[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС 2.1.0320 Цисплатин (Cisplatinum)

*Взамен ФС 42-3061-94*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0320_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(_SP_-4-2)-Диамминдихлорплатина(II).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % цисплатина PtCl~2~(NH~3~)~2~
в пересчёте на сухое вещество.

Цисплатин является высокотоксичным веществом. Необходимо принять меры
для исключения возможности его вдыхания или контакта с кожей и
слизистыми оболочками.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Жёлтый порошок или кристаллы жёлтого или оранжево-жёлтого
цвета.

*Растворимость.* Умеренно растворим в диметилформамиде, мало растворим в
воде, практически не растворим в этаноле 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК−спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца цисплатина.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика цисплатина на
хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина (раздел
«Количественное определение»).

. _Тонкослойная хроматография_ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

[none]
* Растворы защищают от действия света.
* _Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем целлюлозы для ВЭТСХ.
* _Предварительная подготовка пластинки._ Пластинку выдерживают при
температуре 150 °С в течение 60 мин.
* _Подвижная фаза (ПФ)._ Ацетон—диметилформамид 10:90.
* _Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг
субстанции, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем
же растворителем до метки. В мерную колбу 10 мл помещают 1,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до
метки.
* _Раствор стандартного образца цисплатина_. В мерную колбу вместимостью
5 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца цисплатина,
растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.
* На линию старта пластинки наносят 2 мкл испытуемого раствора (4 мкг) и
2 мкл раствора стандартного образца (4 мкг) цисплатина. Пластинку с
нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и
хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около
80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до
удаления следов растворителей, опрыскивают олова(II) хлорида
раствором(2) и просматривают в видимом свете через 1 ч.
* Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по
положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции
цисплатина на хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина.

[arabic,start=4]
. _Качественная реакция._ В стеклянный бюкс помещают 50 мг субстанции,
прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и выпаривают досуха.
Полученный остаток растворяют в смеси 0,5 мл азотной кислоты
концентрированной и 1,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной
и выпаривают досуха, остаток должен быть оранжевого цвета. Полученный
остаток растворяют в 0,5 мл воды, после прибавления 0,5 мл аммония
хлорида раствора 10,7 % должен образоваться жёлтый кристаллический
осадок.

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора*

_Раствор А._ Раствор 25 мг субстанции в 25 мл натрия хлорида раствора
0,9 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции
(мутности) жидкостей»).

_Раствор Б._ Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл диметилформамида должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор А, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY~5~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

*рН раствора.* От 4,5 до 6,0 (раствор А, полученный в испытании
«Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3). Измерение проводят
сразу после приготовления раствора.

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы защищают от действия света. Не нагревают и не обрабатывают
ультразвуком растворы, содержащие платину. Все растворы используют в
течение 4 ч.

_Подвижная фаза (ПФ)._ В химическом стакане растворяют 1,08 г натрия
октансульфоната, 1,70 г тетрабутиламмония гидросульфата и 2,72 г калия
дигидрофосфата в 950 мл воды и доводят значение pH натрия гидроксида
раствором 1 М до значения 5,9. Переносят полученный раствор в мерную
колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Растворитель._ Натрия хлорида раствор 0,9 %.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси А._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А,
растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Раствор стандартного образца примеси В._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 5,6 мг фармакопейного стандартного образца примеси В,
растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем
до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мкл
испытуемого раствора, 5,0 мл раствора стандартного образца примеси А и
5,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь A: (_SP_-4-1)-диамминдихлорплатина(II) [14913-33-8].

Примесь B: амминотрихлорплатинат(II) [17632-41-6].

Примесь C: тетрахлорплатинат(II) [13965-91-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по
отношению к основаниям, для хроматографии, 4 мкм; |

|Температура колонки |30 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 210 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|7-кратное от времени удерживания пика
цисплатина. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, стандартный раствор, испытуемый раствор и
растворитель.

Пик смещения – это последний пик в группе пиков на хроматограмме
растворителя.

_Относительное время удерживания соединений._ Цисплатин – 1 (около
3,8 мин); пик смещения – около 0,5; примесь А – около 0,6; примесь В –
около 0,7; цисплатин аквакомплекс – около 1,2.

Для идентификации пика цисплатин аквакомплекса используют относительное
время удерживания соединений, хроматограмму раствора стандартного
образца цисплатина (раздел «Количественное определение») и
хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу
цисплатина.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме стандартного
раствора:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками примесей А и В должно быть не менее
2,5;

- _разрешение (R~S~)_ между пиком смещения и пиком примеси А должно быть
не менее 2,5.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика примеси А на
хроматограмме стандартного раствора (не более 2,0 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать площадь пика примеси В на
хроматограмме стандартного раствора (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика
цисплатина на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примесей А и В, не должна
более чем в 2,5 раза превышать площадь пика цисплатина на хроматограмме
стандартного раствора (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика
цисплатина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы (менее 0,05 %), пик цисплатин аквакомплекса и
пики растворителя.

*Потеря в массе при высушивании*. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная
навеска) субстанции.

*Серебро.* Не более 0,025 %. Определение проводят методом
атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная
спектрометрия», метод 1).

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл азотной кислоты при
нагревании до 80 °С, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём
раствора водой до метки.

_Калибровочные растворы_. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают
серебра стандартный раствор 5 мкг/мл в количествах: 10 мл, 20 мл и
30 мл, прибавляют 50 мл азотной кислоты и доводят объём растворов водой
до метки (получают растворы с содержанием серебра соответственно 0,5;
1,0 и 1,5 мкг/мл).

_Контрольный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл
азотной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

_Условия испытания_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Источник излучения 2+|лампа для определения серебра с полым катодом с
щелью пропускания 0,5 нм; |

|Длина волны |328 нм; | |

|Атомизация |воздушно—ацетиленовое пламя. | |
|===

Измеряют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный
график зависимости средних результатов измерений, полученных для
калибровочных растворов от их концентрации. Содержание серебра в
испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

+*+ *Бактериальные эндотоксины.* Не более 1,62 ЕЭ на 1 мг цисплатина (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»).

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца цисплатина._ В мерную колбу вместимостью
25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца цисплатина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Хроматографические условия_


* Объём пробы: 10 мкл.


Хроматографируют раствор стандартного образца цисплатина и испытуемый
раствор.

Содержание цисплатина PtCl~2~(NH~3~)~2~ в субстанции в пересчёте на
сухое вещество в процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0320_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	сумма площадей пиков цисплатина и цисплатин аквакомплекса на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	сумма площадей пиков цисплатина и цисплатин аквакомплекса на хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца цисплатина, мг; +
	_W_	–	потеря в массе при высушивании,%; +
	_P_	–	содержание цисплатина в фармакопейном стандартном образце цисплатина,%.


[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

+*+ Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


