[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 

==== ФС.2.1.0002 Амлодипина безилат (Amlodipini besilas)

*Амлодипин* 

*Взамен ФС.2.1.0002.15*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0002_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

5-Метил-3-этил{(4__RS__)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилата} бензолсульфонат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % амлодипина безилата
С~20~Н~25~ClN~2~О~5~∙С~6~H~6~О~3~S в пересчёте на безводное и свободное
от остаточных органических растворителей вещество.

Производителям амлодипина безилата необходимо проводить оценку риска
образования алкиловых эфиров бензолсульфоновой кислоты и загрязнения ими
в процессе производства. При выявлении потенциального риска процесс
производства должен быть изменён, чтобы исключить или минимизировать
загрязнение.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый порошок.

*Растворимость*. Легко растворим в метаноле, умеренно растворим в спирте
96 %, мало растворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1^ по положению полос поглощения
должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца
амлодипина безилата.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика амлодипина на
хроматограмме раствора стандартного образца амлодипина безилата (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Угол вращения*. От –0,10° до +0,10° (1 % раствор субстанции в метаноле,
ОФС «Оптическое вращение»).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Испытание проводят в
защищённом от света месте.

_Раствор аммония ацетата_. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
2,3 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой
до метки.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Раствор аммония ацетата—метанол 300:700.

_Испытуемый раствор А_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ
до метки.

_Испытуемый раствор Б._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
5,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца амлодипина безилата._ В мерную колбу
вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца амлодипина безилата, растворяют в ПФ и доводят
объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца примеси А._ В мерную колбу вместимостью
5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
примеси А, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца амлодипина безилата и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,5 мг
фармакопейного стандартного образца примеси B и 2,5 мг фармакопейного
стандартного образца примеси G, растворяют в ПФ и доводят объём раствора
ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для идентификации пиков._ Растворяют 2,5 мг фармакопейного
стандартного образца амлодипина для идентификации пиков, содержащего
примеси D, E и F, в 5 мл ПФ.

*Примечание*

Примесь A: +
5-Метил-3-этил[(4RS)-2-{[2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)этокси]метил}-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат]
[88150-62-3].

Примесь B: +
5-Метил-3-этил[(4RS)-6-метил-2-({2-[2-(метилкарбамоил)
бензамидо]этокси}метил)-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат]
[721958-72-1].

Примесь D: +
5-Метил-3-этил[(4RS)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)пиридин-3,5-дикарбоксилат]
[113994-41-5].

Примесь E: +
Диэтил[(4RS)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат]
[140171-65-9].

Примесь F: +
Диметил[(4RS)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат]
[140171-66-0].

Примесь G: +
Диметил[2,6-диметил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат]
[43067-01-2].

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; | | 

|Температура колонки |30 °С; | | 

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | | 

|Детектор |спектрофотометрический, 237 нм; | | 

|Объём пробы |20 мкл; | | 

|Время хроматографирования |3-кратное от времени удерживания пика
амлодипина. | | 
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, стандартный раствор, раствор
стандартного образца примеси А, раствор сравнения и испытуемый
раствор А.

_Относительное время удерживания соединений._ Амлодипин – 1 (около
20 мин); примесь G – около 0,21; примесь B – около 0,25; примесь D –
около 0,5; примесь F – около 0,8; примесь E – около 1,3.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков примесей D, E и F
используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму
стандартного раствора и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному
стандартному образцу амлодипина для идентификации пиков; для
идентификации пика примеси A используют хроматограмму раствора
стандартного образца примеси А.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности системы
_отношение сигнал/шум (S/N)_ для пика амлодипина должно быть не менее
10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками примесей G и
B должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения _относительное стандартное
отклонение_ площади пика амлодипина должно быть не более 5 %
(6 введений).

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные
коэффициенты: примесь D – 1,7; примесь F – 0,7.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора А:

- площадь пика примеси А не должна превышать 1,5 площади пика примеси А
на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более
0,15 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать трёхкратную площадь пика
амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей E и F не должна превышать 1,5 площади
пика амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика
амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать восьмикратную
площадь пика амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,8 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика амлодипина на
хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %), а также все пики,
соответствующие бензолсульфоновой кислоте (относительное время
удерживания – около 0,14).

*Вода*. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Алкиловые эфиры бензолсульфоновой кислоты.* Определение проводят
методом парофазной газовой хроматографии с масс-спектрометрическим
детектированием (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы готовятся непосредственно перед использованием.

_Растворитель._ Вода—ацетонитрил 20:80.

_Раствор для дериватизации_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
30 мг натрия тиосульфата безводного и 60,0 г натрия йодида, прибавляют
воду, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения,
охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до
метки.

_Раствор внутреннего стандарта._ В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 10 мкл фармакопейного стандартного образца бутилметансульфоната
и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 20 мкл полученного раствора и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Контрольный раствор._ Помещают 0,50 мл раствора для дериватизации и
0,50 мл раствора внутреннего стандарта во флакон для парофазного анализа
и немедленно герметично укупоривают.

_Испытуемый раствор_. Во флакон для парофазного анализа объёмом 20 мл
помещают 25,0 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 0,50 мл
раствора для дериватизации и 0,50 мл раствора внутреннего стандарта и
немедленно герметично укупоривают.

Примечание – В процессе реакции дериватизации может наблюдаться осадок,
но это не влияет на качество определения.

_Стандартный раствор А_. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают по
25,0 мг (точная навеска) метилбензолсульфоната, этилбензолсульфоната и
изопропилметансульфоната, растворяют в толуоле и доводят объём раствора
толуолом до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мкл
полученного раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего
стандарта до метки.

_Стандартный раствор Б_. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают
40 мкл стандартного раствора А и доводят объём раствора раствором
внутреннего стандарта до метки. Во флакон для парофазного анализа
объёмом 20 мл помещают 0,50 мл полученного раствора и 0,50 мл раствора
для дериватизации и немедленно герметично укупоривают.

_Стандартный раствор В_. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают
500 мкл стандартного раствора А и доводят объём раствора раствором
внутреннего стандарта до метки. Во флакон для парофазного анализа
объёмом 20 мл помещают 0,50 мл полученного раствора и 0,50 мл раствора
для дериватизации и немедленно герметично укупоривают.

 
_Хроматографические условия_
 

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |кварцевая капиллярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем
полиэтиленгликоля, деактивированного по отношению к полярным
соединениям, 1 мкм; | |

|Детектор |квадрупольный масс-спектрометрический; | |

|Газ-носитель |гелий для хроматографии; | |

|Деление потока |1:20; | |

|Скорость потока |0,5 мл/мин; | |

|Объём пробы |1 мл; | |

|Время хроматографирования |10 мин. | |
|===

_Температурная программа_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
| |Время, мин |Температура, °C
|Колонка |0–1 |40
| |1–10 |40 → 130
|Инжектор | |220
|Детектор |линия переноса |280
|===

_Условия парофазного анализа_

[cols="37%,^63%"]
|===

|Температура уравновешивания |60 °С
|Время уравновешивания |30 мин
|Температура линии переноса |120 °С
|===

По окончании анализа температуру в колонке поднимают до 240 °С и
поддерживают в течение 7 мин.

_Условия МС/МС_

[cols="49%,^51%",]
|===

|Источник ионизации |электронная ионизация (EI, 70эВ);
|Режим детектирования |мониторинг избранного иона (SIM);
|Температура источников ионов |250 °С;
|Температура анализатора |200 °С.
|===

_Характеристики компонентов_

[cols="25%,^25%,^25%,^25%",options="header"]
|===
^|Компонент |Относительное время удерживания |Ион для количественного
определения (m/z) |Ион для качественного анализа (m/z)

|Метилйодид |около 0,51 |142 |127

|Этилйодид |около 0,63 |156 |127

|Изопропилйодид |около 0,68 |170 |127

|Бутилйодид |1 (около 8,5 мин) |184 |127
|===

*Примечание* – Соединения образуются в процессе дериватизации.

Хроматографируют контрольный раствор, стандартный раствор Б, стандартный
раствор В и испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической систем_

На хроматограмме стандартного раствора Б _отношение сигнал/шум (S/N)_
для пика каждого из алкилйодидов должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора В _разрешение (R~S~)_ между
пиками этилйодида и изопропилйодида должно быть не менее 1,5.

Содержание каждой из примесей метилбензолсульфоната,
этилбензолсульфоната и изопропилбензолсульфоната в ppm (_X_)
рассчитывается по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0002_2.png[]
|===

где	_B~1~_	–	отношение площади пика соответствующего алкилйодида к площади пика бутилйодида на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_B~0~_	–	отношение площади пика соответствующего алкилйодида к площади пика бутилйодида на хроматограмме стандартного раствора В; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг;  +
	_a~0~_	–	навеска алкилбензолсульфоната или алкилметансульфоната, использованная для приготовления стандартного раствора, мг; +
	_P_	–	содержание алкилбензолсульфоната,%.


Суммарное содержание примесей метилбензолсульфоната,
этилбензолсульфоната и изопропилбензолсульфоната не должно превышать
150 ppm.

*Сульфатная зола.* Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные
примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца амлодипина безилата и
испытуемый раствор Б.

Содержание амлодипина безилата С~20~Н~25~ClN~2~О~5~∙С~6~H~6~О~3~S в
субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0002_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика амлодипина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика амлодипина на хроматограмме раствора стандартного образца амлодипина безилата; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца амлодипина безилата, мг; +
	_P_	–	содержание амлодипина безилата в фармакопейном стандартном образце амлодипина безилата,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


