
=== 2.4. Фармацевтические субстанции растительного происхождения



[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


==== ФС.2.4.0020 Гесперидин (Hesperidinum)

*Вводится впервые*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.4.0020_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(2__S__)-5-Гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-{[6-_O_-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,3-дигидро-4__H__-1-бензопиран-4-он.

Cодержит не менее 90,0 % гесперидина C~28~H~34~O~15~ в пересчёте на
сухое вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. От светло-коричневого до светло-жёлтого цвета
кристаллический порошок.

*Растворимость*. Легко растворим в разбавленных растворах щелочей, очень
мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1^ по положению полос поглощения
должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца
гесперидина.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика гесперидина на
хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие геспередин, используют свежеприготовленными.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Метанол—уксусной кислоты раствор 0,5 % 300:700.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят
объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

_Раствор стандартного образца гесперидина._ В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца гесперидина, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
диметилсульфоксидом до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного
стандартного образца гесперидина и 2 мг фармакопейного стандартного
образца неогесперидина, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца гесперидина и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до
метки.

*Примечание*

Эриоцитрин: +
(2__S__)-5-гидрокси-7-{[6-_O_-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)
-β-D-глюкопиранозил]окси}-2-(3,4-дигидроксифенил)-2,3-дигидро-4__H__-1-бензопиран-4-он +
[13463-28-0].

Изонарингин нарирутин: +
(2__S__)-5-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-7-{[6-_O_-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,3-дигидро-4__H__-1-бензопиран-4-он +
[14259-46-2].

Реогесперидин: +
(2__S__)-5-гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-{[2-_O_-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,3-дигидро-4__H__-1-бензопиран-4-он +
[13241-33-3].

Диосмин: +
5-гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-{[6-_O_-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-4__H__-1-бензопиран-4-он +
[520-27-4].

Нарингенин: +
(2__S__)-5,7-дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-4__H__-1-бензопиран-4-он
[480-41-1].

Дидимин неопонцирин: +
(2__S__)-5-гидрокси-7-{[6-_O_-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2-(4-метоксифенил)-2,3-дигидро-4__H__-1-бензопиран-4-он +
[14259-47-3].

Гесперетин: +
(2__S__)-5-гидрокси-2-(4-метоксифенил)-2,3-дигидро-4__H__-1-бензопиран-4-он
[520-33-2].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
4 мкм; |

|Температура колонки |40 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 284 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|5-кратное от времени удерживания пика
гесперидина. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор стандартного образца
гесперидина и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Гесперидин –1 (около
8 мин); эриоцитрин – около 0,4; изонарингин – около 0,7; неогесперидин –
около 1,2; диосмин – около 1,5; нарингенин – около 2,6; дидимин – около
3,0; гесперетин – около 3,8.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика
гесперидина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками гесперидина
и неогесперидина должно быть не менее 1,9.

На хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина:

- _фактор асимметрии пика_ (_A~S~_) гесперидина должен быть не более
2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика геспередина должно
быть не более 5,0 % (6 введений);

- _эффективность хроматографической колонки_ (_N_), рассчитанная по пику
гесперидина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные
коэффициенты: диосмин – 1,7; нарингенин – 0,5; гесперетин – 0,5.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.4.0020_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика гесперидина на хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца гесперидина, мг; +
	_P_	-	содержание гесперидина в фармакопейном стандартном образце гесперидина,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь изонарингин нарирутина – не более 4,0 %;

- примесь дидимин неопонцирина – не более 3,0 %;

- любая единичная примесь – не более 1,0 %;

- сумма примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на
хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической
системы (менее 0,1 %).

*Потеря в массе при высушивании.* Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная
навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,3 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном
после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца гесперидина._ В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца гесперидина, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём
раствора диметилсульфоксидом до метки.

_Хроматографические условия_


Время хроматографирования: 30 мин.


Хроматографируют раствор стандартного образца гесперидина и испытуемый
раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца гесперидина:

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) гесперидина должен быть не более
2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика гесперидина должно
быть не более 2,0 % (6 введений);

- _эффективность хроматографической колонки (N)_, рассчитанная по пику
гесперидина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание гесперидина C~28~H~34~O~15~ в субстанции в пересчёте на сухое
вещество в процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.4.0020_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика гесперидина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика гесперидина на хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца гесперидина, мг; +
	_W_	–	потеря в массе при высушивании,%; +
	_P_	–	содержание гесперидина в фармакопейном стандартном образце гесперидина,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.
  

[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


