[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
 

==== ФС 2.1.0344 Альфакальцидол (Alfacalcidolum)

*Взамен ФС 42-3450-97*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0344_1.png[]
|===


[discrete]
===== Определение

(5__Z__,7__E__)-9,10-Секохолеста-5,7,10(19)-триен-1α,3β-диол.

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % альфакальцидола
C~27~H~44~O~2~ в пересчёте на сухое вещество.

В растворе в зависимости от температуры и времени проявляет обратимую
изомеризацию до пре-альфакальцидола. Активность обусловлена обоими
соединениями.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белые или почти белые кристаллы или белый кристаллический
порошок.

+*+ Чувствителен к воздействию воздуха, тепла и света.

*Растворимость.* Практически нерастворим в воде, легко растворим в
спирте 96 %, растворим в жирных маслах.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^–1^ по положению полос поглощения
должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца
альфакальцидола.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика альфакальцидола
на хроматограмме раствора стандартного образца альфакальцидола (раздел
«Количественное определение»).

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора в области от
220 до 330 нм должен иметь максимум при 265 нм и минимум при 228 нм.

[none]
* _Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг
субстанции, растворяют в спирте 95 % и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 95 % до
метки.

[discrete]
===== Испытания

*Температура плавления.* От 137 до 144 °C (ОФС «Температура плавления»,
метод 1, без предварительного подсушивания).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света и воздуха и используют
свежеприготовленными.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Метанол—вода—ацетонитрил 150:170:680.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в 25 мл ацетонитрила и доводят
объём раствора водой до метки.

_Раствор стандартного образца альфакальцидола._ В мерную колбу
вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца альфакальцидола, растворяют в 25 мл ацетонитрила и
доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного
образца альфакальцидола для проверки пригодности хроматографической
системы (содержит примеси A и D), растворяют в 10 мл ацетонитрила и
доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор для идентификации примеси В._ В мерную колбу вместимостью 20 мл
помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца альфакальцидола для
идентификации примеси В, растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят объём
раствора водой до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца альфакальцидола и доводят объём раствора смесью ацетонитрил—вода
1:1 до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора той же смесью до метки.

*Примечание*

Примесь A: (5__E__,7__E__)-9,10-секохолеста-5,7,10(19)-триен-1α,3β-диол
[65445-14-9].

Примесь B: (5__Z__,7__E__)-9,10-секохолеста-5,7,10(19)-триен-1β,3β-диол
[63181-13-5].

Примесь D: неизвестная структура.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |150 × 2,1 мм, силикагель октадецилсилильный с полярными
группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, 1,7 мкм; | |

|Температура колонки |32 °C; | |

|Скорость потока |0,3 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 264 нм; | |

|Объём пробы |5 мкл; | |

|Время хроматографирования |2-кратное от времени удерживания пика
альфакальцидола. | |
|===

_Относительное время удерживания соединений._ Альфакальцидол – 1 (около
15 мин); пре-альфакальцидол – около 0,91; примесь A – около 0,94;
примесь D – около 0,96; примесь B – около 1,1.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси используют
относительное время удерживания соединений, хроматограмма, прилагаемая к
стандартному образцу альфакальцидола для проверки пригодности
хроматографической системы, и хроматограмма раствора для проверки
пригодности хроматографической системы используются для идентификации
пиков примесей A и D, а также пре-альфакальцидола; хроматограмма,
прилагаемая к стандартному образцу альфакальцидола для идентификации
примеси B, и хроматограмма раствора для идентификации примеси B
используются для идентификации пика примеси B.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика альфакальцидола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической
системы:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси D и альфакальцидола должно
быть не менее 1,5;

- _отношение максимум/минимум (p/v)_ между пиками пре-альфакальцидола и
примеси A должно быть не менее 2,0;

- _отношение максимум/минимум (p/v)_ между пиками примеси A и примеси D
должно быть не менее 1,5.

_Допустимое содержание примесей:_ Содержание каждой из примесей в
субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования
(ОФС «Хроматография»):

- примеси A, B и D – не более 0,5 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пик пре-альфакальцидола и пики, площадь которых менее
площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки
чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

*Потеря в массе при высушивании.* Не более 0,3 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 3). Высушивают 0,1 г (точная навеска)
субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 50 °C и
остаточном давлении не более 0,67 кПа (5 мм рт. ст.).

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца альфакальцидола и
испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца альфакальцидола _относительное стандартное
отклонение_ площади пика альфакальцидола должно быть не более 1,0 %
(6 введений).

Содержание альфакальцидола C~27~H~44~O~2~ в субстанции в процентах в
пересчёте на сухое вещество (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0344_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика альфакальцидола на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика альфакальцидола на хроматограмме раствора стандартного образца альфакальцидола; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца альфакальцидола, мг; +
	_P_	–	содержание альфакальцидола в фармакопейном стандартном образце альфакальцидола,%; +
	_W_	–	потеря в массе при высушивании,%.


Примечание – Если на хроматограмме испытуемого раствора присутствует пик
пре-альфакальцидола, то в расчётах используется сумма площадей пиков
альфакальцидола и пре-альфакальцидола.

[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, под инертным газом, в защищённом от
света месте при температуре от 2 до 8 °С.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


