[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===



==== ФС 2.1.0331 Эфавиренз (Efavirenzum)

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0331_1.png[]
|===


[discrete]
===== Определение

(4__S__)-4-(Трифторметил)-6-хлор-4-(циклопропилэтинил)-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % эфавиренза
C~14~H~9~ClF~3~NO~2~ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый порошок.

+*+ Проявляет полиморфизм.

*Растворимость*. Легко растворим в метаноле и дихлорметане, практически
не растворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр предварительно высушенной при 105 °С в
течение 30 мин и охлаждённой в эксикаторе субстанции в области от 4000
до 400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать
спектру фармакопейного стандартного образца эфавиренза.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика эфавиренза на
хроматограмме раствора стандартного образца эфавиренза (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Температура плавления.* От 136 до 142 °C (ОФС «Температура плавления»).

*Удельное вращение.* От –89 до –100 в пересчёте на безводное и свободное
от остаточных органических растворителей вещество +
(ОФС «Оптическое вращение»).

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

*Энантиомерная чистота.* Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза (ПФ)_. Этанол—гексан 30:970.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг
фармакопейного стандартного образца эфавиренза рацемического, растворяют
в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до
метки.

*Примечание*

(_R_)-Энантиомерэфавиренза: +
(4__R__)-4-(трифторметил)-6-хлор-4-(циклопропилэтинил)-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он +
[154801-74-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 1 2+|250 × 4,6 см, силикагель, модифицированный
_трис_-3,5-диметифенилкарбаматом целлюлозы, 10 мкм; |

|Колонка 2 (соединена последовательно с колонкой 1) 2+|250 × 4,6 см,
силикагель нитрильный для хроматографии (1), 5 мкм; |

|Температура колонки |35 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 250 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования |30 мин. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ (_S_)-Энантиомер
эфавиренза – 1; (_R_)-энантиомер эфавиренза – около 0,88.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками (_R_)-энантиомера эфавиренза и +
(_S_)- энантиомера эфавиренза должно быть не менее 3,0.

Содержание (_R_)-энантиомера эфавиренза в субстанции в процентах
вычисляют согласно методу нормирования.

_Допустимое содержание примесей._ (_R_)-Энантиомер эфавиренза – не более
0,5 %.

*Родственные примеси*

*_Метод 1._* Определение проводят методом ВЭЖХ +
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от действия света и используют
свежеприготовленными. Используют только свежеоткрытую трифторуксусную
кислоту со сроком хранения не более 6 мес. Для приготовления и хранения
растворов, содержащих эфавиренз и его примеси, используют посуду из
полипропилена.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Трифтоуксусная кислота—метанол—вода
0,5:100:900.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Трифтоуксусная кислота—метанол—вода
0,5:900:100.

_Растворитель._ Ацетонитрил—вода 50:50.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, прибавляют 65 мл растворителя, выдерживают
на ультразвуковой бане в течение 20 мин, охлаждают до комнатной
температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца эфавиренза._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца эфавиренза, прибавляют 30 мл растворителя, выдерживают на
ультразвуковой бане в течение 30 мин, охлаждают до комнатной температуры
и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси 2._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси 2,
прибавляют 30 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в
течение 30 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25,0 мл раствора
стандартного образца эфавиренза, прибавляют 2,0 мл раствора стандартного
образца примеси 2 и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
5,0 мл раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы и доводят объём раствора растворителем до
метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 4,6 см, силикагель нитрильный для хроматографии (1),
5 мкм; |

|Температура колонки |40 °С; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 250 нм; | |

|Объём пробы |35 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–16 |60 → 50 |40 → 50
|16–23 |50 → 35 |50 → 65
|23–28 |35 → 30 |65 → 70
|28–29 |30 → 20 |70 → 80
|29–31 |20 |80
|31–32 |20 → 60 |80 → 40
|32–40 |60 |40
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Относительное время
удерживания соединений (RRT) приведено в <<tab_fs_2.1.0331_1,таблице 1.>>

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками примеси 2 и эфавиренза должно быть не
менее 1,2.

На хроматограмме стандартного раствора _относительное стандартное
отклонение_ площади пика эфавиренза должно быть не более 5,0 % (6
введений).

_Фактор отклика._ Для расчёта содержания площади пиков примесей делятся
на соответствующие факторы отклика. Факторы отклика приведены в
<<tab_fs_2.1.0331_1,таблице 1.>>

[[tab_fs_2.1.0331_1]]
[caption="Таблица 1. "]
.Характеристика родственных примесей эфавиренза

[cols="27%,37%,^16%,^9%,^11%",options="header",]
|===
^|Примесь +
(cокращённое название)
^|Химическое название по ИЮПАК |CAS |RRT |Фактор отклика
|Примесь 1 +
(аминоспиртэфавиренза)

|(2__S__)-2-(2-Амино-5-хлорфенил)-1,1,1-трифтор-4-циклопропилбут-3-ин-2-ол
|209414-27-7 |Около 0,48 |0,26

|
Примесь 2 +
(этеновый аналог эфавиренза)

|(4__S__)-4-(Трифторметил)-6-хлор-4-[(_E_)-циклопропилэтенил]-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он
|440124-96-9 |Около 0,93 |0,91

|Эфавиренз |– |– |1 |–

|Примесь 3 +
(пент-3-ен-1-ин (транс) эфавиренз)

|(4__S__)-4-[(3__E__)-Пент-3-ен-1-ин-1-ил]-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он
|– |Около 1,16 |1,0

|Примесь 4 +
(пент-3-ен-1-ин (цис) эфавиренз)

|(4__S__)-4-[(3__Z__)-Пент-3-ен-1-ин-1-ил]-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он
|– |Около 1,16 |1,0

|Примесь 5 +
(пентенеин эфавиренза)

|(4__S__)-4-(3-Метилбут-3-ен-1-ин-1-ил]-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он
|– |Около 1,16 |1,0

|Примесь 6 +
(пентиновый аналог эфавиренза)

|(4__S__)-4-(Пент-1-ин-1-ил)-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он
|205755-86-8 |Около 1,2 |1,0

|Примесь 7 +
(метилэфавиренз)

|4-[(2-Метилциклопропил)этинил]-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он
|353270-76-5 |Около 1,28 |1,0

|Примесь 8 +
(аминоспиртметилкарбаматэфавиренза)

|Метил(_N_-{[(2__S__)-2-гидрокси-1,1,1-трифтор-4-циклопропилбут-3-ин-2-ил]-4-хлорфенил}карбамат)
|211563-40-5 |Около 1,33 |0,83

|Примесь 9 +
(аналог хинолина)

|4-(Трифторметил)-6-хлор-2-циклопропилхинолин |391860-73-4 |Около 1,45
|2,0

|Примесь 10 +
(амноспирт этилкарбамат эфавиренза)

|Этил(_N_-{[(2__S__)-2-гидрокси-1,1,1-трифтор-4-циклопропилбут-3-ин-2-ил]-4-хлорфенил}карбамат)
|211563-41-6 |Около 1,53 |0,83

|Примесь 11 |(неизвестная структура) |– |Около 1,60 |1,0

|Примесь 12 +
(амноспирт бис(этоксикарбонил) эфавиренза)

|Этил(_N_-{[(2__S__)-1,1,1-трифтор-4-циклопропил-2-[(этоксикарбонил)окси]бут-3-ин-2-ил]-4-хлорфенил}карбамат)
|– |Около 1,63 |0,34

|Примесь 13 +
(N-бензилэфавиренз)

|(4__S__)-1-[(4-Метоксифенил)метил]-4-(трифторметил)-6-хлор-4-(циклопропилэтинил)-1,4-дигидро-2__H__-3,1-бензоксазин-2-он
|174819-21-7 |Около 1,8 |0,71

|Примесь 14 +
(бензоиламиноспирт эфавиренза)

|_N_-{2-[(2__S__)-2-Гидрокси-1,1,1-трифтор-4-циклопропилбут-3-ин-2-ил]-4-хлорфенил}-4-метоксибензамид
|353270-77-6 |Около 1,9 |0,56

|Примесь 15 |(неизвестная структура) |– |Около 2,1 |1,0

|Примесь 16 +
(аналог циклобутенилиндола)

|Этил[3-(трифторметил)-5-хлор-2-(циклобут-2-ен-1-ил)-1__H__-индол-1-карбоксилат]
|– |Около 2,18 |0,48
|===

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0331_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика эфавиренза на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца эфавиренза, мг; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_P_	–	содержание эфавиренза в фармакопейном стандартном образце эфавиренза,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 1 – не более 0,15 %;

- примесь 2 – не более 0,40 %;

- примесь 3 – не более 0,10 %;

- примесь 4 – не более 0,10 %;

- примесь 5 – не более 0,10 %;

- примесь 6 – не более 0,15 %;

- примесь 7 – не более 0,10 %;

- примесь 8 – не более 0,10 %;

- примесь 9 – не более 0,10 %;

- примесь 10 – не более 0,10 %;

- примесь 12 – не более 0,10 %;

- примесь 13 – не более 0,25 %;

- примесь 14 – не более 0,15 %;

- примесь 16 – не более 0,10 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,1 %.

Не учитывают пики менее 0,05 %.

Если содержание примеси(ей) с относительным временем удерживания около
1,16 превышает 0,10 %, то выполняют метод 2.

*_Метод 2_.* Определение проводят методом ВЭЖХ +
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от действия света и используют
свежеприготовленными. Используют только свежеоткрытую трифторуксусную
кислоту со сроком хранения не более 6 мес. Для приготовления и хранения
растворов, содержащих эфавиренз и его примеси, используют посуду из
полипропилена.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Ацетонитрил—трифторуксусная кислота—вода
400:0,5:600.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Ацетонитрил—трифторуксусная кислота—вода
800:0,5:200.

_Растворитель._ Ацетонитрил—трифторуксусная кислота—вода 55:0,05:45.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, прибавляют 65 мл растворителя, выдерживают
на ультразвуковой бане в течение 20 мин, охлаждают до комнатной
температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца эфавиренза._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца эфавиренза, прибавляют 65 мл растворителя, выдерживают на
ультразвуковой бане в течение 20 мин, охлаждают до комнатной температуры
и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу
вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; |

|Температура колонки |35 °С; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 250 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–40 |100 → 0 |0 → 100
|40–45 |0 |100
|45–45,1 |0 → 100 |100 → 0
|45,1–50 |100 |0
|===

Хроматографируют раствор стандартного образца эфавиренза и испытуемый
раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Эфавиренз – 1; +
пент-3-ен-1-ин (цис) эфавиренз – около 1,10; пент-3-ен-1-ин (транс)
эфавиренз – около 1,13; пентенеин эфавиренза – около 1,14.

_Фактор отклика._ Для расчёта содержания площади пиков примесей делятся
на соответствующие факторы отклика: пент-3-ен-1-ин (цис) эфавиренз –1,1;
пент-3-ен-1-ин (транс) эфавиренз – около 1,1; пентенеин эфавиренза –
около 1,0.

Содержание каждой из трёх примесей в субстанции в процентах (_Х_)
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0331_3.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика эфавиренза на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца эфавиренза, мг; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_P_	–	содержание эфавиренза в фармакопейном стандартном образце эфавиренза,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 3 – не более 0,10 %;

- примесь 4 – не более 0,10 %;

- примесь 5 – не более 0,10 %.

*Вода.* Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Метод 1».

_Стандартный раствор_. В качестве стандартного раствора используют
раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы (раздел «Родственные примеси. Метод 1»).

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме стандартного
раствора:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси 2 и эфавиренза должно быть не
менее 1,2;

- _фактор асимметрии пика_ (_A~S~_) эфавиренза должен быть не более 1,8;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика эфавиренза должно
быть не более 1,0 % (6 определений).

Содержание эфавиренза C~14~H~9~ClF~3~NO~2~ в субстанции в процентах
(_X_) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0331_4.png[]
|===

где	_S~i~_	-	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика эфавиренза на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца эфавиренза, мг; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_P_	–	содержание эфавиренза в фармакопейном стандартном образце эфавиренза,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.
 

[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


