[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0425 Инозин пранобекс (Inosinum pranobexum)


*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0425_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

9-(β-D-Рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-она и 4-ацетамидобензоат
(2RS)-2-гидрокси-N,N-диметилпропан-1-аминия (1:3).

Cодержит не менее 22,8 % и не более 25,2 % инозина C~10~H~12~N~4~O~5~ и
не менее 72,2 % и не более 79,8 % 4-ацетамидобензоат
(2__RS__)-2-гидрокси-_N_,_N_-диметилпропан-1-аминия C~14~H~22~N~2~O~4~ в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Растворимость*. Легко растворим в воде, очень мало растворим или
практически нерастворим в метаноле.

[discrete]
===== Идентификация

. _ВЭЖХ._ Время удерживания двух основных пиков на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пиков
инозина и 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме стандартного
раствора (раздел «Количественное определение»).

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

[none]
* _Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
0,15 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
водой до метки.
* Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до
300 нм должен иметь максимум при 261 нм.

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора*. Раствор 10 г субстанции в 100 мл воды должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*рН раствора*. От 6,0 до 7,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Растворяют 2,65 г дикалия гидрофосфата в
800 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до
2,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу
вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза Б(ПФБ)._ Метанол.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 100 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси 1._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца примеси 1, растворяют в 4 мл аммиака раствора 4 % и доводят
объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до
метки.

_Раствор стандартного образца примеси 2_. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца примеси 2, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора
водой до метки.

_Раствор стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты._ В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, растворяют в воде и
доводят объём раствора водой до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл раствора стандартного образца примеси 1, 1,0 мл раствора
стандартного образца примеси 2 и 1,0 мл раствора стандартного образца
4-ацетамидобензойной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг (точная
навеска) фармакопейного стандартного образца инозина, растворяют в 50 мл
воды, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси 1, доводят
объём раствора водой до метки и перемешивают на магнитной мешалке в
течение 10 мин.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 4,4 мг фармакопейного
стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, растворяют в воде и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора водой до метки.

*Примечание*

Примесь 1: 1,7-дигидро-6__Н__-пурин-6-он [68-94-0].

Примесь 2: 4-аминобензойная кислоты [150-13-0].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный
по отношению коснованиям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С;  | |

|Скорость потока |0,7 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–4,0 |83 |17
|4,0–4,1 |83 → 60 |17 → 40
|4,1–40,0 |60 |40
|40,0–40,1 |60 → 83 |40 → 17
|40,1–55,0 |83 |17
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки пригодности
хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Инозин – 1 (около 6 мин);
примесь 1 – около 0,9; примесь 2 – около 1,9; 4-ацетамидобензойная
кислота – около 3.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков примеси 1 и примеси 2
используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму
стандартного раствора.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика
4-ацетамидобензойной кислоты должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками инозина и
гипоксантина должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме стандартного раствора _фактор асимметрии пика (A~S~)_
примеси 1, 4-ацетамидобензойной кислоты и примеси 2 должен быть не более
1,5;

Содержание примеси 1 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0425_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика гипоксантина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика гипоксантина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца гипоксантина, мг; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_P_	-	содержание гипоксантина в фармакопейном стандартном образце гипоксантина,%; +
	_0,24_	-	массовая доля инозина в субстанции.


Содержание примеси 2 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0425_3.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика 4-аминобензойной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика 4-аминобензойной кислоты на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~0~_	-	навеска стандартного образца 4-аминобензойной кислоты, мг; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_P_	-	содержание4-аминобензойной кислоты в стандартном образце4-аминобензойной кислоты,%; +
	_0,48_	-	массовая доля 4-ацетамидобензойной кислоты в субстанции.


Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0425_4.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика любой неидентифицированной примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~0~_	-	навеска стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, мг; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_P_	-	содержание 4-ацетамидобензойной кислоты в стандартном образце 4-ацетамидобензойной кислоты,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 1 – не более 0,2 %;

- примесь 2 – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади
пика 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме раствора для проверки
чувствительности хроматографической системы (менее 0,025 %).

*Вода.* Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %.Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители*. В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

*_1. Инозин и 4-ацетамидобензойная кислота._* Определение проводят
методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Смешивают 800 мл воды, 6,8 мл фосфорной кислоты
концентрированной и 50 мл метанола. Количественно переносят полученный
раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл, помещают в ледяную баню,
доводят значение рН натрия гидроксида раствором 5 М до 7,0 и доводят
объём раствора водой до метки.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл
помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до
метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного
раствора и доводят объём ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца инозина._ В мерную колбу вместимостью
25 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца инозина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты._ В мерную
колбу вместимостью 25 мл помещают 120 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, растворяют в метаноле
и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают
5,0 мл раствора стандартного образца инозина и 5,0 мл раствора
стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, доводят объём
раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
25,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===
|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
10 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|2,5-кратное от времени удерживания пика
4-ацетамидобензойной кислоты. | 
|===

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ 4-ацетамидобензойная
кислота – около 8 мин; инозин – около 13 мин.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме стандартного
раствора:

- _разрешение (R~S~_) между пиками 4-ацетамидобензойной кислоты и
инозина должно быть не менее 3,0;

- _фактор асимметрии пика_ (_A~S~_) 4-ацетамидобензойной кислоты и
инозина должен быть не более 2,0.

Содержание 4-ацетамидобензойной кислоты C~9~H~9~NO~3~ и инозина
C~10~H~12~N~4~O~5~ в субстанции в пересчёте на безводное и не содержащее
остаточных органических растворителей вещество в процентах
(_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0425_5.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика инозина или 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика инозина или 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца инозина или 4-ацетамидобензойной кислоты, мг; +
	_P_	–	содержание инозина в фармакопейном стандартном образце инозина или 4-ацетамидобензойной кислоты в фармакопейном стандартном образце ацетамидобензойной кислоты,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


*_2. N,N-диметиламино-2-пропанол._* Определение проводят методом
титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 40 мл воды и титруют
0,1 М раствором хлористоводородной кислоты. Конечную точку титрования
определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 10,317 мг
_N,N_-диметиламино-2-пропанола C~5~H~13~NO.

[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


