[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===



===== ОФС.1.2.2.2.0018 4-Аминофенол

*Вводится впервые*
 

Метод определения 4-аминофенола в лекарственных средствах, содержащих
парацетамол, основан на использовании ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная
жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие парацетамол или 4-аминофенол, защищают от света
и используют свежеприготовленными.

====== Методика 1

_Буферный раствор_. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 4,0 г
натрия цитрата и 1,5 г лимонной кислоты безводной, растворяют в воде и
доводят объём тем же растворителем до метки.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
0,60 г калия дигидрофосфата и 0,82 г динатрия гидрофосфата безводного.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Вода.

_Подвижная фаза В (ПФВ)._ Ацетонитрил.

_Растворитель._ Ацетонитрил—буферный раствор 10:90.

_Испытуемый раствор А._ Готовят раствор субстанции или препарата в
растворителе с концентрацией парацетамола 10 мг/мл и фильтруют через
мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

_Испытуемый раствор Б._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл
испытуемого раствора А, доводят объём раствора растворителем до метки и
фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

_Раствор стандартного образца 4-аминофенола_. В мерную колбу
вместимостью 200 мл помещают около 5 мг (точная навеска) стандартного
образца 4-аминофенола, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности системы._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца 4-аминофенола и
доводят объём раствора растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл
испытуемого раствора А и 15 мл раствора стандартного образца
4-аминофенола, доводят объём раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===
|Колонка |150 × 4,6 мм, сорбент комбинированный для ВЭЖХ, 5 мкм; | |
|Температура колонки |30 °С; | |
|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |
|Детектор |спектрофотометрический, 300 нм; | |
|Объём пробы |10 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^26%,^25%,^25%,^24%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА, % |ПФБ, % |ПФВ, %
|0–7 |90 |5 |5
|7–7,1 |90 → 10 |5 → 10 |5 → 80
|7,1–10 |10 → 90 |10 → 5 |80 → 5
|10–15 |90 |5 |5
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, стандартный раствор и испытуемый раствор Б.

_Время удерживания_ 4-аминофенола – около 5 мин.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической
системы _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика 4-аминофенола должно быть
не менее 20.

На хроматограмме стандартного раствора:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками 4-аминофенола и ближайшим к нему
должно быть не менее 1;

-  _фактор асимметрии_ _пика (A~S~)_ 4-аминофенола должен быть не более
1,5;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика 4-аминофенола
должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание 4-аминофенола С~6~Н~7~NO в субстанции или препарате в
процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_ofs_1.2.2.2.0018_1.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика 4-аминофенола на хроматограмме испытуемого раствора; +
_S~0~_	–	площадь пика 4-аминофенола на хроматограмме стандартного раствора; +
_a~0~_	–	навеска стандартного образца 4-аминофенола, мг; +
_P_	–	содержание 4-аминофенола в стандартном образце 4-аминофенола, %.


_Допустимое содержание 4-аминофенола:_ Не более 0,15 % по отношению к
парацетамолу, если в фармакопейной статье не указано иначе.

_Настройка хроматографической системы._ При необходимости, время
удерживания 4-аминофенола может быть уменьшено или увеличено в
соответствии с таблицей:

[cols="^43%,^57%",options="header",]
|===
^|*Изменение во времени удерживания 4-аминофенола:* ^|*Изменение условий
хроматографирования:*
.3+.^|Уменьшение: |Увеличение доли ПФВ
^|Уменьшение доли ПФБ
^|Увеличение доли ПФА

.2+.^|Увеличение: |Понижение рН ПФА
^|Увеличение температуры колонки
|===

====== Методика 2

_Подвижная фаза._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,6 г
натрия бутансульфоната, растворяют в смеси муравьиная
кислота—метанол—вода 4:150:850 и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Растворитель._ Метанол—вода 15:85.

_Испытуемый раствор._ Готовят раствор субстанции или препарата в
растворителе с концентрацией парацетамола 10 мг/мл и фильтруют через
мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

_Раствор стандартного образца 4-аминофенола_. В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают около 10 мг (точная навеска) стандартного
образца 4-аминофенола, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г стандартного образца
парацетамола и доводят объём раствором стандартного образца
4-аминофенола до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы_. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора для проверки
пригодности хроматографической системы и доводят объём растворителем до
метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный,
для хроматографии, 5 мкм; | |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,4 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 272 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки пригодности
хроматографической системы, раствор стандартного образца 4-аминофенола.

_Время удерживания соединений._ Парацетамол − около 6 мин;
4-аминофенол − около 3 мин.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика
4-аминофенола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической
системы:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками 4-аминофенола и парацетамола должно
быть не менее 5;

-  _фактор асимметрии_ _пика (A~S~)_ 4-аминофенола должен быть не более
2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика 4-аминофенола
должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- _эффективность хроматографической колонки (N)_, рассчитанная по пику
4-аминофенола, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание 4-аминофенола С~6~Н~7~NO в субстанции или препарате в
процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_ofs_1.2.2.2.0018_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика 4-аминофенола на хроматограмме испытуемого раствора; +
_S~0~_	–	площадь пика 4-аминофенола на хроматограмме раствора стандартного образца 4-аминофенола;   +
_a~0~_	–	навеска стандартного образца 4-аминофенола, мг; +
_P_	–	содержание 4-аминофенола в стандартном образце 4-аминофенола, %.


_Допустимое содержание 4-аминофенола:_ Не более 0,01 % по отношению к
парацетамолу, если в фармакопейной статье не указано иначе.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


