбции соответствующей примеси на хроматограмме
стандартного раствора Б (не более 0,20 %).

Зона адсорбции примеси F на хроматограмме испытуемого раствора по
совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна
превышать зону адсорбции соответствующей примеси F на хроматограмме
стандартного раствора А (не более 0,3 % в пересчёте на гидрохлорид).

Зона адсорбции примеси G на хроматограмме испытуемого раствора по
совокупности величины и интенсивности поглощения окраски не должна
превышать зону адсорбции соответствующей примеси G на хроматограмме
стандартного раствора В (не более 0,05 %).

*_2. Примеси A, B, I и R._* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы
используют свежеприготовленными.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Хлорная кислота—метанол—вода 5:50:950.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в 50 мл хлористоводородной
кислоты 0,5 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца валацикловира гидрохлорида._ В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца валацикловира гидрохлорида, растворяют в
хлористоводородной кислоте 0,5 % и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной
кислотой 0,5 % до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной
кислотой 0,5 % до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._
Растворяют 2,5 мг фармакопейного стандартного образца валацикловира для
проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A,
B, C, D, H, I, J, M и R в 5,0 мл хлористоводородной кислоты 0,5 %.

*Примечание*

Примесь A +
(гуанин): 2-амино-1,7-дигидро-6__Н__-пурин-6-он [73-40-5].

Примесь В +
(ацикловир):
2-амино-[(2-гидроксиэтокси)метил]-1,9-дигидро-6__H__-пурин-6-он
[59277-89-3].

Примесь I +
(ацетат ацикловира):
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}ацетат
[102728-64-3].

Примесь R +
(D-валацикловир):
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2__R__)-2-амино-3-метилбутаноат]
[142963-60-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",^,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |150 × 4 мм, силикагель модифицированный оптически активным
краун-эфиром для хиральной хроматографии, 5 мкм; | |

|Температура колонки |10 °С; | |

|Скорость потока |0,75 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время удерживания |1,5–кратное от времени удерживания пика
валацикловира. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Валацикловир – 1 (около
21 мин); примесь А – около 0,2; примесь B – около 0,2; примесь I – около
0,4; примесь _R_ – около 0,6; примесь С – около 0,6; примесь D – около
0,7; примесь M – около 1,3.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков примесей A, B, C, D,
I, M и R используют относительное время удерживания соединений,
хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической
системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному
образцу валацикловира для проверки пригодности хроматографической
системы.

_Пригодность хроматографической системы._

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической
системы _отношение максимум/минимум (p/v)_ должно быть не менее 1,5, где
_p_ – высота пика примеси D по отношению к базовой линии, _v_ – высота
над базовой линией самой низкой точки кривой, отделяющей этот пик от
пика, обусловленного примесями C и R.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей на хроматограмме испытуемого раствора умножают на
поправочный коэффициент: примесь А – 0,7; примесь В – 0,7.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси I – не более 0,2 %;

- площадь пика примеси R – не более 3,0 %; разность между содержанием
примеси C (тест В), и соэлюирующих примесей C и R, определённых в этом
тесте;

- сумма площадей пиков примесей А и В – не более 2,0 %.

Не учитывают любые пики примесей кроме пиков А+В, С+R или I; а также
пики данных примесей, площадь которых не превышает площадь основного
пика валацикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,03 %).

*_3. Другие примеси._* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Трифторуксусная кислота—вода 2:1000.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Трифторуксусная кислота—метанол 2:1000.

_Растворитель._ Спирт 96 %—вода 1:4.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора этим же
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца валацикловира для проверки пригодности
хроматографической системы (содержит примеси A, B, C, D, H, I, J, M и
R)._ В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мг фармакопейного
стандартного образца валацикловира для проверки пригодности
хроматографической системы (содержит примеси _A, B, C, D, H_, _I, J, M_
и _R_), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем
до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь С (N-метилацикловир): +
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2__S__)-3-метил-2-(метиламино)бутаноат]
[1346747-65-6].

Примесь D: +
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2__S__)-3-метил-2-(этиламино)бутаноат]
[1346747-69-0].

Примесь Н (аланинат ацикловира):+
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2__S__)-2-аминопропаноат]
[84499-64-9].

Примесь J (ацикловир L-изолейцинат): +
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2__S__,3__S__)-2-амино-3-метилпентаноат]
[142963-63-1].

Примесь M (N-формилвалацикловир): +
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9__H__-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2__S__)-3-метил-2-формамидобутаноат]
[847670-62-6].

_Хроматографические условия_

[cols=",^,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,6 мм, силикагель фенилгексилсилильный для
хроматографии, 5 мкм; | |

|Температура колонки |15 °С; | |

|Скорость потока |0,8 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–5 |90 |10
|5–35 |90 → 60 |10 → 40
|===

Хроматографируют *раствор сравнения,* раствор *стандартного образца
валацикловира* для проверки пригодности хроматографической системы и
испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Валацикловир – 1 (около 19
мин); примесь А – около 0,3; примесь В – около 0,4; примесь Н – около
0,5; примесь С – около 1,06; примесь I – около 1,09; примесь D – около
1,2; примесь J – около 1,3; примесь М – около 1,6.

_Идентификация примесей_. Для идентификации примесей *A, B, C, D, H, I,
J и M* используют относительное время удерживания соединений,
хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу
валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы, и
хроматограмму раствора *стандартного образца валацикловира* для проверки
пригодности хроматографической системы.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора *стандартного образца валацикловира* для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _отношение максимум/минимум (p/v)_ должно быть не менее 2,5, где _p_ –
высота пика примеси С по отношению к базовой линии, _v_ – высота над
базовой линией самой низкой точки кривой, отделяющей этот пик от пика
валацикловира;

- полученная хроматограмма идентична хроматограмме, прилагаемой к
фармакопейному стандартному образцу валацикловира для проверки
пригодности хроматографической системы.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют
согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

_Допустимое содержание примесей_:

- примесь М – не более 1,5 %;

- примесь D – не более 0,5 %;

- примесь С – не более 0,3 %;

- примеси Н – не более 0,1 %;

- примесь J – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,05 %;

- сумма всех примесей – не более 5,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,6 площади
основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Не учитывают пики примесей примесей А, В и I.

*Вода.* Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», способ 1). Для
определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

*Палладий.* Не более 0,001 %. (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

_Растворитель._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,6 г
хлористоводородной кислоты концентрированной, растворяют в 90 мл
диметилсульфоксида и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до
метки.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Калибровочные растворы._ Готовят калибровочные растворы, содержащие
2 мкг/мл, 1 мкг/мл и 0,2 мкг/мл палладия путем доведения соответственно
2,0 мл, 1,0 мл и 0,2 мл стандартного раствора палладия 20 мкг/мл до 20,0
мл.

_Источник излучения._ Палладиевая лампа с полым катодом.

_Длина волны._ 340,5 нм.

Определяют эффективные значения атомной абсорбции испытуемого раствора и
калибровочных растворов. По калибровочной прямой рассчитывают
концентрацию палладия в субстанции.

*Хлориды*. От 9,4 % до 9,9 % в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество.

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 100 мл воды, прибавляют
0,2 мл азотной кислоты концентрированной и титруют 0,1 М раствором
серебра нитрата. Точку эквивалентности определяют потенциометрически
(ОФС «Потенциометрическое титрование»), используя серебряный и
серебряно-хлорсеребряный электрод сравнения или комбинированный
серебряный электрод. Не учитывают результаты первого титрования, которое
проводят для кондиционирования электродов.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 3,543 мг Cl.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Примеси A, B, I и R.» со следующими изменениями:

Хроматографируют раствор стандартного образца валацикловира гидрохлорида
и испытуемый раствор.

Содержание валацикловира гидрохлорида C~13~H~20~N~6~O~4~∙HCl в
субстанции в процентах (_X_) в пересчёте на безводное и
свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0643_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика валацикловира на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика валацикловира на хроматограмме раствора стандартного образца валацикловира гидрохлорида; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца валацикловира гидрохлорида, мг; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_P_	–	содержание валацикловира гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце валацикловира гидрохлорида,%.


[discrete]
===== Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


