[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 

==== ФС.2.1.0609 Ифосфамид (Ifosfamidum)

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0609_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(2__RS__)-3-(2-Хлорэтил)-2-[(2-хлорэтил)амино]-1,3,2λ^5^-оксазафосфинан-2-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % ифосфамида
C~7~H~15~Cl~2~N~2~O~2~P в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость.* Растворим в воде, легко растворим в метиленхлориде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца ифосфамида.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
ифосфамида на хроматограмме раствора стандартного образца ифосфамида
(раздел «Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Угол вращения.* От –0,10° до +0,10° (10 % раствор субстанции,
ОФС «Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора.* Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды,
свободной от углерода диоксида, должен выдерживать сравнение с
эталоном 1 (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y~7~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Готовят раствор 0,5 г субстанции в 50 мл
воды, свободной от углерода диоксида. К 10 мл раствора прибавляют 0,1 мл
метилового красного раствор 0,05 %. Для изменения окраски раствора на
красную должно потребоваться не более 0,1 мл хлористоводородной кислоты
раствора 0,01 М. К 10 мл раствора прибавляют 0,1 мл фенолфталеина
раствор 0,1 %. Для изменения окраски раствора на розовую должно
потребоваться не более 0,3 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М.

рН раствора. От 4,0 до 7,0 (10 % раствор субстанции в воде,
ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная
хроматография»).

_Примеси Е и F._

_Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

_Растворитель._ Метанол—метиленхлорид 1:1.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Метиленхлорид—ацетон 1:10.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,200 г
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е
ифосфамида и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
примеси F ифосфамида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного
образца примеси Е ифосфамида и 10 мг фармакопейного стандартного образца
ифосфамида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь Е: 3-хлор-_N_-(2-хлоэтил)пропан-1-амин [42453-19-0].

Примесь F: (2__RS__)-2-хлор-3-(2-хлорэтил)-1,3,2λ^5^-оксазафосфинан-2-он
[40722-73-4].

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора
(100 мкг), стандартного раствора (по 0,25 мкг примеси Е и примеси F) и
раствора для проверки пригодности хроматографической системы (по 0,5 мкг
примеси E и фармакопейного стандартного образца ифосфамида). Пластинку с
нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в
камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ
пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из
камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и нагревают
при температуре 115 °С в течение 45 мин.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме
раствора для проверки пригодности хроматографической системы чётко видны
две зоны адсорбции.

Зона адсорбции каждой из примесей Е и F на хроматограмме испытуемого
раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна
превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме стандартного
раствора (не более 0,25 %).

_Другие примеси_

_Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

_Растворитель._ Метанол—вода 1:1.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Вода—метанол—уксусная кислота
безводная—метиленхлорид 10:15:25:50.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,00 г
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А
ифосфамида и 25 мг 2-хлорэтиламина гидрохлорида (примесь C в форме
гидрохлорида), растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси В ифосфамида_. В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца примеси В ифосфамида, растворяют в растворителе и
доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг этаноламина (примесь D), 20 мг
фармакопейного стандартного образца примеси А ифосфамида, 80 мг
2-хлорэтиламина гидрохлорида (примесь С в форме гидрохлорида),
растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до
метки.

*Примечание*

Примесь А: (3-{[(2-хлорэтил)амино]пропокси})дигидрофосфат [22608-58-8].

Примесь  В: 1,3-бис(3-{[(2-хлорэтил)амино]пропокси})дигидродифосфат
[241482-18-8].

Примесь С: (2-хлорэтиламин), 2-хлорэтан-1-амин [689-98-5].

Примесь D: (этаноламин), 2-аминоэтан-1-ол [141-43-5].

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора
(1000 мкг), стандартного раствора (по 2,5 мкг примеси A и примеси C),
раствора стандартного образца примеси В ифосфамида (1,5 мкг) и раствора
для проверки пригодности хроматографической системы (по 0,5 мкг
примеси D, 2 мкг примеси А, 8 мкг примеси С в форме гидрохлорида).
Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин,
помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда
фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её
вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и
нагревают при температуре 115 °С в течение 45 мин.

На дно другой камеры помещают выпарительную чашу с калия перманганата
раствором 0,02 М, добавляют равный объём хлористоводородной кислоты
разведённой 7,3 %, камеру закрывают и оставляют на 10 мин. Горячую
пластинку помещают в эту камеру, избегая контакта пластинки с раствором,
закрывают камеру и выдерживают в течение 20 мин. Затем пластинку
вынимают из камеры и сушат в токе холодного воздуха до удаления избытка
хлора (около 20 мин) и пока поверхность пластинки ниже линии старта не
будет давать синего окрашивания при нанесении 0,05 мл крахмала раствора
с калия йодидом. Опрыскивают пластинку тетраметилбензидина спиртовым
раствором 0,1 % в течение 5 с, дают пластинке высохнуть и просматривают.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме
раствора для проверки пригодности хроматографической системы чётко видны
три зоны адсорбции.

Зона адсорбции каждой из примесей A и C на хроматограмме испытуемого
раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна
превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме стандартного
раствора (не более 0,25 %).

Зона адсорбции примеси В на хроматограмме испытуемого раствора по
совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать
соответствующую зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного
образца примеси В ифосфамида (не более 0,15  %).

Любая другая зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по
совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону
адсорбцию на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В
ифосфамида (не более 0,15 %).

*Хлориды.* Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции
в 10 мл воды.

*Вода.* Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).
Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

*Бактериальные эндотоксины.* Не более 0,0625 ЕЭ на 1 мг ифосфамида (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»).

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Стерильность.* Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная
хроматография»).

Срок годности растворов 24 ч.

_Этилпарагидроксибензоата раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 50,0 мг этилпарагидроксибензоата, растворяют в 25 мл спирта
96 %, доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза  (ПФ)._ Ацетонитрил—вода 300:700.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,15 г
(точная навеска) субстанции, прибавляют 10,0 мл этилпарагидроксибензоата
раствора, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 15 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца ифосфамида и 1,0 мл
этилпарагидроксибензоата раствора, растворяют в воде и доводят объём
раствора водой до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, *силикагель октадецилсилильный для
хроматографии*, 5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 195 нм; | |

|Объём пробы |1 мкл. | |
|===

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме стандартного
раствора:

- _разрешение_ (_R~S~_) между пиками ифосфамида и
этилпарагидроксибензоата должно быть не менее 6,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика ифосфамида должно
быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание ифосфамида C~7~H~15~Cl~2~N~2~O~2~P в субстанции в пересчёте
на безводное и свободное от органических растворителей вещество в
процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0609_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика ифосфамида на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика ифосфамида на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца ифосфамида, мг; +
	_W_	–	содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_P_	–	содержание ифосфамида в фармакопейном стандартном образце ифосфамида,%.


[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


