[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 

==== ФС.2.1.0427 Кабозантиниба (_S_)-малат

*Кабозантиниб* +
*Cabozantinibi (_S_)-malas* 


*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0427_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

_N_-{4-[(6,7-Диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-__N__ʹ-(4-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамид—(2__S__)-2-гидроксибутандиовая
кислота (1:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % кабозантиниба (_S_)-малата
C~28~H~24~FN~3~O~5~·C~4~H~6~O~5~ в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество.

Кабозантиниба (_S_)-малат и его примеси являются высокотоксичными
веществами. Необходимо принять меры для исключения возможности их
вдыхания или контакта с кожей и слизистыми оболочками.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок.

+*+ Проявляет полиморфизм.

*Растворимость.* Растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в
метаноле, практически нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^-1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (_S_)-малата.

. _ВЭЖХ_. Время удерживания основного пика на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
кабозантиниба на хроматограмме раствора стандартного образца
кабозантиниба (_S_)-малата (раздел «Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Родственные примеси*

Растворы, содержащие кабозантиниба (_S_)-малата и его примеси, хранят в
защищённом от света месте при температуре 5 °С.

Сумма примесей 2 и 3 – не более 0,0013 %.

_1. Примеси 1 и 2._ Примесь 1 – не более 0,0019 %. Определение проводят
методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 900 мл
воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят значение рН аммиака
раствором концентрированным 25 % до 8,0, количественно переносят
полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём
раствора водой до метки.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Ацетонитрил.

_Растворитель._ Метанол—диметилсульфоксид 200:800.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1 и 10 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 2
растворяют в 20 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем
до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Калибровочный раствор А_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Калибровочный раствор Б._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
3,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Калибровочный раствор В._ В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают
3,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Калибровочный раствор Г._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Калибровочный раствор Д._ В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают
10,0 мл калибровочного раствора Г и доводят объём раствора растворителем
до метки.

_Калибровочный раствор Е._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
4,0 мл калибровочного раствора Д и доводят объём раствора растворителем
до метки.

_Калибровочный раствор Ж._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
2,0 мл калибровочного раствора Д и доводят объём раствора растворителем
до метки

*Примечание*

Примесь 1: 6,7-диметоксихинолин-4-ол [127285-54-5].

Примесь 2: 4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]анилин [190728-25-7].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный
для хроматографии, 3 мкм, размер пор 110 нм, содержание углерода 14 %; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Температура образца |5 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |масс-спектрометрический; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Тип ионизации |электроспрей (ESI); | |

|Режим электрораспыления |положительный (ESI+); | |

|Рабочий режим |мониторинг множественных реакций (MRM); | |

|Напряжение на капилляре |+3,5 кВ; | |

|Напряжение на конусе |80 В; | |

|Температура источников ионов |120 °С; | | 

|Температура испарения |450 °С; | |

|Расход газа-распылителя |575 л/ч; | |

|Расход газа в конусе |70 л/ч; | |

|Деление потока |0,2 мл/мин. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–5 |97 → 30 |3 → 70
|5–5,5 |30 → 0 |70 → 100
|5,5–6,5 |0 |100
|6,5–7 |0 → 97 |100 → 3
|7–10 |97 |3
|===

_Переходы сканирования масс и энергии столкновений_

[cols="^25%,^25%,^25%,^25%",options="header"]
|===
^|Компонент |Время удерживания |Переходы сканирования масс, Да |Энергия
столкновений, эВ

|Примесь 1 |около 3,0 мин |206,00 → 190,00 |28

|Примесь 2 |около 4,9 мин |297,00 → 281,00 |28
|===

Хроматографируют калибровочные растворы А – Ж и испытуемый раствор.

Строят калибровочный график зависимости площадей пиков S~i~ примесей 1 и
2 от концентрации примесей 1 и 2. Определяют параметры линейной
регрессии.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией примеси 1
0,0075 мкг/мл и примеси 2 0,005 мкг/мл _отношение сигнал/шум (S/N)_ для
пиков примесей 1 и 2 должно быть не менее 10.

На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией примеси 1
0,1125 мкг/мл и примеси 2 0,075 мкг/мл _относительное стандартное
отклонение_ площади пиков примесей 1 и 2 должно быть не более 10,0 %
(6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примесей 1 и
2 в испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примесей 1 и 2 в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0427_2.png[]
|===

где	_C_	–	концентрация примесей 1 и 2 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_P_	–	содержание основного вещества в примесях 1 и 2 соответственно, %.


_2. Примесь 3._ Не более – 0,0013 %. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 900 мл
воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят значение рН аммиака
раствором концентрированным 25 % до 8,0, количественно переносят
полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём
раствора водой до метки.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Ацетонитрил.

_Растворитель._ Метанол—диметилсульфоксид 200:800.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 125 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки. Раствор запрещается обрабатывать
ультразвуком!

_Раствор примеси 3_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг
(точная навеска) 4-фторанилина (примесь 3 [371-40-4]), растворяют в
растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную
колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора растворителем до метки.

_Калибровочные растворы_. В три мерные колбы вместимостью 20 мл помещают
раствор примеси 3 6,0 мл, 4,0 мл и 2,0 мл соответственно и доводят объём
каждого раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный
для хроматографии, 3 мкм, размер пор 110 нм, содержание углерода 14 %; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Температура образца |5 °С; | |

|Скорость потока |1,2 мл/мин; | |

|Детектор 2+|спектрофотометрический (диодно-матричный), 240 нм;  | 

|Объём пробы |10 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–8 |95 → 55 |5 → 45
|8–15 |55 → 45 |45 → 55
|15–20 |45 → 0 |55 → 100
|20–21 |0 |100
|21–23 |0 → 95 |100 → 5
|23–28 |95 |5
|===

Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Кабозантиниб – 1 (около
12 мин); примесь 3 – около 0,46.

Строят калибровочный график зависимости площади пика S~i~ примеси 3 от
концентрации примеси 3. Определяют параметры линейной регрессии.

_Пригодность хроматографической системы_. Относительное стандартное
отклонение площади пика примеси 3 при концентрации 125 мкг/мл должно
быть не более 20 % (6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примеси 3 в
испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примеси 3 в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0427_3.png[]
|===

где	_C_	–	концентрация примеси 3 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_P_	–	содержание основного вещества в примеси 3,%.


_3. Примесь 4._ Не более – 0,0014 %. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Фосфорная кислота
концентрированная—ацетонитрил—вода 3:300:700.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Фосфорная кислота
концентрированная—ацетонитрил 20:1000.

_Растворитель._ Растворяют 100 мг аскорбиновой кислоты в 500 мл воды,
прибавляют 1 мл трифторуксусной кислоты и 500 мл ацетонитрила.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 45 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор примеси 4_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг
(точная навеска) 4-аминофенола (примесь 4 [123-30-8]), растворяют в
растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную
колбу вместимостью 200 мл помещают 9,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу 200 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Калибровочные растворы_. В три мерные колбы вместимостью 20 мл помещают
раствор примеси 4 5,0 мл, 10,0 мл и 15,0 мл соответственно и доводят
объём каждого раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 4,6 мм, сорбент комбинированный для ВЭЖХ; 5 мкм; |
|Температура колонки |30 °С; | |
|Температура образца |5 °С; | |
|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |
|Детектор 2+|спектрофотометрический (диодно-матричный), 192 нм; | 
|Объём пробы |100 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–6,5 |100 |0
|6,5–6,6 |100 → 5 |0 → 95
|6,6–25 |5 |95
|25–25,1 |5 → 100 |95 → 0
|25,1–33 |100 |0
|===

Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Кабозантиниб – 1 (около
10 мин); примесь 4 – около 0,53.

Строят калибровочный график зависимости площади пика S~i~ примеси 4 от
концентрации примеси 4. Определяют параметры линейной регрессии.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме
калибровочного раствора с концентрацией 0,0225 мкг/мл:

- _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика примеси 4 должно быть не менее
10;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика примеси 4 должно
быть не более 10,0 % (6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примеси 4 в
испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примеси 4 в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0427_4.png[]
|===

где	_C_	–	концентрация примеси 4 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_P_	–	содержание основного вещества в примеси 4,%.


_4. Другие примеси._ Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях
определения «Родственные примеси. Примесь 2» со следующими изменениями.

_Растворитель._ Вода—метанол—диметилсульфоксид 100:400:500.

_Испытуемый раствор А._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 60 мл растворителя,
обрабатывают ультразвуком до растворения и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Испытуемый раствор Б._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
10,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Раствор стандартного образца кабозантиниба (S)-малата._ В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца кабозантиниба (_S_)-малата, прибавляют 60 мл
растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения и доводят объём
раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл
помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл раствора стандартного
образца кабозантиниба (S)-малата и доводят объём раствора растворителем
до метки. В мерную колбу 10 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь 5: +
_N_-{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-__N__ʹ-(2-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамид.

Примесь 6: +
1-_N_,1-__N__ʹ-бис{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}циклопропан-1,1-дикарбоксамид
[2439164-91-5].

_Хроматографические условия_

[cols="20%,80%",grid=none,frame=none] 
|===

|Температура образца |25 °С;
|Объём пробы |5 мкл.
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы и испытуемый раствор А.

_Относительное время удерживания соединений._ Кабозантиниб – 1 (около
12 мин); примесь 6 – около 0,97; примесь 5 – около 1,03.

{asterisk}{asterisk} _Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
для проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика кабозантиниба должно быть не менее 10.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные
коэффициенты: примесь 5–1,27; примесь 6–1,45.

_Допустимое содержание примесей._ Содержание каждой из примесей в
субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования
(ОФС «Хроматография»):

- примесь 6 – не более 0,3 %;

- любая другая примесь – не более 0,15 %;

- сумма примесей – не более 1,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на
хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической
системы (менее 0,05 %).

*Вода.* Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для
определения используют 0,18 г (точная навеска) субстанции, в качестве
растворителя, 3 мл диметилацетамида.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после
сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца кабозантиниба (_S_)-малата
и испытуемый раствор Б.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца кабозантиниба (_S_)-малата:

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) кабозантиниба должен быть не более
2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика кабозантиниба
должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание кабозантиниба (_S_)-малата C~28~H~24~FN~3~O~5~·C~4~H~6~O~5~ в
субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество в процентах (_X_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0427_5.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика кабозантиниба (S)-малата на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика кабозантиниба (S)-малата на хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата, мг; +
	_P_	–	содержание кабозантиниба (S)-малата в стандартном образце кабозантиниба (S)-малата,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации

{asterisk}{asterisk} Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная
способность хроматографической системы.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


