[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС.2.1.0526 Нистатин (Nystatinum)

*Взамен ФС 42-1140-98*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0526_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

Полиеновый антибиотик, продуцируемый актиномицетом _Streptomyces
noursei_.
(1__S__,3__R__,4__R__,7__R__,9__R__,11__R__,15__S__,16__R__,17__R__,18__S__,19__E__,21__E__,25__E__,27__E__,29__E__,31__E__,33__R__,35__S__,36__R__,37__S__)-33-[(3-Амино-3,6-дидезокси-β-D-маннопиранозил)окси]-1,3,4,7,9,11,17,37-октагидрокси-15,16,18-триметил-13-оксо-14,39-диоксабицикло[33.3.1]нонатриаконта-19,21,25,27,29,31-гексаен-36-карбоновая
кислота (основной компонент – нистатин A~1~).

Cодержит не менее 4400 единиц действия (ЕД) на один миллиграмм нистатина
C~47~H~75~NO~17~ в пересчёте на сухое вещество. Одна ЕД соответствует
одной единице действия Международного стандарта нистатина.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Жёлтого или жёлто-коричневого цвета порошок.

+*+ Гигроскопичен. Неустойчив к воздействию света, кислороду воздуха и
нагреванию.

*Растворимость*. Легко растворим в диметилформамиде и
диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в
воде и спирте 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца нистатина.

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

[none]
* Спектр поглощения испытуемого раствора, полученного в разделе
«Оптическая плотность», в области длин волн от 220 до 350 нм (в кювете с
толщиной слоя 1 см) должен иметь максимумы при 230 нм, 291 нм, 304 нм и
319 нм. Отношение оптических плотностей раствора в максимумах при 291 нм
и 319 нм к оптической плотности в максимуме при 305 нм должно быть от
0,61 до 0,73 и от 0,83 до 0,96, соответственно.
* Отношение оптической плотности в максимуме при 230 нм к оптической
плотности на плече при 280 нм должно быть от 0,83 до 1,25.

[arabic,start=3]
. _Качественная реакция с хлористоводородной кислотой
концентрированной._ К 2,0 мг субстанции прибавляют 0,1 мл
хлористоводородной кислоты концентрированной, должно появиться
коричневое окрашивание.

. _Качественная реакция с серной кислотой концентрированной._ К 2,0 мг
субстанции прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной, должно
появиться коричневое окрашивание. При отстаивании окраска должна
измениться на фиолетовую.

[discrete]
===== Испытания

*Оптическая плотность.* Оптическая плотность испытуемого раствора,
измеренная при длине волны 305 нм в кювете с толщиной слоя 1 см,
относительно раствора сравнения, должна быть не менее 0,60 (ОФС
«Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

_Растворитель._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл
уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора метанолом до метки.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.
Измерение проводят в течение не более 30 мин после приготовления.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
растворителя и доводят объём раствора метанолом до метки.

*Содержание компонентов А~1~ и А~Х~ нистатина.* Определение проводят
методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

_Буферный раствор_. К 1500 мл воды прибавляют 5,78 г аммония ацетата,
фильтруют через мембранный фильтр и дегазируют ультразвуком.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—Буферный раствор 290:710.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 400:600.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг
(точная навеска) субстанции и доводят объём раствора диметилсульфоксидом
до метки.

_Раствор стандартного образца нистатина._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца нистатина и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20,0 мг
(точная навеска) субстанции, растворяю в 25,0 мл метанола и доводят
объём раствора водой до метки. К 10 мл полученного раствора прибавляют
2,0 мл кислоты хлористоводородной разведённой 7,3 % и выдерживают при
комнатной температуре в течение 1 ч.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца нистатина и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.
В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 4,6 мм, эндкепированный октадецилсилил силикагель,
деактивированный по отношению к основаниям, 5 мкм; |

|Температура колонки |30 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 305 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|4-кратное от времени удерживания основного
пика. |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–25 |100 |0
|25–35 |100 → 0 |0 → 100
|35–45 |0 |100
|45–50 |0 → 100 |100 → 0
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Нистатин А~1~ – 1 (около
14 мин). Для идентификации пиков используют относительное время
удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
сравнения _разрешение_ (_R~S~_) между двумя основными пиками должно быть
не менее 3,5 (время удерживания – около 13 мин и 19 мин).

Основного компонента А~1~ должно быть не менее 85 %, любых других
компонентов А~Х~ – не более 4 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика
компонента А~1~ на хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы и любые пики, время удерживания которых менее
2 мин.

*Потеря в массе при высушивании.* Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 3). Сушат 1,0 г (точная навеска) субстанции до
постоянной массы при температуре 60 °С в течение 3 ч при остаточном
давлении не более 0,1 кПа.

*Сульфатная зола.* Не более 3,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом диффузии в агар (ОФС «Определение
антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар»).

[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте при
температуре не выше 5 °С.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


