[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

===== ОФС.1.2.3.0035 Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах

*Вводится впервые*
 

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на определение
уксусной кислоты в лекарственных средствах синтетических пептидов.

====== Область применения

Испытание проводят для установления количественного содержания уксусной
кислоты в синтетических пептидах с использованием высокоэффективной
жидкостной хроматографии.

====== Методика

_Приготовление растворов_

_Подвижная фаза А (ПФА_). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
0,7 мл фосфорной кислоты концентрированной. Доводят объём раствора водой
до метки и перемешивают. Значение рН полученного раствора доводят до
3,00 натрия гидроксида раствором концентрированным.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Метанол.

_Растворитель._ ПФБ—ПФА 5:95.

_Испытуемый раствор_. Готовят, как указано в фармакопейной статье.

_Стандартный раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мл
растворителя, прибавляют 10 мг (точная навеска) стандартного образца
уксусной кислоты ледяной, доводят объём раствора тем же растворителем до
метки и перемешивают (0,1 мг/мл).

_Проверка пригодности хроматографической системы_. Хроматографическая
система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- _фактор асимметрии пика (A~S~)_ пика уксусной кислоты на хроматограмме
стандартного раствора должен быть не более 2,0;

- _относительное стандартное отклонение (RSD)_ площади пика уксусной
кислоты на хроматограмме стандартного раствора должно быть не более
2,0 % (6 введений);

- _эффективность хроматографической колонки (N),_ рассчитанная по пику
уксусной кислоты на хроматограмме стандартного раствора, должна быть не
менее 500 теоретических тарелок.

_Условия хроматографирования_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===
|Колонка |250 мм × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для
хроматографии (С18), 5 мкм | |
|Скорость потока, мл/мин |1,2 | |

|Температура колонки, °С |25 | |

|Детектор |спектрофотометрический | |

|Длина волны, нм |210 | |

|Объём вводимой пробы, мкл |10 | |
|===


_Режим хроматографирования_
[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФ А, об.% |ПФ Б, об.%
|0–5 |95 |5
|5–10 |95 → 50 |5 → 50
|10–20 |50 |50
|20–22 |50 → 95 |50 → 5
|22–30 |95 |5
|===

Время удерживания уксусной кислоты около 3-4 мин. Базовая линия
представляет собой крутой подъём в начале линейного градиента, который
соответствует выходу пептидов из колонки.

Хроматографируют испытуемый и стандартный растворы.

Содержание уксусной кислоты в лекарственных средствах в процентах (_Х_)
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_ofs_1.2.3.0035_1.png[]
|===

где	S	–	площадь пика уксусной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора; +
	S~0~	–	площадь пика уксусной кислоты на хроматограмме стандартного раствора; +
	С	–	концентрация испытуемого раствора, мг/мл; +
	С~0~	–	концентрация уксусной кислоты в стандартном растворе, мг/мл.



