[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0407 Диацереин

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0407_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

4,5-Бис(ацетилокси)-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота.

Cодержит не менее 98,0% и не более 102,0% диацереина C~19~H~12~O~8~ в
пересчёте на сухое вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Жёлтый кристаллический порошок.

*Растворимость*. Растворим в диметилацетамиде, мало растворим в
тетрагидрофуране, практически нерастворим в воде и этаноле.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца диацереина.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
диацереина на хроматограмме раствора стандартного образца диацереина
(раздел «Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытание проводят в защищённом от света месте.

*_1._ _Примеси В и Н_*

_Лимонной кислоты раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
0,4 г лимонной кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой
до метки.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Тетрагидрофуран—ацетонитрил—лимонной кислоты
раствор 80:275:645.

_Раствор А._ Растворяют 14,7 г натрия хлорида и 18,8 г глицина в 500 мл
воды.

_Раствор Б._ Смешивают 25,3 мл натрия гидроксида раствора 2% и 74,6 мл
раствора А, при необходимости доводят значение рН натрия гидроксида
раствором 8,5% или серной кислоты раствором 1 М до 9,5.

_Испытуемый раствор._ Растворяют 0,1 г субстанции в 30 мл натрия
гидроксида раствора 2%, перемешивают в течение 10 мин, прибавляют 70 мл
раствора А и при необходимости доводят значение рН натрия гидроксида
раствором 8,5% или серной кислоты раствором 1 М до 9,5. Полученный
раствор экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл,
извлечения объединяют, промывают раствором Б 2 раза по 8 мл, и 1 раз
серной кислоты раствором 0,01 М 10 мл. Органический слой отделяют и
упаривают при температуре 33 °С досуха, высушивание завершают, используя
сжатый воздух. Полученный сухой остаток растворяют в 2,0 мл ПФ.

_Раствор стандартного образца примеси В._ В мерную колбу вместимостью
25 мл помещают 7,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В,
растворяют в тетрагидрофуране, доводят объём раствора тем же
растворителем до метки, обрабатывают полученный раствор ультразвуком в
течение не более 30 с и охлаждают до комнатной температуры. В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора натрия гидроксида раствором 2% до метки. В мерную колбу
вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора натрия гидроксида раствором 2% до метки. Смешивают 5,0 мл
полученного раствора и 25 мл натрия гидроксида раствора 2%,
перемешивают в течение 10 мин, прибавляют 70 мл раствора А и при
необходимости доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5% или
серной кислоты раствором 1 М до 9,5. Полученный раствор экстрагируют
тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл, извлечения объединяют,
промывают раствором Б 2 раза по 8 мл, и 1 раз серной кислоты раствором
0,01 М 10 мл. Органический слой отделяют и упаривают при температуре
33 °С досуха, высушивание завершают, используя сжатый воздух. Полученный
сухой остаток растворяют в 2,0 мл ПФ.

Примечание – Время между растворением фармакопейного стандартного
образца примеси В и экстракцией не должно превышать 30 мин.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца примеси В и доводят объём раствора ПФ до метки.

*Примечание*

Примесь В: 1,8-дигидрокси-3-(гидроксиметил)антрацен-9,10-дион
[481-72-1].

Примесь Н: 3-[(ацетилокси)метил]-9,10-диоксоантрацен-1,8-диил диацетат
[25395-11-3].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; |

|Температура колонки |16 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |100 мкл; | |

|Время хроматографирования |2,5-кратное от времени удерживания пика
примеси В. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси В и
испытуемый раствор.

_Время удерживания_ примеси В – около 11 мин.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика диацереина должно быть не менее 10.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора
сумма площадей пиков примесей В и Н не должна превышать площадь пика
примеси В на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В (не
более 0,0015%).

*_2. Другие примеси_*

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Смешивают 353 мл воды и 147 мл фосфорной
кислоты концентрированной. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Ацетонитрил.

_Растворитель._ ПФА—ПФБ 500:500.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г
субстанции, растворяют в 50 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора тетрагидрофураном до
метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции,
прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М, 40 мл
тетрагидрофурана и доводят объём раствора растворителем до метки
(раствор содержит примеси D и E).

_Раствор для идентификации пиков._ Содержимое флакона фармакопейного
стандартного образца диацереина смеси примесей, содержащего примеси С и
F, растворяют в смеси 0,5 мл тетрагидрофурана и 0,5 мл растворителя.

*Примечание*

Примесь С: 4,5-дигидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота
[478-43-3].

Примесь D: 5-(ацетилокси)-4-гидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая
кислота [875535-35-6].

Примесь Е: 4-(ацетилокси)-5-гидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая
кислота [875535-36-7].

Примесь F:
(10__S__)-3-[(ацетилокси)метил]-10-(2,3,4,6-тетра-_О_-ацетил-β-D-глюкопиранозил)-9-оксоантрацен-1,8-диил
диацетат [13928-72-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|100 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный,
октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм; |

|Температура колонки |30 °С; | |

|Скорость потока |1,2 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–3 |80 |20
|3–13 |80 → 60 |20 → 40
|13–20 |60 |40
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор
сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Диацереин – 1 (около
13,5 мин); примесь D – около 1,1; примесь Е – около 1,15; примесь С –
около 1,2; примесь F – около 1,3.

_Идентификация примесей_. Для идентификации пиков примесей С и F
используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму
раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к
фармакопейному стандартному образцу диацереина смеси примесей.

Для идентификации пиков примесей D и Е используют относительное время
удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки
разделительной способности хроматографической системы.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками примеси D и примеси Е должно быть не
менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения _отношение сигнал/шум (S/N)_ для
пика диацереина должно быть не менее 100.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные
коэффициенты: примесь С – 1,4; примесь D – 1,3; примесь Е – 1,3; примесь
F – 9,5.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей D и Е не должна более чем в 5 раз
превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения
(не более 0,5%);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 2 раза превышать площадь
пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);

- площадь пика примеси F не должна более чем в 1,5 раза превышать
площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,15%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика
диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную
площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более
2,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на
хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

*Потеря в массе при высушивании.* Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная
навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии
с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) с использованием
эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в тетрагидрофуране и доводят
объём раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью
25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца диацереина._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца диацереина, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объём
раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл
помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца диацереина и испытуемый
раствор.

Содержание диацереина C~19~H~12~O~8~ в субстанции в пересчёте на сухое
вещество в процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0407_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика диацереина на  хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика диацереина на хроматограмме раствора стандартного образца диацереина; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца диацереина, мг; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_W_	–	потеря в массе при высушивании,%; +
	_Р_	–	содержание диацереина в фармакопейном стандартном образце диацереина,%.


[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


