[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===



==== ФС.2.1.0457 Нитизинон (Nitisinonum)


*Вводится впервые*
 
[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0457_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

2-[2-Нитро-4-(трифторметил)бензоил]циклогексан-1,3-дион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % нитизинона
C~14~H~10~F~3~NO~5~ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

*Растворимость.* Легко растворим в ацетонитриле, умеренно растворим в
метаноле, практически нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца нитизинона.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика нитизинона на
хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона (раздел
«Количественное определение»).

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»). Спектр поглощения основного пика на хроматограмме
испытуемого раствора, полученный с помощью диодно-матричного детектора в
области длин волн от 200 до 380 нм, должен соответствовать спектру
поглощения пика нитизинона на хроматограмме раствора стандартного
образца нитизинона (раздел «Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Температура плавления.* От 139,5 до 141,0 °C (с разложением, ОФС
«Температура плавления», метод 1).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза (ПФ)._ Ацетонитрил—метанол—фосфорной кислоты раствор
0,02 М 200:300:500.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг
(точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл ПФ, выдерживают на
ультразвуковой бане в течение 10 мин, периодически встряхивая колбу, не
допуская нагревания выше 25 °С, и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. Срок годности раствора – 24 ч при температуре
10 °С.

_Раствор стандартного образца нитизинона._ В мерную колбу вместимостью
25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца нитизинона, прибавляют 15 мл ацетонитрила, выдерживают на
ультразвуковой бане в течение 2–3 мин, периодически встряхивая колбу,
охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. Срок
годности раствора – 24 ч.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл
раствора стандартного образца нитизинона и доводят объём раствора ПФ до
метки. Срок годности раствора – 24 ч.

_Раствор примеси 1._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг
фармакопейного стандартного образца примеси 1, растворяют в 50 мл
ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 2 мин,
периодически встряхивая колбу и не допуская нагревания выше 25 °C, и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор хранят при
температуре не выше 8 °С.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг
фармакопейного стандартного образца нитизинона, прибавляют 50 мл ПФ,
выдерживают на ультразвуковой бане в течение 3 мин, периодически
встряхивая. Колбу герметично закрывают, выдерживают в термостате при
температуре 60 °C в течение 2 ч, охлаждают до комнатной температуры,
прибавляют 0,1 мл раствора примеси 1, перемешивают и фильтруют через
мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Раствор хранят при
температуре не выше 8 °С.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца нитизинона и доводят объём раствора ПФ до метки.

*Примечание*

Примесь 1: 2-нитро-4-(трифторметил)бензойная кислота [320-94-5].

Примесь 2: циклогексан-1,3-дион [504-02-9].

Примесь 3: 6-(трифторметил)-3,4-дигидро-1__H__-ксантен-1,9(2__H__)-дион.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный,
для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |30 °С; | |

|Температура образца |10 °С; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 240 нм; | |

|Объём пробы |30 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|2-кратное от времени удерживания пика
нитизинона. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый
раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Нитизинон – 1 (около
16 мин); примесь 2 – около 0,1; примесь 1 – около 0,3; примесь 3 – около
0,4.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика нитизинона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси 1 и
примеси 3 должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- _фактор асимметрии_ _пика (A~S~)_ нитизинона должен быть не менее 0,8
и не более 1,5;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика нитизинона должно
быть не более 5,0 % (6 введений);

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты:
примесь 1 – 1,8; примесь 2 – 0,5.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0457_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика нитизинона на хроматограмме раствора сравнения; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска стандартного образца нитизинона, мг; +
	_P_	–	содержание нитизинона в стандартном образце нитизинона,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 1 – не более 0,15 %;

- примесь 2 – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на
хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической
системы (менее 0,05 %).

*Вода.* Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для
определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

*Хлориды.* Не более 0,1 % (ОФС «Хлориды»). В коническую колбу
вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, прибавляют 25 мл воды,
перемешивают на магнитной мешалке в течение 30 мин, периодически
встряхивая, и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после
сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания родственные
примеси со следующими изменениями.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг
(точная навеска) субстанции, прибавляют 70 мл ПФ, выдерживают на
ультразвуковой бане в течение 10 мин, периодически встряхивая колбу, не
допуская нагревания выше 25 °C, и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца нитизинона._ В мерную колбу вместимостью
25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца нитизинона, растворяют в 15 мл ацетонитрила, выдерживают на
ультразвуковой бане в течение 2–3 мин, периодически встряхивая колбу, и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора ПФ до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|55 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный,
для хроматографии, 3 мкм; |

|Температура колонки |30 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический (диодно-матричный), 240 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|1,5-кратное от времени удерживания пика
нитизинона. |
|===

Хроматографируют раствор стандартного образца нитизинона и испытуемый
раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца нитизинона:

- _фактор асимметрии_ _пика (A~S~)_ нитизинона должен быть не менее 0,8
и не более 1,5;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика нитизинона должно
быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание нитизинона C~14~H~10~F~3~NO~5~ в субстанции в процентах в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0457_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика нитизинона на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика нитизинона на хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца нитизинона, мг; +
	_P_	–	содержание нитизинона в фармакопейном стандартном образце нитизинона,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

При температуре не выше 8 °С.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


