[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 

==== ФС.2.1.0645 Ванкомицина гидрохлорид

*Ванкомицин* +
*Vancomycini hydrochloridum* 

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0645_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(1__S__,2__R__,18__R__,19__R__,22__S__,25__R__,28__R__,40__S__)-22-(2-Амино-2-оксоэтил)-48-{[2-_O_-(3-_C_-амино-2,3,6-тридезокси-3-метил-α-L-_ликсо_-гексопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,18,32,35,37-пентагидрокси-19-[(2__R__)-4-метил-2-(метиламино)пентанамидо]-20,23,26,42,44-пентаоксо-5,15-дихлор-7,13-диокса-21,24,27,41,43-пентаазаоктацикло[26.14.2.2^3,6^.2^14,17^.1^8,12^.1^29,33^.0^10,25^.0^34,39^]пентаконта-3,5,8(48),9,11,14,16,29(45),30,32,34,36,38,46,49-пентадекаен-40-карбоновой
кислоты гидрохлорид (1:1).

Cодержит не менее 900 мкг/мг ванкомицина C~66~H~75~Cl~2~N~9~O~24~ в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество.

Вещество, продуцируемое некоторыми штаммами _Amycolatopsis orientalis_.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый микрокристаллический порошок.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость*. Легко растворим в воде, очень мало растворим или
практически нерастворим в спирте 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия._ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца ванкомицина.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора Б должно соответствовать времени удерживания основного пика
(Ванкомицин В) на хроматограмме раствора для проверки разделительной
способности хроматографической системы (раздел «Ванкомицин В»).

. _Качественная реакция._ Раствор субстанции 10 % должен давать
характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора*. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть
прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Оптическая плотность*. Оптическая плотность раствора, полученного в
испытании «Прозрачность раствора», измеренная в максимуме поглощения при
длине волны 450 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать
0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

*рН раствора*. От 2,5 до 4,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

_Приготовление испытуемого раствора_. В мерную колбу вместимостью 20 мл
помещают 1 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода
диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

*Ванкомицин В.* Не менее 91,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Буферный раствор._ Растворяют 2 мл триэтиламина в воде и доводят
значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,2, количественно
переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и
доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор
10:70:920.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор
10:290:700.

_Испытуемый раствор А._ В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг
субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

_Испытуемый раствор Б._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
2,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФА до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг
фармакопейного стандартного образца ванкомицина гидрохлорида, растворяют
в воде и доводят объём раствора водой до метки. Раствор переносят в
коническую колбу с пришлифованной пробкой, нагревают до 65 °С и
выдерживают при этой температуре в течение 24 ч, после чего охлаждают до
комнатной температуры. Раствор используют в течение 4 ч.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б
и доводят объём раствора ПФА до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",^,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; | |

|Температура колонки |30 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 280 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^34%,^32%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–13 |100 |0
|13–22 |100 → 0 |0 → 100
|22–27 |0 |100
|27–30 |0 → 100 |100 → 0
|===

Уравновешивают колонку в течение не менее 30 мин смесью ПФА—ПФБ в
соотношении 0:100, уравновешивают колонку в течение 15 мин смесью
ПФА—ПФБ в соотношении 100:0.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, испытуемые растворы А и Б.

_Время удерживания ванкомицина В –_ около 11 мин.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика ванкомицина В должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между двумя основными
пиками должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме испытуемого раствора Б:

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) ванкомицина В должен быть не более
1,6;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика ванкомицина В
должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- _эффективность хроматографической колонки (N)_, рассчитанная по пику
ванкомицина В, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание ванкомицина В в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0645_2.png[]
|===

где	_S~Б~_	-	площадь пика ванкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора Б; +
	_∑S~А~_ 	-	сумма площадей пиков всех примесей на хроматограмме испытуемого раствора А; +
	_25_	-	коэффициент разведения испытуемого раствора А.


Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,2 % от площади
основного пика на хроматограмме испытуемого раствора А, а также пики,
соответствующие пикам на хроматограмме ПФ.

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях
испытания «Ванкомицин В».

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0645_3.png[]
|===

где	_S~А~_	-	площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора А; +
	_S~Б~_	-	площадь пика ванкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора Б; +
	_∑S~А~_ 	-	сумма площадей пиков всех примесей на хроматограмме испытуемого раствора А; +
	_25_	-	коэффициент разведения испытуемого раствора А.


_Допустимое содержание примесей:_

- любая примесь – не более 4,0%;

- сумма примесей – не более 9,0%.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 % от площади
основного пика на хроматограмме испытуемого раствора А, а также пики,
соответствующие пикам на хроматограмме ПФ.

*Вода*. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола». Для приготовления эталонного раствора к
3 мл свинец стандартный раствор 10 мкг/мл прибавляют 7 мл воды.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Аномальная токсичность.* Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС
«Аномальная токсичность»). Тест-доза – 4 мг субстанции, растворённой в
0,5 мл воды для инъекций, на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с.
Срок наблюдения – 48 ч.

*Бактериальные эндотоксины.* Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг субстанции
(Ванкомицин В) (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят микробиологическим методом в соответствии с ОФС
«Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в
агар».

[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


