[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС.2.1.0449 Лопинавир (Lopinavirum)

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0449_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(2__S__)-_N_-[(2__S__,4__S__,5__S__)-4-Гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % лопинавира
C~37~H~48~N~4~O~5~ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или желтовато-белый кристаллический порошок.

+*+ Проявляет полиморфизм. Гигроскопичен.

*Растворимость.* Очень легко или легко растворим в метаноле, легко
растворим спирте 96 %, легко растворим или растворим в 2-пропаноле,
практически нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^–1^ по положению полос поглощения
должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца
лопинавира.

[none]
* Если спектры различаются, субстанцию и стандартный образец лопинавира по
отдельности растворяют в метаноле, выпаривают досуха и записывают
спектры сухих остатков.

[arabic,start=2]
. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика лопинавира на
хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (А) (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение*. От –22,0 до –27,0 в пересчёте на безводное вещество
(0,8 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

*Родственные примеси*

Сумма примесей, определённая методами А и Б − не более 0,7 %.

*_1. Метод А._* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Буферный раствор._ Растворяют 0,9 г дикалия гидрофосфата и 2,7 г калия
дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой
концентрированной до 6,0, количественно переносят полученный раствор в
мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до
метки.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Ацетонитрил—буферный раствор 450:550.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Буферный раствор—ацетонитрил 250:750.

_Растворитель._ Вода—ацетонитрил 50:50.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца лопинавира (А)._ В мерную колбу
вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца лопинавира, растворяют в растворителе и доводят
объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл
помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца лопинавира (Б)._ В мерную колбу
вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца
лопинавира (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ Растворяют 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца лопинавира для проверки пригодности системы, содержащего примеси
А, В, С, F, G, I, N, Q, R, S и T в 5 мл растворителя.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного
образца лопинавира (Б) и доводят объём раствора растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь A: +
(2__S__)-_N_-[(2__S__,4__S__,5__S__)-5-амино-4-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[192726-05-9].

Примесь B: +
(2__S__)-_N_-[(2__S__,4__S__,5__S__)-4-гидрокси-1,6-дифенил-5-формамидогексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[76966392].

Примесь C: +
(2__R__)-_N_-[(2__S__,3__S__,5__S__)-3-гидрокси-5-[(2__S__)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[76962186].

Примесь D: +
[(2__S__,3__S__,5__S__)-2-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-5-[(2__S__)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-3-ил]сульфат +
[76969994].

Примесь E: +
_N_-[(2__S__,3__S__,5__S__)-5-амино-3-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2-ил]-2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид +
[192725-49-8].

Примесь F: +
_N_-[(2__S__,3__S__,5__S__)-3-гидрокси-1,6-дифенилгексан-5-формамидо-2-ил]-2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид +
[76971469].

Примесь G: +
_N_-[(2__S__,3__S__,5__S__)-5-ацетамидо-3-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2-ил]-2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид +
[76965218].

Примесь H: +
_N_-[(1__S__)-1-[(2__S__,6__S__)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазинан-6-ил]-2-фенилэтил]-2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид +
[76968681].

Примесь I: +
(2__S__)-_N_-[(2__S__,3__S__,5__S__)-3-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[76966912].

Примесь J: +
(2__S__)-_N_-[(2__S__,4__S__,5__S__)-4-гидрокси-5-[2-(2,4-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[76960930].

Примесь K: +
(2__R__)-_N_-[(2__S__,4__S__,5__S__)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[1623021-24-8].

Примесь L: +
_N_,_N_'-[(_Z_)-этен-1,2-диил]бис[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид]
[76969209].

Примесь M: +
(2__S__)-_N_-[(2__R__,4__R__,5__S__)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[76968402].

Примесь N: +
(2__S__)-_N_-[(2__S__,4__R__,5__S__)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[1798014-18-2].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный
для хроматографии, 4 мкм; |

|Температура колонки |50 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 215 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–60 |100 |0
|60–61 |100 → 0 |0 → 100
|61–81 |0 |100
|81–82 |0 → 100 |100 → 0
|82–100 |100 |0
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор стандартного образца
лопинавира (Б) и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Лопинавир – 1; примесь A –
около 0,03; примесь B – около 0,07; примесь C – около 0,10; примесь D –
около 0,13; примесь E – около 0,25; примесь F – около 0,59; примесь G –
около 0,62; примесь H – около 0,90; примесь I – около 1,10; примесь J –
около 1,13; примесь K – около 1,25; примесь L – около 1,28; примесь M –
около 1,32; примесь N – около 1,38.

_Идентификация примесей_. Для идентификации пиков примесей А, В, С, F,
G, I, N, Q, R, S и T используют относительное время удерживания
соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной
способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей
D, Е, H, I, J, K, L, M и N используют относительное время удерживания
соединений.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика
лопинавира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси F и
примеси G должно быть не менее 1,2.

На хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (Б):

- _коэффициент ёмкости_ (_k′_), рассчитанный по пику лопинавира, должен
быть не менее 15,0;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) лопинавира должен быть от 0,8 до
1,5;

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные
коэффициенты: примесь A – 1,64; примесь B – 1,25; примесь C – 1,54;
примесь D – 1,32; примесь F – 0,77; примесь L – 0,71.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0449_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика лопинавира на хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (Б); +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	-	навеска стандартного образца лопинавира, мг; +
	_P_	-	содержание лопинавира в стандартном образце лопинавира,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь B – не более 0,2 %;

- примесь I – не более 0,2 %;

- примесь A, C, D, E, F, G, H, J, K, L, M, N и любая другая – не более
0,15 % каждая.

Не учитывают пики, элюирующиеся после пика примеси N и пики, площадь
которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

*_2. Метод Б._* Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания
«Родственные примеси. Метод А» со следующими изменениями.

_Подвижная фаза (ПФ)._ ПФА—ПФБ 300:700.

*Примечание*

Примесь O: +
[(2__S__,3__S__,5__S__)-2-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-5-[(2__S__)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-3-ил][(2__S__)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутаноат] +
[76962151].

Примесь P: +
(2__S__)-_N_-[(2__R__,4__S__,5__S__)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид +
[1217628-64-2].

Примесь Q: +
_N_,_N_'-[(2__S__,4__S__,5__S__)-4-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2,5-диил]бис[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид] +
[667904-94-1].

Примесь R: +
(2__S__)-_N_-[(2__S__,4__S__,5__S__)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-{3-[(диметилфенокси)ацетил]-2-оксо-1,3-диазинан-1-ил}бутанамид +
[943250-66-6].

Примесь S: +
[(2__S__,3__S__,5__S__)-2-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-5-[(2__S__)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-3-ил][(2,6-диметилфенокси)ацетат] +
[943250-65-5].

Примесь T: +
_N_,_N_'-бис[(2__S__,4__S__,5__S__)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]мочевина +
[1797024-56-6].

_Хроматографические условия_

[none]
* Время хроматографирования: 50 мин.


Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор стандартного образца
лопинавира (Б) и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Лопинавир – 1 (около
6 мин); примесь O – около 1,49; примесь P – около 1,91; примесь Q –
около 4,39; примесь R – около 6,01; примесь S – около 7,14; примесь T –
около 8,46.

_Идентификация примесей_. Для идентификации пиков примесей O, P, Q, R, S
и Т используют относительное время удерживания соединений.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика
лопинавира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси S и
примеси T должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (Б):

- _коэффициент ёмкости_ (_k′_), рассчитанный по пику лопинавира, должен
быть не менее 1,5;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) лопинавира должен быть от 0,8 до
1,5;

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные
коэффициенты: примесь O – 1,30; примесь Q – 0,71; примесь R – 0,77;
примесь T – 0,77.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0449_3.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика лопинавира на хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (Б); +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	-	навеска стандартного образца лопинавира, мг; +
	_P_	-	содержание лопинавира в стандартном образце лопинавира,%.



_Допустимое содержание примесей:_

- примесь O, P, Q, R, S, T и любая другая примесь – не более 0,15 % .

Не учитывают пики, элюирующиеся до пика примеси N, пик примеси N и пики,
площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора
для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

*Вода.* Не более 4,4 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после
сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Метод А» со следующими изменениями.

_Подвижная фаза (ПФ)._ ПФА.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси.
Метод А» и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[none]
* Время хроматографирования: 60 мин.


Хроматографируют раствор стандартного образца лопинавира (А) и
испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца лопинавира (А):

- _коэффициент ёмкости_ (_k′_), рассчитанный по пику лопинавира, должен
быть не менее 15,0;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) лопинавира должен быть от 0,8 до
1,5.

Содержание лопинавира C~37~H~48~N~4~O~5~ в субстанции в пересчёте на
безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество
в процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0449_4.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика лопинавира на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика лопинавира на хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (A); +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца лопинавира, мг; +
	_P_	-	содержание лопинавира в фармакопейном стандартном образце лопинавира,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%. 


[discrete]
===== Хранение

В сухом защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


