[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===



===== ОФС.1.2.1.2.0004 Газовая хроматография

*Взамен ОФС.1.2.1.2.0004.15*

 
Газовая хроматография (ГХ) представляет собой метод хроматографического
разделения, основанный на различном распределении веществ между двумя
несмешивающимися фазами, в котором газ-носитель, являющийся подвижной
фазой, проходит через неподвижную фазу, находящуюся в колонке. Метод
применим к веществам или их производным, летучим при используемых
температурах.

Газовая хроматография основана на механизмах адсорбции или распределения
по массам.

====== Область применения

Газовую хроматографию используют для оценки чистоты, установления
подлинности и количественного определения лекарственных средств в
испытаниях по показателям «Посторонние примеси», «Однородность
дозирования», «Растворение», «Количественное определение», «Остаточные
органические растворители» и др.

====== Оборудование

Газовый хроматограф состоит из устройства ввода пробы (инжектора),
хроматографической колонки, помещённой в термостат, одного или
нескольких детекторов и регистрирующего устройства (интегрирующее
устройство со специальным программным обеспечением или самописцем).

Газ-носитель проходит с заданной скоростью или давлением через колонку,
а затем через детектор.

Хроматографирование проводят при постоянной температуре или в
соответствии с заданной температурной программой.

*_Устройство ввода пробы_*

_Ввод жидкой пробы_ осуществляют либо непосредственно в начало колонки с
использованием шприца или инжекторного клапана, либо в испаритель,
который оснащён делителем потока.

_Ввод газообразной пробы_ осуществляют непосредственно в колонку с
помощью соответствующего крана-дозатора, который оснащён дозирующей
петлей и делителем потока. На вход крана дозатора пробу подают с помощью
газоплотного шприца или напрямую из источника анализируемого газа с
помощью регулятора давления (редуктора или вентиля точной регулировки).

_Ввод паровой фазы_ осуществляют с использованием статической или
динамической системы ввода.

_Статическая парофазная_ система ввода включает термостатируемую
нагревающую камеру для образцов, в которую помещены закрытые флаконы с
твёрдыми или жидкими образцами на фиксированный период времени,
позволяющая летучим компонентам образца достичь равновесия между
негазовой и паровой фазами. После достижения равновесия заданное
количество паровой фазы из флаконов вводят в газовый хроматограф.

_Динамическая парофазная_ система ввода (продувка и улавливание)
включает барботажную установку, при помощи которой летучие вещества в
растворе продувают газом-носителем через поглотительную трубку (ловушку)
при невысокой температуре. Удерживаемые вещества затем десорбируются в
подвижную фазу при быстром нагревании поглотительной трубки.

*_Колонки_*

Используют несколько типов хроматографических колонок: насадочные
(набивные), микронасадочные, капиллярные, поликапиллярные.

_Насадочные колонки_ изготавливают из металла (обычно нержавеющая
сталь), стекла, фторопласта, которым придают спиральную форму.
Внутренний диаметр насадочных колонок составляет от 2 до 4 мм, а длина –
от 0,5 до 4–5 м.

_Микронасадочные колонки_ отличаются от насадочных колонок только
диаметром трубок, равным 0,5–1,0 мм. Длина таких колонок обычно от 0,5
до 2 м.

_Капиллярные колонки_ изготавливают из плавленого кварца или металла.
Внутренний диаметр составляет от 0,10 мм до 0,53 мм, длина не менее 5 м,
толщина неподвижной жидкой фазы от 0,1 мкм до 5,0 мкм.

_Поликапиллярные колонки_ представляют собой пакеты параллельно
работающих капилляров, внутренний диаметр которых составляет около
40 мкм, длина до 1 м, общим числом до 1000 и более.

*_Неподвижные фазы_*

Газовую хроматографию подразделяют на два вида: газоадсорбционную и
газожидкостную хроматографии. В фармацевтическом анализе наиболее
распространена газожидкостная хроматография.

В _газоадсорбционной хроматографии_ в качестве сорбентов (адсорбентов)
используют неорганические (силикагель, графитированная термическая сажа,
молекулярные сита – алюмосиликаты натрия и кальция) и полимерные
пористые сорбенты.

В _газожидкостной хроматографии_ неподвижная фаза (абсорбент)
представляет собой жидкость, нанесённую на твёрдый носитель. Носитель –
относительно инертный адсорбент с низкой удельной поверхностью, на
которой должна удерживаться неподвижная фаза в виде плёнки равномерной
толщины. Применяют минеральные и полимерные носители. Большинство
минеральных носителей представляют собой переработанные диатомиты.
Обычно используют носители с размерами частиц в интервалах от 125 до
150 мкм или от 150 до 180 мкм.

В капиллярных колонках слой сорбента наносят на внутреннюю поверхность
капилляра в виде слоя жидкой неподвижной фазы или в виде слоя
адсорбента, роль которого чаще всего выполняет полимерная плёнка.

*_Подвижная фаза_*

В качестве газа-носителя для насадочных колонок обычно используют гелий,
азот и аргон, для капиллярных – азот, гелий и водород.

Скорость потока газа-носителя влияет на время удерживания и
характеристики пика: время удерживания прямо пропорционально длине
колонки, а разрешение пропорционально квадратному корню из длины
колонки. Для набивных колонок скорость потока газа-носителя выражают в
миллилитрах в минуту при атмосферном давлении и комнатной температуре.
Скорость потока измеряют при рабочей температуре колонки на выходе из
детектора с помощью калиброванного механического устройства или пенного
измерителя. Линейная скорость газа-носителя через набивную колонку
обратно пропорциональна корню квадратному из внутреннего диаметра
колонки для заданного объёма потока. Скорости потока 60 мл/мин при
внутреннем диаметре колонки 4 мм и 15 мл/мин при внутреннем диаметре
2 мм дают идентичные линейные скорости и, следовательно, близкие времена
удерживания.

*_Детекторы_*

В зависимости от цели анализа применяют следующие типы детекторов:
пламенно-ионизационный, электронного захвата, азотно-фосфорный,
масс-спектрометрический, термокондуктометрический,
ИК-спектрофотометрический с Фурье-преобразованием и другие.

Обычно используют пламенно-ионизационные детекторы. Выбор детектора
определяется основными характеристиками (чувствительность, предел
детектирования, линейность, быстродействие и селективность), которые в
наибольшей степени соответствуют цели анализа и условиям его проведения.

====== Метод

Хроматографирование в газовой хроматографии проводят валидированными
методиками в соответствии с установленными параметрами
хроматографической системы.

В описании должны быть указаны: тип детектора, тип колонки (насадочная
или капиллярная), материал и геометрические параметры колонки, сорбент
(тип твёрдого носителя и его характеристики, неподвижная жидкая фаза и
её количество), метод введения пробы и его параметры, температура
испарителя, колонки и детектора, газ-носитель и его расход.

Оценка хроматографического разделения проводится на основании
пригодности хроматографической системы, указанной в методике испытаний.
Критерии оценки пригодности хроматографической системы описаны в ОФС
«Хроматография».

*_Cтатическая парофазная газовая хроматография_*

Cтатическая парофазная газовая хроматография является наиболее
подходящим методом для разделения и определения летучих соединений,
которые присутствуют в твёрдых или жидких образцах. Метод основан на
анализе паровой фазы, находящейся в равновесии с твёрдой или жидкой
фазой.

_Прибор_

Состоит из газового хроматографа, снабжённого блоком для ввода
испытуемого образца, который связан с модулем автоматического контроля
давления и температуры. При необходимости используют устройство для
удаления растворителей.

Испытуемый образец вносят во флакон, снабжённый подходящей пробкой и
клапанной системой, которая регулирует прохождение газа-носителя. Флакон
помещают в термостатируемую камеру с температурой, устанавливаемой в
соответствии со свойствами испытуемого образца. Флакон выдерживают при
заданной температуре в течение времени, достаточного для установления
равновесия между твёрдой или жидкой фазой и паровой фазой.

Во флакон вводят газ-носитель и по истечении указанного времени
открывают клапан, чтобы газ поступал в хроматографическую колонку,
перенося с собой перешедшие в паровую фазу компоненты.

Вместо специально оснащённого блока для ввода проб хроматографа возможно
использование газовых шприцов обычного хроматографа. Уравновешивание в
таком случае проводят в отдельной термостатируемой камере, а паровую
фазу вводят в колонку с соблюдением необходимых мер предосторожности для
предотвращения любых изменений в равновесной системе.

Настраивают прибор для получения необходимого сигнала, используя
подготовленные образцы сравнения.

_Метод прямой калибровки_

В одинаковые флаконы раздельно помещают испытуемый образец и каждый из
образцов сравнения, приготовленные, как указано в методике испытаний,
избегая контакта между блоком для ввода проб и образцами. Флаконы
герметично закрывают и помещают в термостатируемую камеру с температурой
и давлением, указанными в методике испытаний. После установления
равновесия паровую фазу хроматографируют в указанных условиях.

_Метод стандартных добавок_

Равные объёмы испытуемого образца помещают в одинаковые подходящие
флаконы. Во все флаконы, кроме одного, прибавляют указанные количества
раствора сравнения, содержащего известную концентрацию определяемого
вещества, для получения ряда образцов с равномерно увеличивающимися
концентрациями этого вещества. Флаконы герметично закрывают и помещают в
термостатируемую камеру с температурой и давлением, указанными в
методике испытаний. После установления равновесия хроматографирование
проводят в указанных условиях.

Уравнение линейной зависимости рассчитывают методом наименьших
квадратов. По полученному уравнению вычисляют концентрацию определяемого
вещества в испытуемом образце.

Допустимо определение концентрации с использованием графического метода.
Для этого по оси ординат откладывают средние значения полученных
результатов, а по оси абсцисс — концентрации стандартных добавок
определяемого вещества. Экстраполируют линию, проходящую через
полученные точки, до пересечения с осью абсцисс. Расстояние между этой
точкой и началом координат представляет собой концентрацию определяемого
вещества в испытуемом образце.

_Метод последовательных отборов (многократная парофазная экстракция)._
При использовании многократной парофазной экстракции следуют методике
испытаний.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


