[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

==== ФС 2.1.0334 Адеметионина бутандисульфонат (Ademetionini butandisulfonas)

*Адеметионин* 

*Вводится впервые*

 
[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0334_1.png[]
|===


[discrete]
===== Определение

(2__S__)-2-Амино-4-({[(2__S__,3__S__,4__R__,5__R__)-5-(6-амино-9__H__-пурин-9-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метил}(метил)сульфанийил)бутаноат—бутан-1,4-дисульфоновая
кислота (1:1,65).

Содержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % адеметионина
бутандисульфоната C~15~H~22~N~6~O~5~S·1,65C~4~H~10~O~6~S~2~ в пересчёте
на безводное вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок с характерным
запахом.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость.* Очень легко растворим в воде, легко растворим в
формамиде, практически нерастворим в спирте 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^–1^, по положению полос поглощения
должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца
адеметионина 1,4-бутандисульфоната.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
адеметионина на хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина
1,4-бутандисульфоната (раздел «Количественное определение»).

. _Ионообменная хроматография_ (ОФС «Ионообменная хроматография»).
Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика
1,4-бутандисульфоновой кислоты на хроматограмме раствора стандартного
образца динатрия бутандисульфоната.

Все растворы хранят при температуре 5 ºС и используются
свежеприготовленными.

_Подвижная фаза (ПФ)_. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
191 мг натрия карбоната безводного, 143 мг натрия гидрокарбоната,
растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг
субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца динатрия бутандисульфоната._ В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают около 20 мг фармакопейного
стандартного образца динатрия бутандисульфоната, растворяют в ПФ и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы_. В мерную
колбу вместимостью 25 мл помещают 37 мг натрия сульфата безводного,
растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 мл полученного
раствора и доводят объём раствора стандартным раствором до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Предколонка |10 × 4,6 мм, анионообменная смола для хроматографии на
основе поливинилового спирта, 9 мкм; | |
|Колонка |250 × 4,0 мм, анионообменная смола для хроматографии на основе
поливинилового спирта; 9 мкм; | |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |кондуктометрический; | |

|Объём пробы |25 мкл; | |

|Время хроматографирования |1,5-кратное от времени удерживания пика
основного вещества. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор стандартного образца динатрия бутандисульфоната и
испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ 1,4-бутансульфонат –1
(около 13 мин).

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _разрешение (R)_ между пиками 1,4-бутансульфоната и сульфат-иона
должно быть не менее 1,5;

- _фактор асимметрии_ пика (_A~S~_) 1,4-бутансульфоната должен быть не
менее 0,8 и не более 2,0;

-  _относительное стандартное отклонение_ площади пика
1,4-бутандисульфоновой кислоты должно быть не более 3,0 % (6 введений).

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора.* Раствор 1,52 г субстанции в 10 мл L-лизина
растворе 6,8 % должен выдерживать сравнение с эталоном II
(ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

_L-Лизина раствор 6,8 %_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
3,4 г L-лизина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y~4~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

*рН.* От 1,0 до 3,0 (0,4% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*_S,S-Изомер адеметионина._* Не менее 55 %. Определение проводят методом
ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят в защищённом от света месте и используют
свежеприготовленными.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Растворяют 189,2 г аммония формиата в 700 мл
воды, доводят значение рН раствора муравьиной кислотой безводной до 5,0.
Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью
1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы_. В мерную
колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного
образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[,cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для
хроматографии, 5 мкм; | |
|Скорость потока |0,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 260 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования |1,5-кратное от времени удерживания пика
_S,S_-изомера адеметионина. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений. S,S_-изомер адеметионина –
1 (около 19 мин); _R,S_-изомер адеметионина – около 1,15.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками _S,S_- и _R,S_-изомеров адеметионина
должно быть не менее 2,0;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) _S,S_-изомера адеметионина должен
быть не более 2,0;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) _R,S_-изомера адеметионина должен
быть не более 2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика __S,S__-изомера
адеметионина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание __S,S__-изомера адеметионина в препарате в процентах (_Хi_)
вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят в защищённом от света месте при температуре +
2–8 °С и используют свежеприготовленными.

_Буферный раствор._ Растворяют 12,612 г аммония формиата и 1,0 г натрия
октансульфоната в 700 мл воды, доводят значение рН раствора муравьиной
кислотой безводной до 2,8. Количественно переносят полученный раствор в
мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до
метки.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 5:250:750.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната_. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска)
фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната,
растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки.

_Раствор стандартного образца аденина_. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца аденина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

__Раствор стандартного образца S-аденозил-__L__-гомоцистеина__. В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца _S_-аденозил-L-гомоцистеина, растворяют в воде и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор метилтиоаденозина._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
25 мг (точная навеска) метилтиоаденозина, растворяют в воде и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки.

_Стандартный раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната,
1,0 мл раствора стандартного образца аденина, 1,0 мл раствора
стандартного образца _S_-аденозил-L-гомоцистеина, 4,0 мл раствора
метилтиоаденозина и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы_. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната и доводят объём раствора
водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; | | 
|Скорость потока |1,0 мл/мин; | | 

|Детектор |спектрофотометрический, 260 нм; | | 

|Объём пробы |20 мкл; | | 

|Время хроматографирования |5-кратное от времени удерживания основного
вещества. | | 
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, стандартный и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Адеметионин – 1; аденин –
около 0,67; __S-__аденозил__-__L__-__гомоцистеин – около 0,74;
метилтиоаденозин – около 2,0; _S_-аденозилметионинамин – около 3,0.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика адеметионина должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками аденина и
__S-__аденозил__-__L__-__гомоцистеина должно быть не менее 1,5;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) адеметионина 1,4-бутандисульфоната
должен быть не более 1,5;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика адеметионина
1,4-бутандисульфоната должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание метилтиоаденозина в субстанции в процентах (_X_)
в пересчёте на безводное вещество, вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0334_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика метилтиоаденозина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика метилтиоаденозина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца метилтиоаденозина, мг; +
	_P_	-	содержание метилтиоаденозина в фармакопейном стандартном образце метилтиоаденозина,%; +
	_W_	-	содержание воды в субстанции,%;


Содержание аденина и __S-__аденозил__-__L__-__гомоцистеина в субстанции
в процентах (_X_) в пересчёте на безводное вещество,
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0334_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь каждого из пиков аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь каждого из пиков аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина, соответственно, мг; +
	_P_	-	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце соответствующей примеси,%; +
	_W_	-	содержание воды в субстанции,%.


Содержание __S__-аденозилметионинамина и любой другой примеси в субстанции
в процентах (_X_) в пересчёте на безводное вещество,
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0334_4.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика S-аденозилметионинамина или любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика адеметионина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, мг; +
	_P_	-	содержание адеметионина 1,4-бутандисульфоната в фармакопейном стандартном образце адеметионина 1,4-бутандисульфоната,%; +
	_W_	-	содержание воды в субстанции,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- __ S-__аденозил__-__L__-__гомоцистеин – не более 0,5 %;

- метилтиоаденозин – не более 2,0 %;

- __S__-аденозилметионинамин – не более 1,75 %;

- аденин – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 5,0 %.

*Вода.* Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции и, в качестве
растворителя, смесь формамид—метанол 1:1.

*Сульфатная зола*. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

{asterisk}{asterisk} *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг адеметионина
1,4-бутандисульфоната (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Другие примеси» со следующими уточнениями.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната_. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска)
фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната,
растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца адеметионина
1,4-бутандисульфоната и испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната:

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) адеметионина 1,4-бутандисульфоната
должен быть не более 1,5;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика адеметионина
1,4-бутандисульфоната должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание адеметионина бутандисульфоната
C~15~H~22~N~6~O~5~S·1,65C~4~H~10~O~6~S~2~ в субстанции в пересчёте на
безводное вещество в процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0334_5.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната на хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, мг; +
	_P_	-	содержание адеметионина 1,4-бутандисульфоната в фармакопейном стандартном образце адеметионина 1,4-бутандисульфоната,%; +
	_W_	-	содержание воды в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В плотно укупоренной упаковке, при температуре 2–8 °С.

+*+ Приводится для информации.

{asterisk}{asterisk} Проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


