[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС 2.1.0357 Алендронат натрия тригидрат (Natrii alendronas trihydricus)

*Алендроновая кислота* 

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0357_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(4-Амино-1-гидроксибутан-1,1-диил)бис(фосфонат) триводорода натрия
тригидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % алендроната натрия
C~4~H~12~NNaO~7~P~2~ в пересчёте на сухое вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Растворимость*. Растворим в воде, практически нерастворим в
метиленхлориде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»)_._ Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата.

. _Качественная реакция._ Субстанция должна давать характерную реакцию
на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора.* Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды,
свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным
(ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В~7~ или ВY~7~ (ОФС
«Степень окраски жидкостей», метод 2).

*pH раствора.* От 4,0 до 5,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

*_1. Примеси А и D_*

_Раствор 9-флуоренилметилхлорформиата._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 0,2 г 9-флуоренилметилхлорформиата, растворяют в
ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. Раствор
используют сразу после приготовления.

_Буферный раствор._ Растворяют 5,88 г натрия цитрата, 2,84 г динатрия
гидрофосфата безводного в 1900 мл воды и доводят значение рН фосфорной
кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 1 М до 8,0,
количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью
2000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Растворитель._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 29,4 г
натрия цитрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до
метки.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Ацетонитрил—буферный раствор 150:850.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Буферный раствор—ацетонитрил 300:700.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Дериватизация._ В полипропиленовую центрифужную пробирку с
завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного
раствора, 5,0 мл натрия тетрабората раствора 0,05 М, 5,0 мл ацетонитрила
и 5,0 мл раствора 9-флуоренилметилхлорформиата, встряхивают в течение
45 с, выдерживают в тёмном месте при комнатной температуре в течение
30 мин. К полученному раствору прибавляют 20 мл метиленхлорида,
встряхивают в течение 1 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение
10 мин. Используют прозрачный верхний слой.

_Стандартный раствор примеси А._ В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 15,0 мг 4-аминобутановой кислоты (примесь А), растворяют в
растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки. В полипропиленовую
центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл
помещают 5,0 мл полученного раствора и проводят дериватизацию аналогично
испытуемому раствору.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 3,0 мг
фармакопейного стандартного образца алендроната натрия для проверки
пригодности хроматографической системы (содержит примесь D), растворяют
в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В
полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой
вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора проводят
дериватизацию аналогично испытуемому раствору.

_Контрольный раствор._ В полипропиленовую центрифужную пробирку с
завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл растворителя
и проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.

*Примечание*

Примесь А: 4-Аминобутановая кислота [56-12-2].

Примесь D: структура неизвестна.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,1 мм, сополимер стирол-дивинилбензола, 10 мкм; | |
|Температура колонки |45 °C; | |
|Скорость потока |1,8 мл/мин; | |
|Детектор |спектрофотометрический, 266 нм; | |
|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–3 a|
 
100
 

a|
 
0
 

|3–18 a|
 
100 → 50
 

a|
 
0 → 50
 

|18–28 a|
 
50 → 0
 

a|
 
50 → 100
 

|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, стандартный раствор примеси А, испытуемый
раствор и контрольный раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Алендронат – 1 (около
7 мин); примесь D – около 1,4; примесь А – около 1,9.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси А используют
хроматограмму стандартного раствора; для идентификации пика примеси D
используют хроматограмму раствора для проверки разделительной
способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к
стандартному образцу алендроната натрия для проверки пригодности
хроматографической системы.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками алендроната и примеси D должно быть не
менее 5,0.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площадь пика примеси
А умножают на 0,4.

_Допустимое содержание примесей._ Содержание каждой из примесей в
субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования
(ОФС «Хроматография»):

- примесь А – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

*_2. Примеси B и C_*

_Подвижная фаза (ПФ)._ В химическом стакане смешивают 0,2 мл муравьиной
кислоты безводной и 1000 мл воды, доводят значение рН натрия гидроксида
раствором 2 М до 3,5.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
водой до метки.

_Раствор примеси B._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 г
фосфорной кислоты концентрированной (примесь B) и доводят объём раствора
водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор примеси C._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 г
фосфористой кислоты (примесь C) и доводят объём раствора водой до метки.
В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора
и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл
раствора А, 2,0 мл раствора примеси C и доводят объём раствора водой до
метки.

*Примечание*

Примесь В: фосфаты;

Примесь С: фосфиты.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |150 × 4,6 мм, анионообменная смола для хроматографии, 7 мкм; | |

|Температура колонки |35 °C; | |

|Скорость потока |1,2 мл/мин; | |

|Детектор |дифференциальный рефрактометрический; | |

|Объём пробы |100 мкл; | |

|Время хроматографирования |2-кратное от времени удерживания пика
алендроната. | |
|===

Хроматографируют раствор примеси B, раствор примеси C, раствор сравнения
и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Алендронат – 1 (около
16 мин); примесь В – около 1,3; примесь С – 1,6.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B и С не должна превышать площадь пика
алендроната на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

*Потеря в массе при высушивании.* От 16,1 до 17,1 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная
навеска) субстанции при температуре 140–145 °С.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

_Испытуемый раствор_. В колбу Кьельдаля вместимостью 100 мл (в случае
интенсивного пенообразования используют колбу вместимостью 300 мл)
помещают 1,0 г субстанции, фиксируют колбу под углом 45°, прибавляют
5 мл смеси серная кислота концентрированная—азотная кислота
концентрированная 8:10 до полного увлажнения порошка. Содержимое колбы
осторожно нагревают до начала реакции, оставляют колбу. После замедления
реакции прибавляют 5 мл той же смеси, нагревая после каждого
прибавления. Повторяют процедуру до тех пор, пока общий объём
прибавленной смеси не достигнет 18 мл, после чего усиливают нагревание и
осторожно кипятят до потемнения раствора. Полученный раствор охлаждают.
К охлаждённому раствору прибавляют 2 мл азотной кислоты
концентрированной и снова нагревают до потемнения раствора. Процедуру
повторяют до тех пор, пока раствор не перестанет темнеть. Усиливают
нагревание до получения плотных белых паров. Полученный раствор
охлаждают. К охлаждённому раствору прибавляют 5 мл воды, осторожно
нагревают до появления плотных белых паров и продолжают нагревать до тех
пор, пока объём раствора не уменьшится до 2–3 мл. Полученный раствор
охлаждают. К охлаждённому раствору прибавляют 5 мл воды. Если раствор
имеет жёлтую окраску, то к нему осторожно прибавляют 1 мл водорода
пероксида и нагревают до появления паров белого цвета и уменьшения
объёма до 2–3 мл. В случае жёлтого окрашивания раствора, прибавляют 5 мл
воды и 1 мл водорода пероксида до обесцвечивания раствора. Полученный
раствор охлаждают и доводят водой до 10 мл.

Определение тяжёлых металлов проводят, сравнивая с эталоном, состоящим
из 2 мл эталонного раствора 2,6 мл воды и такого же количества
реактивов, какое добавлено к испытуемому раствору.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная
хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси B и
C» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца алендроната натрия тригидрата._ В мерную
колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца алендроната натрия тригидрата, растворяют в воде и
доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца алендроната натрия
тригидрата и испытуемый раствор.

Содержание алендроната натрия C~4~H~12~NNaO~7~P~2~ в субстанции в
пересчёте на сухое вещество в процентах (_X_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0357_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика алендроната на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика алендроната на хроматограмме раствора стандартного образца алендроната натрия тригидрата; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата, мг; +
	_P_	–	содержание алендроната натрия в фармакопейном стандартном образце алендроната натрия тригидрата,%; +
	_W_	–	потеря в массе при высушивании,%.


[discrete]
===== Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

+*+ Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная
способность хроматографической системы.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


