
[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС 2.1.0207 Хлорамфеникол (Chloramphenicolum)

*Взамен ФС.2.1.0207.18*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0207_1.png[]
|===


[discrete]
===== Определение

_N_-[(1__R__,2__R__)-1,3-Дигидрокси-1-(4-нитрофенил)пропан-2-ил]-2,2-дихлорацетамид.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % хлорамфеникола
C~11~H~12~Cl~2~N~2~O~5~ в пересчёте на сухое вещество.


[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или серовато-белый, желтовато-белый или белый с
зеленовато-жёлтым оттенком кристаллический порошок, тонкие кристаллы или
продолговатые пластинки.

*Растворимость*. Легко растворим в спирте 96 %, растворим в этилацетате,
мало растворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика хлорамфеникола
на хроматограмме раствора стандартного образца хлорамфеникола (раздел
«Количественное определение»).

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг
субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до
400 нм должен иметь максимум поглощения при 278 нм и минимум поглощения
при 237 нм. В качестве раствора сравнения используют натрия гидроксида
раствор 0,1 М


[discrete]
===== Испытания

*Температура плавления*. От 149 до 153 °С (ОФС «Температура плавления»,
метод 1).

*Удельное вращение*. От +18 до +21 в пересчёте на сухое вещество (ОФС
«Оптическое вращение»).

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,5 мг
субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

*Удельный показатель поглощения*. От 290 до 305 при длине волны 278 нм в
пересчёте на сухое вещество (0,002 % раствор в хлористоводородной
кислоты растворе 0,1 М, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл спирта 96 %
должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции
(мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора*. Окраска раствора, полученного в испытании
«Прозрачность раствора», не должна превышать эталон сравнения Y~5~
(ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

*Кислотность или щёлочность*. Встряхивают в течение 2 мин 0,1 г
субстанции с 20 мл воды и прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего
раствора 0,04 %. Окраска раствора должна измениться от прибавления не
более 0,1 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты или 0,02 М
раствора натрия гидроксида.

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед приготовлением.

_Буферный раствор_. Растворяют 2,0 г натрия гептансульфоната в 900 мл
воды, прибавляют 6,8 г калия дигидрофосфата и 5 мл триэтиламина и
доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,50.
Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и
доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Метанол—буферный раствор 320:680.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Метанол.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг
субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора ПФА до
метки.

_Раствор стандартного образца примеси В_. В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В,
растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную
колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора ПФА до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного
стандартного образца хлорамфеникола для идентификации примесей,
содержащего примесь А, растворяют в 1,0 мл метанола, прибавляют 1,0 мл
раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора ПФА до
метки.

*Примечание*

Примесь А: (1__R__,2__R__)-2-амино-1-(4-нитрофенил)пропан-1,3-диол
[716-61-0].

Примесь В: 4-нитробензальдегид [555-16-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный
по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 277 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^35%,^34%,^31%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–13 |100 |0
|13–25 |100 → 60 |0 → 40
|25–33 |60 |40
|33–38 |60 → 100 |40 → 0
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Хлорамфеникол – 1 (около
14 мин); примесь А – около 0,7; примесь В – около 0,9.

_Идентификация примесей_. Для идентификации пиков примесей А и В
используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму
раствора для проверки разделительной способности хроматографической
системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу
хлорамфеникола для идентификации примесей.

_Пригодности хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками примеси В и хлорамфеникола должно быть
не менее 2,0.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площадь пика примеси
А умножают на 0,7.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать двукратную площадь пика
хлорамфеникола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика
хлорамфеникола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную
площадь пика хлорамфеникола на хроматограмме раствора сравнения (не
более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от площади
пика хлорамфеникола.

*Хлориды*. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают в течение 5 мин
0,6 г субстанции с 20 мл воды и 10 мл азотной кислоты концентрированной
и фильтруют.

*Потеря в массе при высушивании*. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная
навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном
в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

+*+ *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,2 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный
раствор субстанции концентрацией 10 мг хлорамфеникола в 1 мл 96%
этилового спирта.

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

+*+ *Стерильность.* Субстанция должна быть стерильна. В соответствии с ОФС
«Стерильность».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями. Растворы готовят непосредственно
перед приготовлением.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Метанол—буферный раствор 320:680.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём
раствора ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца хлорамфеникола._ В мерную колбу
вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца хлорамфеникола, растворяют в 10 мл метанола и
доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца хлорамфеникола и
испытуемый раствор.

Содержание хлорамфеникола C~11~H~12~Cl~2~N~2~O~5~ в процентах (_Х_) в
пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0207_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика хлорамфеникола на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика хлорамфеникола на хроматограмме раствора стандартного образца хлорамфеникола; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола, мг; +
	_P_	–	содержание хлорамфеникола в фармакопейном стандартном образце хлорамфеникола,%; +
	_W_	–	потеря в массе при высушивании,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.

+*+ Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


