[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 

==== ФС.2.1.0656 Гозерелина ацетат

*Гозерелин* +
*Goserelini acetas* 

*Вводится впервые*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0656_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

2-(5-Оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-_O_-_трет_-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамида
ацетат.

Cодержит не менее 94,5 % и не более 103,0 % гозерелина
C~59~H~84~N~18~O~14~ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей и уксусной кислоты вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый порошок.

*Растворимость*. Легко растворим в уксусной кислоте ледяной, легко
растворим или растворим в воде, растворим в натрия гидроксида растворе
0,1 М.

[discrete]
===== Идентификация

. _ВЭЖХ_. Время удерживания основного пика на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
гозерелина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца
гозерелина (раздел «Количественное определение»).

. _Аминокислотный состав_. Определение проводят в соответствии с ОФС
«Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1 в жидкой фазе, анализ по
методу 1). Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в
мольных долях, принимая за единицу одну шестую суммарного мольного
содержания глутаминовой кислоты, гистидина, тирозина, лейцина, аргинина,
пролина и серина по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0656_2.png[]
|===

где	_n~i~_	–	количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль; +
image:im_fs_2.1.0656_3.png[] –	сумма мольного содержания глутаминовой кислоты, гистидина, тирозина, лейцина, аргинина, пролина, серина, мкмоль.


Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах:
глутаминовая кислота от 0,9 до 1,1; гистидин от 0,9 до 1,1; тирозин от
0,9 до 1,1; лейцин от 0,9 до 1,1; аргинин от 0,9 до 1,1; пролин от 0,9
до 1,1; серин от 1,6 до 2,2. Остальные аминокислоты могут присутствовать
не более чем в следовых количествах, за исключением триптофана.

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От –52 до –56 в пересчёте на безводное, свободное
от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество
(0,2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора.* Раствор 0,05 г субстанции в 25 мл воды,
свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС
«Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»,
метод 2).

*рН.* От 4,0 до 6,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

+*+  *Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза (ПФ)._ Трифторуксусная кислота—ацетонитрил—вода
0,5:200:800.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
водой до метки.

_Раствор сравнения А._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор сравнения Б._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ Готовят
раствор фармакопейного стандартного образца примеси А в воде с
концентрацией 0,1 мг/мл. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл
раствора сравнения Б.

_Раствор для идентификации пиков._ Содержимое флакона фармакопейного
стандартного образца гозерелина смеси для валидации растворяют в 1,0 мл
воды.

*Примечание*

Примесь А ([4-D-серин]гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-D-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-_O_-_трет_-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид +
[1926163-39-4].

Примесь В ([6-_O_-_трет_-бутил-L-серин]гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-_O_-_трет_-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь С ([9-D-пролин]гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-_O_-_трет_-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-D-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь D (де-9-L-пролин-гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-_O_-_трет_-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил)гидразинкарбоксамид.

Примесь E (гозерелин-(1-8)-пептидил-L-пролингидразид): +
5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-_O_-_трет_-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролингидразид.

Примесь F ([5-D-тирозин]гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-_O_-_трет_-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь G (**[**2-D-гистидин]гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-D-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-_O_-_трет_-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь Н ([1-(5-оксо-D-пролин)]гозерелин): +
2-(5-оксо-D-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-_O_-_трет_-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь I (эндо-8a,8b-ди-L-пролин-гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-_O_-_трет_-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил-L-пролил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь J (эндо-8a-L-пролин-гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-_O_-_трет_-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь К ([4-_O_-ацетил-L-серин]гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-_O_-ацетил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-_O_-_трет_-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь L ([7-D-лейцин]гозерелин): +
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-_O_-_трет_-бутил-L-серил-D-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный,
октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный для
хроматографии, 3,5 мкм, размер пор 12,5 нм; |

|Температура колонки |50-55 °С; | |

|Скорость потока |0,7-1,2 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 220 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования |90 мин. | |
|===

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор для проверки
пригодности хроматографической системы, раствор сравнения А и испытуемый
раствор.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков используют
хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму,
прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гозерелина смеси для
валидации.

_Относительное время удерживания соединений._ Гозерелин – 1 (от 40 до
50 мин); примесь А – около 0,67; примесь С – около 0,78; примесь В –
около 0,79; примесь D – около 0,85; примесь Е – около 0,89; примесь F –
около 0,92; примесь G – около 0,94; примесь H – около 0,98; примесь I –
около 1,43; примесь J – около 1,53; примесь K – около 1,67; примесь L –
около 1,77.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси А и гозерелина должно быть не
менее 7,0;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) гозерелина должен быть от 0,8 до
2,5;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) примеси А должен быть от 0,8 до
2,5.

На хроматограмме раствора для идентификации пиков расположение пиков
должно быть аналогично хроматограмме, прилагаемой к фармакопейному
стандартному образцу гозерелина смеси для валидации; 2 пика,
расположенные до пика основного вещества (соответствуют примесям E и G),
должны быть хорошо различимы.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси Е не должна превышать площадь пика гозерелина на
хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать 0,5 площади пика
гозерелина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади
пика гозерелина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 2,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на
хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

*Вода.* Не более 10,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции.

*Уксусная кислота*. От 4,5 до 15,0 %. (ОФС «Определение уксусной кислоты
в синтетических пептидах»).

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в смеси ПФБ—ПФА 5:95 и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины.* Не более 16,0 ЕЭ на 1 мг гозерелина ацетата
(ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца гозерелина._ Готовят раствор
фармакопейного стандартного образца гозерелина в воде с концентрацией
гозерелина около 1,0 мг/мл.

_Хроматографические условия_

[none]
* Время хроматографирования: 60 мин


Хроматографируют раствор фармакопейного стандартного образца гозерелина
и испытуемый раствор.

Содержание гозерелина C~59~H~84~N~18~O~14~ в субстанции в пересчёте на
безводное и свободное от остаточных органических растворителей и
уксусной кислоты вещество в процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0656_4.png[] 
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика гозерелина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика гозерелина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца гозерелина; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца гозерелина, мг; +
	_P_	–	содержание гозерелина в фармакопейном стандартном образце гозерелина,%; +
	_W_	–	содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_A_	–	содержание уксусной кислоты в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте при
температуре от 2 до 8 °С.

+*+ При необходимости следует отрегулировать скорость потока ПФ; если
регулировка скорости потока не приводит к указанному времени удерживания
основного пика, рекомендуется изменить долю ацетонитрила в ПФ, чтобы
получить указанное время удерживания для гозерелина.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


