[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯИ*
|===

 
==== ФС.2.1.0175 Рутозид тригидрат

*Рутозид* +
*Rutosidum trihydricum* 

*Взамен ФС.2.1.0175.18*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0175_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

3-{[6-_O_-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2-(3,4-дигидроксифенил)-
5,7-Дигидрокси-4__H__-1-бензопиран-4-он тригидрат.

[discrete]
===== Свойства

Cодержит не менее 95,0 % и не более 101,0 % рутозида С~27~H~30~O~16~ в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество.

*Описание.* Жёлтый или зеленовато-жёлтый кристаллический порошок.

*Растворимость.* Растворим в метаноле, умеренно или мало растворим в
спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

+*+ Растворяется в растворах гидроксидов щелочных металлов.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата.

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

[none]
* _Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят этим же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл
полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.
Раствор используют свежеприготовленным.
* Спектр поглощения испытуемого раствора в области спектрального диапазона
от 210 до 450 нм должен иметь максимумы при 257 нм и 358 нм. Удельное
поглощение при максимуме поглощения при 358 нм должно быть от 305 до
330 нм (безводное вещество).

[arabic,start=3]
. _Тонкослойная хроматография_ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

[none]
* _Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем силикагеля F~254~.
* _Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг
субстанции, растворяют в метаноле, доводят этим же растворителем до
метки.
* _Раствор стандартного образца рутозида тригидрата._ В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца
рутозида тригидрата, растворяют в метаноле, доводят этим же
растворителем до метки.
* _Подвижная фаза (ПФ)._ Бутанол―уксусная кислота
безводная―вода―метилэтилкетон―этилацетат 5:10:10:30:50.
* На линию старта хроматографической пластинки наносят по 10 мкл
испытуемого раствора (25 мкг) и раствора стандартного образца рутозида
тригидрата (25 мкг).
* Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в
(предварительно насыщенную, в течение 1 ч) камеру с ПФ и
хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около
80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до
удаления следов растворителей, опрыскивают смесью 2,5 мл железа (III)
хлорида раствора 10 % и 7,5 мл раствора калия феррицианида и
просматривают в течение 10 мин в видимом свете.
* _Результат._ Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого
раствора по положению и окраске должна соответствовать зоне адсорбции
рутозида тригидрата на хроматограмме раствора стандартного образца
рутозида тригидрата.

[arabic,start=4]
. _Качественная реакция.__ Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл спирта
96 %, прибавляют 1 г цинка и 2 мл хлористоводородной кислоты раствора
25 %. Раствор должен окраситься в красный цвет.

[discrete]
===== Испытания

*Вещества нерастворимые в метаноле*. Не более 3,0 %.

_Испытуемый раствор._ Встряхивают 2,5 г субстанции в 50 мл метанола при
температуре 20–25 °С в течение 15 мин. Раствор фильтруют при пониженном
давлении через фильтр из пористого стекла с диаметром пор 1,6 мкм,
предварительно высушенный в течение 15 мин при температуре 100–105 °C,
охлаждённый в эксикаторе и взвешенный. Фильтр промывают тремя порциями
метанола по 20 мл, сушат при температуре 100–105 °C в течение 30 мин,
охлаждают и взвешивают. Масса вещества на фильтре не должна превышать
75 мг.

*Светопоглощающие примеси.* Спектр поглощения полученного раствора в
диапазоне длин волн от 450 до 800 нм в кювете с толщиной слоя 1 см не
должен превышать 0,10.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г
субстанции, растворяют в 40 мл 2-пропанола, перемешивают в течение
15 мин, доводят объём раствора до метки и фильтруют. В качестве раствора
сравнения используют 2-пропанол.

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы должны быть свежеприготовленными.

_Буферный раствор._ В химическом стакане вместимостью 1000 мл помещают
15,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата, растворяют в 900 мл воды,
доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0.
Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью
1000 мл, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют
через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

_Подвижная фаза А_ (ПФА). Тетрагидрофуран—буферный раствор 5:95.

_Подвижная фаза Б_ (ПФБ). Тетрагидрофуран—буферный раствор 40:60.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл метанола и доводят объём
раствора ПФБ до метки.

_Раствор стандартного образца рутозида тригидрата._ В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 10,0 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца рутозида тригидрата, растворяют в 2 мл метанола и
доводят объём раствора ПФБ до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФБ до метки и
перемешивают.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл раствора сравнения,
доводят объём раствора ПФБ до метки и перемешивают. Концентрация
раствора составляет 0,1 % от концентрации испытуемого раствора.

*Примечание*

Примесь А: +
5,7-дигидрокси-3-(β-D-глюкофуранозилокси)-2-(3,4-дигидроксифенил)-4__H__-1-бензопиран-4-он
(изокверцитрозид). +
[21637-25-2].

Примесь В: +
5,7-дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-{[6-_O_-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-4__H__-1-бензопиран-4-он. +
[17650-84-9].

Примесь С: +
3,5,7-тригидрокси-2-(3,4-дигидроксифенил)-4__H__-1-бензопиран-4-он
(кверцетин). +
[117-39-5].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; |

|Температура колонки |30 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 280 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–10 |50 → 0 |50 → 100
|10–15 |0 |100
|15–16 |0 → 50 |100 → 50
|16–20 |50 |50
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор стандартного образца рутозида
тригидрата, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Рутозид – 1 (около 7 мин);
примесь В – около 1,1; примесь А – около 1,2; примесь С – около 2,5.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца рутозида тригидрата _разрешение (R)_ между пиками
рутозида и примеси B должно быть не менее 2,5.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные
коэффициенты: примеси А – 0,8; примеси В – 1,0; примеси С – 0,5.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь каждого из пиков примесей А, В и С не должна превышать площадь
основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать двукратную
площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более
4,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на
хроматограмме раствора _для проверки чувствительности хроматографической
системы_ (менее 0,1 %).

Содержание любой единичной примеси в субстанции в процентах (_Х_)
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0175_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	среднее значение площади пика любой единичной примеси на хроматограммах испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	среднее значение площади пика рутозида на хроматограммах раствора сравнения; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата, мг; +
	_P_	–	содержание рутозида тригидрата в стандартном образце рутозида тригидрата,%; +
	_K_	–	поправочный коэффициент для единичной примеси.


Суммарное содержание примесей в субстанции вычисляют арифметическим
сложением найденного содержания каждой единичной примеси.

*Вода.* От 7,5 % до 9,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,10 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия
(титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл диметилформамида и
титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида. Конечную точку
титрования определяют потенциометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1__ __М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует
30,53 мг рутозида С~27~H~30~O~16~.

[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


