[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС.2.1.0538 Октреотида ацетат

*Октреотид* +
*Octreotidi acetas* 

*Взамен ВФС 42-3552-99*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0538_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

_S^2^_,_S^7^_-Цикло\{D-фенилаланил-L-цистеинил-L-фенилаланил-D-триптофил-L-лизил-L-треонил-_N_^1^-[(2__R__,3__R__)-1,3-дигидроксибутан-2-ил]-L-цистеинамида}
ацетат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % октреотида
C~49~H~66~N~10~O~10~S~2~ в пересчёте на безводное и свободное от
уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый порошок со слабым запахом уксусной кислоты.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость*. Легко растворим в воде, мало и медленно растворим в
спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

[discrete]
===== Идентификация

Проводят определения 1 и 2 или 2 и 3.

. _^1^H-ЯМР-спектроскопия_ (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного
резонанса»).

[none]
* _Растворитель_. Смесь дейтерированной уксусной кислоты и дейтерия
оксида, содержащего 0,03 мг/мл дейтерированного триметилсилилпропионата
натрия (ТСП) 10:90.
* _Испытуемый раствор_. Раствор субстанции в растворителе с концентрацией 2 мг/мл.
* _Раствор стандартного образца октреотида ацетата._ Раствор стандартного
образца октреотида ацетата для ЯМР идентификации в растворителе с
концентрацией 2 мг/мл.
* _Оборудование._ Импульсный ЯМР-спектрометр с рабочей частотой на
протонах не менее 300 МГц.
* _Параметры регистрации ^1^H ЯМР спектров_
[none]
** Ширина спектра: от 0 до 8 м.д;
** Температура образца: 25 °С.


[none]
* *Примечание* – Спектры испытуемого раствора и раствора стандартного
образца октреотида ацетата должны записываться без вращения образца и
при одинаковой температуре.
* _Анализ ^1^H ЯМР спектров:_
** спектр испытуемого раствора должен качественно соответствовать спектру
раствора стандартного образца октреотида ацетата после нормализации
обоих спектров с целью уравнивания их по интенсивности.

[arabic,start=3]
. _ВЭЖХ_. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика октреотида на
хроматограмме раствора стандартного образца октреотида ацетата (раздел
«Количественное определение»).

. _Аминокислотный состав_. Определение проводят в соответствии с ОФС
«Аминокислотный анализ». Относительное содержание каждой аминокислоты
рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну третью суммарного
мольного содержания фенилаланина и лизина, по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0538_2.png[]
|===

где	_n~i~_	–	количество молей соответствующей аминокислоты, нмоль; +
	_∑n(2 Phe, 1 Lys)_ –	сумма мольного содержания фенилаланина и лизина, нмоль.


Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах:
треонин – от 0,70 до 1,11; лизин – от 0,90 до 1,30; фенилаланин – от
1,80 до 2,20; цистеин – от 1,00 до 2,20; треонинол – от 0,60 до 1,30.

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От –52,0 до –62,0 в пересчёте на безводное,
свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей
вещество (0,5 % раствор субстанции в уксусной кислоте ледяной, ОФС
«Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора.* Раствор 10 мг субстанции в 100 мл воды должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»,
метод 2).

*pH раствора.* От 4,5 до 6,5 (0,01 % раствор, ОФС «Ионометрия»,
метод 3).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

_Подвижная фаза А (ПФА)_. Трифторуксусной кислоты раствор 0,02 %.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)_. Ацетонитрил.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора
ПФА до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы_. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг фармакопейного
стандартного образца маркера октреотида нециклического для проверки
пригодности системы
(D-фенилаланил-L-цистеинил-L-фенилаланил-D-триптофил-L-лизил-L-треонил-_S_-(ацетамидометил)-_N_-[(2__R__,3__R__)-1,3-дигидроксибут-2-ил]-L-цистеинамид
[774239-80-4]), растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки
(раствор А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг
субстанции, растворяют в 40 мл ПФА, прибавляют 1,0 мл раствора А и
доводят объём раствора ПФА до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и
доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до
метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель додецилсилильный для хроматографии,
4 мкм; |

|Температура колонки |40 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 220 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–25 |90 → 65 |10 → 35
|25–30 |65 → 10 |35 → 90
|30–35 |10 |90
|35–40 |10 → 90 |90 → 10
|40–45 |90 |10
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Октреотид – 1 (около
16,5 мин); октреотид нециклический – около 1,1.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика октреотида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками октреотида и
нециклического октреотида должно быть не менее 2,0.

_Допустимое содержание примесей._ Содержание каждой из примесей в
субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС
«Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

При оценке примесей не учитывают любой пик со временем удерживания менее
5 мин. Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика
на хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы (менее 0,1 %).

*Вода.* Не более 10 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения
используют 20 мг (точная навеска) субстанции.

*Уксусная кислота.* От 5,0% до 12,8 %. (ОФС «Определение уксусной
кислоты в синтетических пептидах»).

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

{asterisk}{asterisk} *Бактериальные эндотоксины*. Не более 11,67 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный
раствор субстанции в воде с концентрацией октреотида 10 мг/мл, затем
разводят его не менее чем в 100 раз.

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца октреотида ацетата._ В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца октреотида ацетата, растворяют в ПФА и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца октреотида ацетата и
испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца октреотида ацетата:

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) октреотида должен быть не менее
0,8 и не более 2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика октреотида должно
быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание октреотида C~49~H~66~N~10~O~10~S~2~ в субстанции в пересчёте
на безводное и свободное от уксусной кислоты и остаточных органических
растворителей вещество в процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0538_3.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика октреотида на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика октреотида на хроматограмме раствора стандартного образца октреотида ацетата; +
	_a~1_~	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца октреотида ацетата, мг; +
	_P_	-	содержание октреотида в фармакопейном стандартном образце октреотида ацетата,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_A_	–	содержание уксусной кислоты в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В сухом, защищённом от света месте, при температуре от 2 до 8 °С.

+*+ Приводится для информации.

{asterisk}{asterisk} Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


