[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
 


==== ФС.2.1.0499 Трипторелина ацетат

*Трипторелин* +
*Triptorelini acetas* 

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0499_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

5-Оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-D-триптофил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролилглицинамида
ацетат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % трипторелина
C~64~H~82~N~18~O~13~ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей и уксусной кислоты вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белого или почти белого со слабым желтоватым оттенком цвета
порошок без запаха или со слабым запахом уксусной кислоты.

*Растворимость*. Легко растворим в воде и в уксусной кислоте ледяной.

[discrete]
===== Идентификация

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика трипторелина на
хроматограмме раствора стандартного образца трипторелина (раздел
«Количественное определение»).

. _Аминокислотный состав_. Определение проводят в соответствии с ОФС
«Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1, анализ по методу 5).
Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных
долях, принимая за единицу одну седьмую суммарного мольного содержания
глутаминовой кислоты, серина, гистидина, глицина, аргинина, тирозина,
лейцина, пролина по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0499_2.png[]
|===

где	_n~i~_	–	количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль; +
	_∑n(Glu,His,Gly,Arg,Tyr,Leu,Pro)_ –	сумма мольного содержания глутаминовой кислоты, гистидина, глицина, аргинина, тирозина, лейцина и пролина, мкмоль.


*Относительное содержание аминокислот* должно быть в следующих пределах:
глутаминовая кислота – от 0,90 до 1,10; серин – от 0,70 до 1,10;
гистидин – от 0,90 до 1,10; глицин – от 0,90 до 1,10; аргинин – от 0,90
до 1,10; тирозин – от 0,90 до 1,10; лейцин – от 0,90 до 1,10 и пролин –
от 0,90 до 1,10.

*Удельное вращение.* От –65,0 до –75,0 в пересчёте на безводное и
свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты
вещество (0,5 % раствор субстанции в уксусной кислоты растворе 1 %,
ОФС «Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды, свободной
от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и
степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора*. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»,
метод 2).

*pH раствора.* От 4,0 до 6,0 (0,2 % раствор субстанции, ОФС «Ионометрия»,
метод 3).

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Раствор А._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 7,85 мл
фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до
метки. К 700 мл полученного раствора прибавляют 100 мл ацетонитрила,
перемешивают и доводят значение pH триэтиламином до 2,5.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Ацетонитрил—раствор А 100:900.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца трипторелина._ В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца трипторелина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор натрия азида._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
1,0 г натрия азида, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до
метки, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин и пропускают
через раствор аргона в течение 10 мин.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора раствором натрия азида до
метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора раствором натрия азида до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
фармакопейного стандартного образца трипторелина ацетата и 5 мг
фармакопейного стандартного образца D-Trp-трипторелина, растворяют в
40 мл воды, доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы_. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и
доводят объём раствором натрия азида до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; |

|Температура колонки |42 °С; | | 

|Температура образца |5 °С; | | 

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | | 

|Детектор |спектрофотометрический, 220 нм; | | 

|Объём пробы 2+|
20 мкл – раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы; +
40 мкл – остальные растворы; | 
|Время хроматографирования |40 мин. | | 
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый
раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Трипторелин – 1 (около
20 мин); примесь D-Pyr-трипторелин – около 0,6; D-Trp-трипторелин –
около 0,8.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси
D-Trp-трипторелин используют относительное время удерживания соединений.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы должен
присутствовать пик D-Trp-трипторелина; _разрешение (R~S~)_ между пиком
трипторелина и пиком D-Trp-трипторелина должно быть не менее 3,0.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика
трипторелина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную
площадь пика трипторелина на хроматограмме раствора сравнения (не более
3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика трипторелина на
хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической
системы (менее 0,05 %).

*Вода.* Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для
определения используют около 20,0 мг (точная навеска) субстанции.

*Уксусная кислота.* От 4,5 до 12,0 %. (ОФС «Определение уксусной кислоты
в синтетических пептидах»).

*Остаточные органические растворители*. В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины*. Не более 90 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»).

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца трипторелина и испытуемый
раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца трипторелина:

- _фактор асимметрии пика (A~S~)_ трипторелина должен быть не более 2,5;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика трипторелина
должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание трипторелина C~64~H~82~N~18~O~13~ в субстанции в процентах в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей и уксусной кислоты вещество (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0499_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика трипторелина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика трипторелина на хроматограмме раствора стандартного образца трипторелина; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца трипторелина, мг; +
	_W_	–	содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_A_	–	содержание уксусной кислоты в субстанции,%; +
	_P_	–	содержание трипторелина в фармакопейном стандартном образце трипторелина,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


