[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 

==== ФС 2.1.0348 Фторурацил (Fluorouracilum)

*Взамен ФС 42-1085-91*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0348_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

5-Фторпиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % фторурацила
C~4~H~3~FN~2~O~2~ в пересчёте на сухое вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Растворимость*. Легко растворим в диметилформамиде, умеренно растворим
в воде, мало растворим в спирте 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца фторурацила.

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

[none]
* Спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в хлористоводорой кислоты
растворе 0,1 М в области длин волн от 220 до 350 нм должен
соответствовать спектру аналогичного раствора фармакопейного
стандартного образца фторурацила.

[discrete]
===== Испытания

*Удельный показатель поглощения*. От 530 до 550 (в максимуме поглощения)
при длине волны 266 нм (0,001 % раствор субстанции в хлористоводородной
кислоты растворе 0,1 М, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора*. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY~7~ или Y~7~ (ОФС
«Степень окраски жидкостей», метод 2).

*pH раствора*. От 4,5 до 5,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси*

_1. Примеси F и G._ Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная
хроматография»).

_Пластинка_. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F~254~.

_Подвижная фаза (ПФ)_. Метанол—вода—этилацетат 15:15:70.

_Растворитель_. Метанол—вода 50:50.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,10 г
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси F_. В мерную колбу вместимостью
200 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F,
растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до
метки.

_Раствор стандартного образца примеси G_. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца мочевины,
растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора метанолом до метки.

*Примечание*

Примесь F: 2-этокси-5-фторпиримидин-4(1__H__)-он(2-этокси-5-фторурацил)
[56177-80-1].

Примесь G: мочевина, (карбамид) [57-13-6].

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора
(100 мкг), раствора стандартного образца примеси F (0,25 мкг), раствора
стандартного образца примеси G (0,2 мкг) и по 5 мкл растворов
стандартных образцов примесей F и G в одну точку для проверки
пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами
высушивают на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и
хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около
80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в
токе воздуха в течение 15 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны
254 нм для обнаружения примеси F.

Для обнаружения примеси G пластинку опрыскивают смесью 200 мл
диметиламинобензальдегида раствора 1 % в этаноле и 20 мл
хлористоводородной кислоты концентрированной, сушат при температуре
80 °С в течение 3–4 мин и просматривают в видимом свете (примесь G
проявляется в виде жёлтого пятна).

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме
нанесённых в одну точку растворов стандартных образцов примесей F и G,
после обоих просмотров обнаруживаются две чётко разделённые зоны
адсорбции.

_Допустимое содержание примесей_. На хроматограмме испытуемого раствора:

- примесь F: зона адсорбции, находящаяся на уровне основной зоны
адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F, не
превосходит последнюю по величине (не более 0,25 %);

- примесь G: зона адсорбции, находящаяся на уровне основной зоны
адсорбции на хроматограмме раствора примеси G, не превосходит последнюю
по совокупности величины и интенсивности окраски (не более 0,2 %).

*_2. Другие примеси_*. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света и используют свежеприготовленными.

_Подвижная фаза (ПФ)_. Калия дигидрофосфата раствор 0,05 М, доведённый
до pH 5,7 калия гидроксида раствором 30 %.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ
до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца фторурацила_. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца фторурацила и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца примеси A_. В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
примеси A, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до
метки.

_Раствор стандартного образца примеси B_. В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
примеси B, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до
метки.

_Раствор стандартного образца примеси C (А)_. В мерную колбу
вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца примеси C, растворяют в ПФ и доводят объём раствора
ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца примеси C (Б)_. В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца
примеси C (А) и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора ПФ до метки.

_Раствор смеси примесей D и E_. Содержимое флакона фармакопейного
стандартного образца смеси примесей фторурацила (содержащего примеси D и
E) растворяют в 1 мл ПФ.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы_. В мерную
колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 1,0 мл
раствора стандартного образца примеси C (А) и доводят объём раствора ПФ
до метки.

*Примечание*

Примесь A: пиримидин-2,4,6(1__H__,3__H__,5__H__)-трион [67-52-7].

Примесь B: дигидропиримидин-2,4,5(3__H__)-трион [496-76-4].

Примесь C: пиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион, CAS [66-22-8].

Примесь D: 5-метоксипиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион [6623-81-0].

Примесь E: 5-хлорпиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион [1820-81-1].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 266 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|3-кратное от времени удерживания пика
фторурацила. |
|===

Хроматографируют испытуемый раствор, раствор стандартного образца
фторурацила, растворы стандартных образцов примесей A, B и C, раствор
смеси примесей D и E и раствор для проверки пригодности
хроматографической системы.

_Относительное время удерживания соединений_. Фторурацил – 1 (около
6 мин); примесь A – около 0,5; примесь B – около 0,7; примесь C – около
0,9; примесь D – около 1,6; примесь E – около 1,9.

_Идентификация примесей_. Для идентификации примесей используют
хроматограммы растворов стандартных образцов примесей A, B и C (Б),
раствора смеси примесей D и E и хроматограмму, прилагаемую к
стандартному образцу смеси примесей фторурацила (содержащего примеси D и
E).

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси C и фторурацила должно быть
не менее 2,0;

На хроматограммах растворов стандартных образцов примесей A, B и C (Б):

- _фактор асимметрии пиков_ (_A~S~_) каждой из примесей A, B и C должен
быть не более 2,0;

- _относительные стандартные отклонения_ площадей пиков примесей A, B и
C должны быть не более 5,0 %, соответственно (6 введений).

На хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила:

- _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика фторурацила должно быть не менее
30;

- _фактор асимметрии пика_ (_A~S~_) фторурацила должен быть не более
2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика фторурацила должно
быть не более 5,0 % (6 введений).

_Поправочные коэффициенты_. Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные
коэффициенты: примесь D – 1,5; примесь E – 1,3.

Содержание каждой из примесей A, B и C в субстанции в процентах (_Х_)
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0348_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика примеси A, B или C на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика примеси A, B или C на хроматограмме раствора стандартного образца примеси A, B или C (Б), соответственно; +
	_a~0~_	-	навеска стандартного образца примеси A, B или C, соответственно, мг; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_P_	-	содержание примеси A, B или C в стандартном образце примеси A, B или C, соответственно,%.


Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (_Х)_ вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0348_3.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика фторурацила на хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила; +
	_a~0~_	-	навеска стандартного образца фторурацила, мг; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_P_	-	содержание фторурацила в стандартном образце  фторурацила,%.


_Допустимое содержание примесей_:

- содержание любой из примесей A, B, C, D и E – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее половины площади основного пика
на хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила (менее
0,05 %).

*Потеря в массе при высушивании*. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска)
субстанции в вакууме над фосфора(V) оксидом при температуре 80 °С в
течение 4 ч.

*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола», платиновый
тигель). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после
сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители*. В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

+*+ *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг фторурацила (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный
раствор субстанции c концентрацией 1 мг фторурацила в 1 мл воды.

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия
(титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции при слабом нагревании в
80 мл диметилформамида. Раствор охлаждают до температуры 15–25 °С и
титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида до появления синего
окрашивания (индикатор – 0,25 мл тимолового синего раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 13,01 мг
фторурацила C~4~H~3~FN~2~O~2~.

[discrete]
===== Хранение

В плотно закрытой упаковке, в защищённом от света месте при температуре
не выше 25 °С.

+*+ Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


