[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
 

==== ФС.2.1.0037 Стрептомицина сульфат

*Стрептомицин* +
*Streptomycini sulfas* 

*Взамен ФС.2.1.0037.15*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0037_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

__N,N′-__Бис(аминоиминометил)-[_O_-2-дезокси-2-(метиламино)-α-L-глюкопиранозил-(1→2)-_О_-5-дезокси-3-_С_-формил-α-L-ликсофуранозил-(1→4)-D-стрептамина
сульфат (2:3).

Стрептомицин образуется несколькими штаммами _Streptomyces griseus_.
1 мкг химически чистого стрептомицина основания соответствует
специфической активности, равной одной единице действия (ЕД).

Cодержит не менее 730 мкг/мг активного вещества в пересчёте на сухое
вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый порошок.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость*. Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в
спирте 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ТСХ_ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

[none]
* _Пластинка_. ТСХ пластинка с 0,75 мм слоем следующего состава: смешивают
0,3 г карбомера с 240 мл воды, выдерживают при умеренном встряхивании в
течение 1 ч и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором 8,5 % до
7, прибавляют 30 г силикагеля Н.
* _Предварительная подготовка пластинки._ Пластинку выдерживают при
температуре 110 °С в течение 1 ч и охлаждают. Подготовку пластинки
проводят непосредственно перед использованием.
* _Подвижная фаза (ПФ)_. Калия дигидрофосфата раствор 0,5 М.
* _Испытуемый раствор_. В колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
субстанции растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.
* _Раствор сравнения_. В колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата, растворяют в
воде и доводят объём раствора водой до метки.
* _Раствор для проверки пригодности хроматографической системы_. В колбу
вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца
стрептомицина сульфата, 10 мг фармакопейного стандартного образца
канамицина моносульфата и 10 мг фармакопейного стандартного образца
неомицина сульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до
метки.
* _Реактив для детектирования. 1,3-дигидроксинафталина в растворе серной
кислоты_. Смешивают равные объёмы 1,3-дигидроксинафталина раствора 0,2 %
и серной кислоты раствора 50 %.
* На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, 10 мкл
раствора сравнения и 10 мкл раствора для проверки пригодности
хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на
воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом.
Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её
вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха до удаления следов
растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и выдерживают
при температуре 150 °С в течение 5–10 мин. Пластинку охлаждают и
просматривают в видимом свете.
* _Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться
3 разделённые зоны адсорбции.
* _Результат._ Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого
раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне
адсорбции фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата на
хроматограмме раствора сравнения.

[arabic,start=2]
. _Качественная реакция_. Растворяют 8 мг субстанции в 4 мл воды и
прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 1 М. Нагревают на водяной
бане в течение 4 мин. Полученный раствор нейтрализуют хлористоводородной
кислоты раствором 2 М и прибавляют 0,1 мл железа(III) хлорида раствора
1 %. Должно появиться фиолетовое окрашивание.

. _Качественная реакция_. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл воды,
прибавляют 1 мл α-нафтола раствора 0,1 % и 2 мл смеси равных объёмов
натрия гипохлорита раствора концентрированного и воды; должно появиться
красное окрашивание.

. _Качественная реакция._ Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл воды и
прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М. Нагревают на
водяной бане в течение 2 мин. Прибавляют 2 мл α-нафтола раствора 0,5 % в
натрия гидроксида растворе 1 М. Нагревают на водяной бане в течение
1 мин. Должно появиться светло-жёлтое окрашивание.

. _Качественная реакция_. Субстанция должна давать характерную
реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельный показатель поглощения.* Величина оптической плотности
испытуемого раствора должна составлять не менее 90,0 % от величины
оптической плотности раствора стандартного образца (ОФС
«Спектрофотомерия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

_Испытуемый раствор_. Субстанцию сушат в вакуум-сушильном шкафу при
температуре 60 °С и остаточном давлении, не превышающем 0,7 кПа (5 мм
рт. ст.), в течение 3 ч. В мерную колбу объёмом 100 мл помещают 0,1 г
высушенной субстанции растворяют в воде и доводят объём раствора водой
до метки.

_Раствор стандартного образца._ В мерную колбу объёмом 100 мл помещают
0,1 г фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата,
высушенного, как указано для испытуемого раствора, растворяют в воде и
доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор сравнения_. К 5 мл воды прибавляют 5 мл 0,2 М раствора натрия
гидроксида и нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин. Затем
колбу помещают на 5 мин в баню со льдом, прибавляют 3 мл 1,5 % раствора
железа(III) хлорида в 0,5 М растворе серной кислоты и доводят объём
раствора водой до метки.

_Железа(III) хлорида раствор 1,5 % в серной кислоты растворе 0,5 М_

В мерную колбу объёмом 1000 мл помещают 15 г железа(III) хлорида,
растворяют в 250 мл серной кислоты растворе 0,5 М и доводят объём
раствора водой до метки.

В мерные колбы вместимостью по 25 мл помещают по 5,0 мл испытуемого и
стандартного растворов. В каждую колбу прибавляют по 5,0 мл натрия
гидроксида раствора 0,2 М и нагревают на кипящей водяной бане в течение
10 мин. Затем колбы помещают на 5 мин в баню со льдом, прибавляют 3 мл
железа(III) хлорида раствор 1,5 % в серной кислоты растворе 0,5 М и
доводят объёмы растворов водой до метки. Через 20 мин измеряют
оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов в кювете с
толщиной слоя 10 мм в максимуме поглощения при 525 нм относительно
раствора сравнения.

*Прозрачность раствора.* Опалесценция 25 % раствора субстанции в воде
после выдерживания его в защищённом от света месте при температуре 20 °С
в течение 24 ч не должна превышать опалесценцию эталона сравнения II.
(ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора.* Окраска раствора, полученного в испытании
«Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее
близко подходящего по цвету эталона сравнения 3 (ОФС «Степень окраски
жидкостей», метод 2).

*рН*. От 4,5 до 7,0 (25 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Стрептомицин В*. Испытание проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная
хроматография»).

_Пластинка_. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

_Подвижная фаза (ПФ)_. Уксусная кислота ледяная—метанол—толуол 1:1:2.

_Испытуемый раствор_. В колбу для перегонки вместимостью 50 мл помещают
0,2 г субстанции, растворяют, при энергичном перемешивании в 5 мл
свежеприготовленной смеси серная кислота концентрированная—метанол 3:97.
Содержимое колбы кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч,
охлаждают, промывают холодильник 10 мл метанола, собирая смывы в колбу с
раствором, и доводят объём полученного раствора метанолом до 20 мл.

_Раствор сравнения_. В колбу для перегонки вместимостью 50 мл помещают
36 мг (точная навеска) D-маннозы, растворяют при энергичном
перемешивании в 5 мл свежеприготовленной смеси серная кислота
концентрированная—метанол 3:97. Содержимое колбы кипятят с обратным
холодильником в течение 1 ч, охлаждают, промывают холодильник 10 мл
метанола, переносят количественно полученный раствор в мерную колбу
вместимостью 50 мл и доводят объём раствора метанолом до метки. 5,0 мл
полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и
доводят объём раствора метанолом до метки.

Полученный раствор содержит эквивалент 0,03 % раствора стрептомицина В
(1 мг D-маннозы соответствует 4,13 мг стрептомицина В).

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы_. Смешивают
по 1 мл испытуемого и стандартного растворов.

_Реактив для детектирования:_ Смешивают равные объёмы
1,3-дигидроксинафталина в спирте 96 % раствор 0,2 % и серной кислоты
раствор 20 %. Раствор готовится непосредственно перед использованием.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, 10 мкл
стандартного раствора и 10 мкл раствора для проверки пригодности
хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на
воздухе, помещают в (предварительно насыщенную парами растворителей в
течение не менее 12 ч) камеру с ПФ и хроматографируют восходящим
способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии
старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей,
опрыскивают реактивом для детектирования и выдерживают при температуре
110 °С в течение 5 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом
свете.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться
2 разделенные зоны адсорбции.

_Результат._ На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции
стрептомицина В по совокупности величины и интенсивности окраски не
должна превышать зону адсорбции, полученную на хроматограмме раствора
сравнения (не более 3 %).

*Потеря в массе при высушивании*. Не более 7,0 %.(ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в
вакуумном сушильном шкафу при температуре 60±1 °С и остаточном давлении,
не превышающем 0,1 кПа в течение 24 ч.

*Метанол.* Не более 0,3% (ОФС «Газовая хроматография»).

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 г
субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12,0 мг
метанола и доводят объём раствора до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|Кварцевая капиллярная 1,75±0,25 × 3±1 мм, покрытая слоем
сополимера этилвинилбензол-дивинилбензола, 150–180 мкм; |

|Детектор |пламенно-ионизационный; | |

|Газ-носитель |азот для хроматографии; | |

|Скорость потока |Газ-носитель |30–40 мл/мин; |

|Температура |Колонка |120 °С – 140 °С, |

| |Блок ввода проб и детектор |170 °С – 190 °С. |
|===

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора
площадь пика, соответствующего метанолу не должна превышать площадь пика
на хроматограмме раствора сравнения.

*Сульфатная зола*. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфаты*. От 18,0 до 21,5 % в пересчёте на сухое вещество (ОФС
«Сульфаты»).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г (точная навеска)
субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.
Доводят рН полученного раствора до 11 (потенциометрически) аммиака
раствором концентрированным 25 %. К полученному раствору прибавляют
10 мл бария хлорида раствора 0,1 М и около 0,5 мг индикатора
фталеинового пурпурного. Избыток бария хлорида раствора 0,1 М титруют
натрия эдетата раствором 0,1 М до начала изменения окраски, прибавляют
50 мл спирта 96 % и продолжают титрование до исчезновения
фиолетово-голубого окрашивания раствора.

1 мл бария хлорида раствора 0,1 М соответствует 9,606 мг сульфат-ионов.

*Остаточные органические растворители*. В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

{asterisk}{asterisk} *Аномальная токсичность*. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС
«Аномальная токсичность»). Тест-доза: 1,3 мг стрептомицина в 0,5 мл воды
для инъекций на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

{asterisk}{asterisk} *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг стрептомицина
(ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

{asterisk}{asterisk} *Стерильность*. Субстанция должна быть стерильной (ОФС
«Стерильность»).

[discrete]
===== Количественное определение

Проводят определение в соответствии +
с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом
диффузии в агар».

[discrete]
===== Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

+*+ Приводится для информации.

{asterisk}{asterisk}  Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


