[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0439 Ламивудин (Lamivudinum)


*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0439_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

4-Амино-1-[(2__R__,5__S__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]
пиримидин-2(1__H__)-он.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % ламивудина
C~8~H~11~N~3~O~3~S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый порошок.

+*+ Проявляет полиморфизм.

*Растворимость.* Растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, мало
растворим в спирте 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^–1^ по положению полос поглощения
должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца
ламивудина.

[none]
* Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по
отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха
и записывают спектры сухих остатков.

[arabic,start=2]
. _ВЭЖХ_. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика ламивудина на
хроматограмме раствора стандартного образца ламивудина (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От –97,0 до –99,0 в пересчёте на безводное вещество
(1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

*Оптическая плотность.* Оптическая плотность 5 % раствора субстанции,
измеренная при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 4 см, не
должна превышать 0,0015 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

*Родственные примеси*

*1. _Энантиомерная чистота (Примесь D)._* Определение проводят методом
ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Раствор аммония ацетата._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
7,7 г аммония ацетата, растворяют в 900 мл воды и доводят обьём раствора
водой до метки.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Метанол—раствор аммония ацетата 50:950.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца ламивудина для проверки пригодности
хроматографической системы, содержащей примесь D, растворяют в ПФ и
доводят объём раствора ПФ до метки.

*Примечание*

Примесь D: +
4-Амино-1-[(2__S__,5__R__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1__H__)-он
[134680-32-3].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель β-циклодекстрин деривативный для
хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |15–30 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 270 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|двухкратное от времени удерживания пика
ламивудина. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Ламивудин – 1 (около 8
минут); примесь D – около 1,2.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси D используют
относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для
проверки пригодности хроматографической системы.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы: _отношение
максимум/минимум (p/v)_ между пиками ламивудина и примеси D должно быть
не менее 15.

_Допустимое содержание примеси D_. Не более 0,3 %. Содержание примеси D
в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования
(ОФС «Хроматография»).

Вычисляется сумма площадей пиков в процентах только примесей с
относительным временем удерживания от 1,2 до 1,5, за вычетом процентного
содержания примеси В, полученного в испытании «Родственные примеси».

_**2. Другие примеси.**_ Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

_Буферный раствор._ Растворяют 1,9 г аммония ацетата в 900 мл воды,
доводят значение pH уксусной кислотой ледяной до 3,8, количественно
переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора
водой до метки.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Метанол – буферный раствор 50:950.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг
субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
полученного раствора, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца примеси С_. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 5 мг (точная навеска) салициловой кислоты, растворяют в
ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, растворяют в ПФ и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг
(точная навеска) цитозина и 5 мг (точная навеска) урацила, растворяют в
ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную
колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора,
растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная
навеска) фармакопейного стандартного образца ламивудина для проверки
разделительной способности хроматографической системы, содержащей
примеси А и В, растворяют в 2,0 мл ПФ, добавляют 1,0 мл стандартного
раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

*Примечание*

Примесь А: +
_rac_-(2__R__,5__S__)-5-[4-амино-2-оксо-5-фторпиримидин-1(2__H__)-ил]-1,3-оксатиолан-2-карбоновая
кислота [173602-25-0].

Примесь В: +
4-амино-1-[(2__R__,5__R__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1__H__)-он,
CAS 139757-68-9 и  +
4-амино-1-[(2__S__,5__S__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1__H__)-он
[136846-20-3].

Примесь С (салициловая кислота): 2-Гидроксибензойная кислота [69-72-7].

Примесь Е (цитозин): 4-аминопиримидин-2(1__H__)-он [71-30-7].

Примесь F (урацил): Пиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион [66-22-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный
по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |35 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 277 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|3-кратное от времени удерживания пика
ламивудина. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси С и
испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Ламивудин – 1 (около 8
минут); примесь Е – около 0,28; примесь F – около 0,32;. примесь A –
около 0,36; примесь B – около 0,91; примесь J – около 1,45; примесь C –
около 2,32.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков примесей A, B, E и F
используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму
раствора для проверки разделительной способности хроматографической
системы. Для идентификации пика примеси С используют относительное время
удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца
примеси С.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы:

- _разрешение_ (_R~s~_) между пиками примесей F и A должно быть не менее
1,5;

- _разрешение_ (_R~s~_) между пиками примеси В и ламивудина должно быть
не менее 1,5.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножают на соответствующие коэффициенты:
примесь Е – 0,6; примесь F – 2,2; примесь J – 2,2.

_Допустимое содержание примесей_. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать трёхкратную площадь пика
ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать двухкратную площадь пика
ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать площадь основного пика на
хроматограмме раствора стандартного образца примеси С (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должны превышать площадь пика
ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную
площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади
основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

*Вода.* Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца ламивудина._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца ламивудина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ламивудина и испытуемый
раствор.

Содержание ламивудина C~8~H~11~N~3~O~3~S в субстанции в пересчёте на
безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество
в процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0439_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика ламивудина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора стандартного образца ламивудина; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца ламивудина, мг; +
	_W_	-	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_P_	-	содержание ламивудина в фармакопейном стандартном образце ламивудина,%.


[discrete]
===== Хранение

В сухом защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


