[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС 2.1.0325 Эмтрицитабин (Emtricitabinum)

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0325_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

4-Амино-1-[(2__R__,5__S__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1__H__)-он.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % эмтрицитабина
C~8~H~10~FN~3~O~3~S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый, кристаллический порошок. *Проявляет
полиморфизм.

*Растворимость*. Легко растворим в воде и в метаноле, практически
нерастворим в метиленхлориде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^−1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца эмтрицитабина.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на
хроматограмме раствора стандартного образца («Родственные примеси»).

[discrete]
===== Испытания

*Родственные примеси*

*_1. Энантиомерная чистота_*

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная
хроматография»).

_Подвижная фаза (ПФ)._ Диэтиламин—трифторуксусная
кислота—метанол—этанол—гексан 1:1:50:150:800.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём
раствора ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца 1._ В мерную колбу вместимостью 25 мл
помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
эмтрицитабина, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до
метки.

_Раствор стандартного образца 2._ В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 1,0 мл раствора стандартного образца 1 и доводят объём раствора
ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 5 мл помещают 1 мг 5-эпимера эмтрицитабина,
растворяют в 1 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора раствором стандартного образца 1 до метки.

_Раствор для проверки чувствительности._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца 2 и доводят объём
раствора ПФ до метки.

*Примечание*

Энантиомер эмтрицитабина: +
4-амино-1-[(2__S__,5__R__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1__H__)-он +
[137530-41-7].

_Транс_-изомеры эмтрицитабина:

5-эпимер –
4-амино-1-[(2__R__,5__R__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1__H__)-он +
[145986-26-1].

2-эпимер –
4-амино-1-[(2__S__,5__S__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1__H__)-он +
[145416-34-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|25,0 × 0,46 см, силикагель модифицированный
трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |35 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 280 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования |30 мин. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор для проверки чувствительности, раствор стандартного
образца 2, испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Эмтрицитабин – 1 (около
20 мин); энантиомер эмтрицитабина – около 0,54; 5-эпимер эмтрицитабина –
около 1,23 и около 1,33.

_Пригодность хроматографической системы_ определяют в соответствии с ОФС
«Хроматография» со следующим уточнением. На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _разрешение (+R+)_ между пиками эмтрицитабина и 5-эпимера эмтрицитабина
должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности:

- _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика эмтрицитабина должно быть не
менее 10.

На хроматограмме раствора стандартного образца 2:

- _фактор асимметрии_ пика (_A~S~_) эмтрицитабина должен быть не более
2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика эмтрицитабина
должно быть не более 5,0 % (6 определений);

- _эффективность хроматографической колонки (N)_, рассчитанная по пику
эмтрицитабина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные
коэффициенты: эмтрицитабина энантиомер – 1,1; 5-эпимер эмтрицитабина –
1,35.

Содержание примесей в субстанции в процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0325_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика  примеси эмтрицитабина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика эмтрицитабина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца эмтрицитабина, мг; +
	_P_	-	содержание эмтрицитабина в фармакопейном стандартном образце эмтрицитабина,%.


_Допустимое содержание примесей._ Эмтрицитабина энантиомер – не более
0,3 %, эмтрицитабина 5-эпимер – не более 0,2 %.

*_2. Другие примеси._* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Буферный раствор._ Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 800 мл воды и
доводят значение pH ледяной уксусной до 4,0, количественно переносят
полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём
раствора водой до метки.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 75 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в 50 мл буферного раствора и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца эмтрицитабина._ В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца эмтрицитабина, растворяют в буферном растворе и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг
(точная навеска) стандартного образца эмтрицитабина и 30 мг (точная
навеска) стандартного образца салициловой кислоты, растворяют в 5 мл
ацетонитрила и доводят объём раствора буферным раствором до метки. В
мерную колбу вместимостью 100 мл переносят 5,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора буферным раствором до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 200 мл помещают 3 мг эмтрицитабина
5-фторурацил-аналога, растворяют в буферном растворе и доводят объём
раствора буферным раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствором
стандартного образца эмтрицитабина до метки. Раствор используют
свежеприготовленным.

_Раствор для проверки чувствительности._ В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора
буферным раствором до метки.

*Примечание*

Эмтрицитабиновая кислота: +
_rac_-(2__R__,5__S__)-5-[4-амино-2-оксо-5-фторпиримидин-1(2__H__)-ил]-1,3-оксатиолан-2-карбоновая
кислота +
[1238210-10-0].

Фторцитозин: 4-амино-5-фторпиримидин-2(1__H__)-он [2022-85-7].

Эмтрицитабина сульфоксид: +
4-амино-1-[(2__R__,3__R__S,5__S__)-2-(гидроксиметил)-3-оксо-1,3λ^4^-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1__H__)-он +
[152128-77-3].

Ламивудин: +
4-амино-1-[(2__R__,5__S__)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1__H__)-он +
[134678-17-4].

Эмтрицитабина 5-фторурацил-аналог: +
_rel_-1-[(2__R__,5__S__)-2-(Гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион +
[143790-05-0].

Салициловая кислота: 2-гидроксибензойная кислота [69-72-7].

Эмтрицитабина ментиловый эфир: +
[(1__R__,2__S__,5__R__)-5-метил-2-(пропан-2-ил)циклогексан-1-ил][(2__R__,5__S__)-5-[4-амино-2-оксо-5-фторпиримидин-1(2__H__)-ил]-1,3-оксатиолан-2-карбоксилат] +
[764659-72-5].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|25,0 × 0,46 см, силикагель октадецилсилильный для
хроматографии (С18), 5 мкм; |

|Температура колонки |40 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 280 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header"]
|===
|Время, мин |Буферный раствор,% |Ацетонитрил,%
|0–10 |98 → 80 |2 → 20
|10–20 |80 → 40 |20 → 60
|20–35 |40 → 20 |60 → 80
|35–40 |20 |80
|40–41 |20 → 98 |80 → 2
|41–50 |98 |2
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности, раствор для
проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и
испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Эмтрицитабин _–_ 1 (около
5–10 мин); фторцитазин – 0,45; эмтрицитабиновая кислота – 0,63;
эмтрицитабина сульфоксид – 0,68; ламивудин – 0,87; эмтрицитабина
5-фторурацил-аналог – 1,13; салициловая кислота – 1,44; эмтрицитабина
ментиловый эфир – 2,96.

_Пригодность хроматографической системы_ определяют в соответствии с ОФС
«Хроматография» со следующим уточнением. На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение между пиками эмтрицитабина и эмтрицитабина 5-
фторурацил-аналога должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии пика эмтрицитабина должен быть не более 2,0.

На хроматограмме стандартного раствора:

- относительное стандартное отклонение площади пика эмтрицитабина и
площади пика салициловой кислоты должно быть не более 5,0 % (6
определений).

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные
коэффициенты: фторцитазин – 0,79; эмтрицитабиновая кислота – 1,02;
эмтрицитабина сульфоксид – 1,19; ламивудин – 0,80; эмтрицитабина
5-фторурацил-аналог – 1,18; эмтрицитабина ментиловый эфир – 1,92.

Содержание любой примеси, кроме салициловой кислоты, в процентах (_Х_)
вычисляют по формуле:


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0325_3.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика эмтрицитабина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца эмтрицитабина, мг; +
	_P_	-	содержание эмтрицитабина в фармакопейном стандартном образце эмтрицитабина,%.


Содержание салициловой кислоты в процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0325_4.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика эмтрицитабина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца салициловой кислоты, мг; +
	_P_	-	содержание салициловой кислоты в фармакопейном стандартном образце салициловой кислоты,%.


Допустимое содержание примесей:

- фторцитозин – не более 0,1 %;

- эмтрицитабиновая кислота – не более 0,3 %;

- эмтрицитабина сульфоксид – не более 0,15 %;

- ламивудин – не более 0,2 %;

- эмтрицитабина 5-фторурацил-аналог – не более 0,2 %;

- эмтрицитабина ментиловый эфир – не более 0,1 %;

- салициловая кислота – не более 0,1 %;

- любая неидентифицированная примесь – не более 0,10 %;

- сумма всех примесей – не более 0,6 %.

Не учитывают пики примесей, содержание которых составляет менее 0,05 %.

*Вода.* Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и платиновый
тигель.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 1) в зольном остатке, полученном после
сжигания 0,5 г субстанции.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия
(титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 0,15 г (точная навеска)
субстанции, растворяют в 40 мл уксусной кислоты безводной и титруют
0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически
(ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М хлорной кислоты соответствует 24,73 мг эмтрицитабина
C~8~H~10~FN~3~O~3~S.

[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


