[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0515 Натамицин (Natamycinum)

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0515_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(1__R__,3__S__,5__R__,7__R__,8__E__,12__R__,14__E__,16__E__,18__E__,20__E__,22__R__,24__S__,25__R__,26__S__)-22-[(3-Амино-3,6-дидезокси-β-D-маннопиранозил)окси]-1,3,26-тригидрокси-12-метил-10-оксо-6,11,28-триоксатрицикло[22.3.1.0^5,7^]октакоза-8,14,16,18,20-пентаен-25-карбоновая
кислота.

Cодержит не менее 90,0 % и не более 102,0 % натамицина C~33~H~47~NO~13~
в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* От белого до белого с желтоватым оттенком цвета
кристаллический порошок.

*Растворимость*. Растворим в диметилформамиде, растворим или мало
растворим в уксусной кислоте ледяной, мало растворим в метаноле,
практически нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика натамицина на
хроматограмме раствора стандартного образца натамицина (раздел
«Количественное определение»).

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

[none]
* _Растворитель._ Уксусная кислота ледяная**—**метанол 1:1000.
* _Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 50 мг
субстанции и прибавляют 5 мл воды. Прибавляют 100 мл растворителя,
встряхивают в темноте до растворения и доводят объём растворителем до
метки. В мерную колбу вместимость 50 мл помещают 1 мл полученного
раствора и доводят объём растворителем до метки.
* _Раствор стандартного образца натамицина._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 25 мг стандартного образца натамицина и прибавляют
2,5 мл воды. Прибавляют 50 мл растворителя, встряхивают в темноте до
растворения и доводят объём растворителем до метки. В мерную колбу
вместимость 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём
растворителем до метки.
* Спектры поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца
натамицина в области от 190 до 400 нм должны иметь максимумы и минимумы
при одних и тех же длинах волн.

[arabic,start=3]
. _Качественная реакция._ К 3 мг натамицина прибавляют 1 мл
хлористоводородной кислоты концентрированной; должно появиться
сине-фиолетовое окрашивание.

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От +243 до +259 в пересчёте на безводное вещество
(0,4 % раствор субстанции в уксусной кислоте безводной, ОФС «Оптическое
вращение»).

*рН.* От 5,0 до 7,5 (1 % суспензия в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие натамицин, используют свежеприготовленными и
защищают от света.

_Растворитель._ Хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М—метанол 1:99.

_Подвижная фаза (ПФ)._ В коническую колбу вместимостью 1500 мл помещают
3,0 г аммония ацетата и 1,0 г аммония хлорида, растворяют в 760 мл воды,
прибавляют 5,0 мл тетрагидрофурана и 240 мл ацетонитрила. Фильтруют
через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг
(точная навеска) субстанции, прибавляют 5 мл тетрагидрофурана и
обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин. Прибавляют 60 мл метанола,
25 мл воды, перемешивают, охлаждают до комнатной температуры и доводят
объём раствора водой до метки. Фильтруют через мембранный фильтр с
размером пор 0,45 мкм.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в
растворителе и выдерживают в течение 2 часов.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы_. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и
доводят объём раствора водой до метки.

*Примечание*

Метиловый эфир натамицина:
Метил[(1__R__,3__S__,5__R__,7__R__,8__E__,12__R__,14__E__,16__E__,18__E__,20__E__,22__R__,24__S__,25__R__,26__S__)-22-[(3-амино-3,6-дидезокси-β-D-маннопиранозил)окси]-1,3,26-тригидрокси-12-метил-10-оксо-6,11,28-триоксатрицикло[22.3.1.0^5,7^]октакоза-8,14,16,18,20-пентаен-25-карбонат].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Предколонка 2+|20 × 3,9 мм, *силикагель октадецилсилильный,
эндкепированный, для хроматографии*, 5 мкм; |

|Колонка |250 × 4,6 мм, *силикагель октадецилсилильный, эндкепированный,
для хроматографии*, 5 мкм; | |

|Температура колонки |40 °С; | |

|Скорость потока |3,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 303 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|2-кратное от времени удерживания основного
вещества. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки пригодности
хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Натамицин – 1 (около
14 мин), метиловый эфир натамицина – около 1,3.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика метилового эфира
натамицина используют относительное время удерживания соединений и
хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической
системы.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика натамицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической
системы:

- _разрешение (R)_ между пиками натамицина и метилового эфира натамицина
должно быть не менее 2,5;

- _фактор ассиметрии пика_ (_A~S~_) натамицина должен быть не более
1,3.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика метилового эфира натамицина не должна более чем в 2 раза
превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не
более 2,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади
основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную
площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более
4,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на
хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической
системы (менее 0,05 %).

*Вода.* От 6,0 % до 9,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца натамицина._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца натамицина, прибавляют 5 мл тетрагидрофурана и обрабатывают
ультразвуком в течение 10 мин. Прибавляют 60 мл метанола, 25 мл воды,
перемешивают, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём
раствора водой до метки. Фильтруют через мембранный фильтр с размером
пор 0,45 мкм.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор стандартного образца натамицина и испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора
стандартного образца натамицина:

- _фактор асимметрии пика (A~S~)_ натамицина должен быть не более 2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика натамицина
должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание натамицина C~33~H~47~NO~13~ в пересчёте на безводное и
свободное от органических растворителей вещество в процентах (_X_)
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0515_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика натамицина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика натамицина на хроматограмме раствора стандартного образца натамицина; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца натамицина, мг; +
	_P_	–	содержание натамицина в фармакопейном стандартном образце натамицина,%; +
	_W_	–	содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


