[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС.2.1.0081 Гемцитабина гидрохлорид

*Гемцитабин* +
*Gemcitabini hydrochloridum* 

*Взамен ФС.2.1.0081.18*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0081_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

4-Амино-1-(2-дезокси-2,2-дифтор-β-D-_эритро_-пентофуранозил)пиримидин-2(1__H__)-она
гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % гемцитабина гидрохлорида
C~9~H~11~F~2~N~3~O~4~·HCl в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый порошок.

*Растворимость.* Растворим в воде, мало растворим в метаноле,
практически нерастворим в ацетоне.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
гемцитабина на хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина
гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

. _Качественная реакция._ Субстанция должна давать характерную реакцию
на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От +43,0 до +50,0 в пересчёте на сухое вещество
(1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды,
свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС
«Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора*. Окраска раствора, полученного в испытании
«Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном ВY~7~
(ОФС «Степень окраски жидкостей»).

*pH*. От 2,0 до 3,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Вода.* Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза А_ (ПФА). 0,1 М фосфатный буферный раствор рН 2,5.

_Подвижная фаза В (ПФБ)._ Метанол.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца гемцитабина
гидрохлорида, 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
примеси А, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ Во флакон
(колбу) вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг субстанции, прибавляют 4 мл
калия гидроксида раствора в метаноле 3 М и обрабатывают на
ультразвуковой бане в течение 5 мин. Флакон закрывают и нагревают при
55 ^0^С не менее 6 ч для получения примеси В. После охлаждения переносят
содержимое флакона в мерную колбу вместимостью 100 мл, последовательно
промывая флакон раствором фосфорной кислоты 1 %. Доводят объём раствора
в мерной колбе тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и
доводят объём раствора водой до метки.

*Примечание*

Примесь А (цитозин): 4-аминопиримидин-2(1__H__)-он [71-30-7].

Примесь В (гемцитабина α-аномер):
4-амино-1-(2-дезокси-2,2-дифтор-α-D-_эритро_-пентофуранозил)пиримидин-2(1__H__)-он
[95058-85-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по
отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; | |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,2 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 275 нм; | |

|Объём пробы |50 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА, % |ПФБ, %
|0–8 |97 |3
|8–13 |97 → 50 |3 → 50
|13–20 |50 |50
|20–25 |50 → 97 |50 →3
|25–30 |97 |3
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Гемцитабин – 1 (около 8
мин); примесь А – около 0,4; примесь B – около 0,7.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _разрешение_ (_R~S~_) между пиками примеси B и гемцитабина должно быть
не менее 8,0.

На хроматограмме стандартного раствора _относительное стандартное
отклонение_ площади пика гемцитабина и примеси A должно быть не более
2,0 % (6 введений).

Содержание каждой из примесей A, B в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0081_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика каждой из примесей A, B на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика каждой из примесей A, B на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца каждой из примесей A, B мг; +
	_P_	–	содержание примеси A, B в фармакопейном стандартном образце примеси A, B, соответственно,%.



Содержание любой примеси в процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0081_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика гемцитабина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, мг; +
	_P_	–	содержание гемцитабина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце гемцитабина гидрохлорида,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примеси А, В − не более 0,1 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади
основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности
хроматографической системы (менее 0,05 %).

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины.* Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг гемцитабина
гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца_ _гемцитабина гидрохлорида._ В мерную
колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, растворяют в воде и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _разрешение_ (_R~S~_) между пиками примеси B и гемцитабина должно быть
не менее 8,0;

- _фактор ассиметрии_ _пика_ (_A~S~_) гемцитабина должен быть не более
1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина гидрохлорида:

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика гемцитабина должно
быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание гемцитабина гидрохлорида C~9~H~11~F~2~N~3~O~4~·HCl в
субстанции в процентах (_X_) в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0081_4.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика гемцитабина гидрохлорида на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика гемцитабина гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина гидрохлорида; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, мг; +
	_W_	–	содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_P_	–	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце гемцитабина гидрохлорида,%.


[discrete]
===== Хранение

В плотно укупоренной упаковке.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


