[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0429 Канамицина сульфат кислый

*Канамицин* +
*Kanamycini sulfas acidus* 

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0429_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

_O_-3-Амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→6)-_O_-[6-амино-6-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина
сульфат.

Канамицина сульфат кислый является производной формой канамицина
моносульфата, полученный путём биосинтеза с добавлением серной кислоты.
Активность не менее 670 ЕД/мг в пересчёте на сухое вещество.

Один микрограмм химически чистого канамицина соответствует специфической
активности, равной одной единице действия (ЕД).

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый порошок.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость*. Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в
спирте 96 % и ацетоне.

[discrete]
===== Идентификация

_1. ТСХ_ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

[none]
* _Пластинка_. ТСХ пластинка со слоем силикагеля~.~
* _Предварительная подготовка пластинки_. Пластинку выдерживают при
температуре 110 °С в течение 1 ч.
* _Подвижная фаза (ПФ)_. Калия дигидрофосфата раствор 0,5 М.
* _Испытуемый раствор_. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды.
* _Раствор стандартного образца канамицина моносульфата_. Растворяют 10 мг
фармакопейного стандартного образца канамицина моносульфата в 10 мл
воды.
* _Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы_. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца
канамицина моносульфата, 10 мг фармакопейного стандартного образца
стрептомицина сульфата и 10 мг фармакопейного стандартного образца
неомицина сульфата в 10 мл воды.
* _Реактив для детектирования._ Смешивают равные объёмы
1,3-дигидроксинафталина раствора 0,2 % и серной кислоты раствора 50 %.
* На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора,
раствора стандартного образца канамицина моносульфата и раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы.
Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 15 мин,
помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда
фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её
вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха до удаления следов
растворителей, опрыскивают раствором для детектирования и нагревают при
температуре 150 °С в течение 5–10 мин. Пластинку охлаждают и
просматривают в видимом свете.
* _Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы должны
обнаруживаться 3 чётко разделённые зоны адсорбции.
* _Результат._ Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого
раствора по положению, окраске и величине должна соответствовать
основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца
канамицина моносульфата.

_2. Качественная реакция_. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды,
прибавляют 1 мл нингидрина раствора 1 % и нагревают на водяной бане;
должно появиться фиолетовое окрашивание.

_3._ _Качественная реакция_. Субстанция должна давать характерную
реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

*Температура плавления производного.* Растворяют 0,5 г субстанции в
10 мл воды, прибавляют 10 мл пикриновой кислоты раствора 1 %, при
необходимости инициируют кристаллизацию трением стеклянной палочкой о
стенки сосуда и оставляют стоять для образования осадка. Выпавший осадок
отфильтровывают, промывают 20 мл воды и сушат при температуре 100 °С.
Температура плавления около 235 °С (с разложением, ОФС «Температура
плавления»).

*Удельное вращение*. От +112 до +123 в пересчёте на сухое вещество (1 %
раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора*. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y~7~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

*рН раствора*. От 6,5 до 8,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Канамицин В*. Не более 4 %. Испытание проводят методом ТСХ в условиях
испытания «Идентификация 1. Тонкослойная хроматография», со следующими
изменениями.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,10 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
водой до метки.

_Раствор стандартного образца канамицина В сульфата._ В мерную колбу
вместимостью 20 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца
канамицина B сульфата
(_O_-3-амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→6)-_O_-[2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина
сульфат (1:1) [29701-07-3]), растворяют в воде и доводят объём раствора
водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 4 мкл испытуемого раствора (20 мкг)
и раствора стандартного образца канамицина В сульфата (0,8 мкг).
Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ
и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около
80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в
токе тёплого воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают
нингидрина и олова(II) хлорида реактивом (1) и выдерживают при
температуре 110 °С в течение 15 мин. Пластинку охлаждают и просматривают
в видимом свете.

Зона адсорбции канамицина В на хроматограмме испытуемого раствора по
совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать
аналогичную зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного
образца.

*Потеря в массе при высушивании*. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 3). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в
вакуум-сушильном шкафу при температуре 60 °С и остаточном давлении не
превышающем 0,67 кПа (5 мм рт. ст.) в течение 3 ч.

*Сульфатная зола*. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфаты*. От 23,0 до 26,0 % в пересчёте на сухое вещество.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,175 г (точная навеска)
субстанции, растворяют в воде, тщательно перемешивают, рН полученного
раствора доводят до значения 11 (потенциометрически) аммиака раствором
13,5 М. К полученному раствору прибавляют 10 мл 0,1 М раствора бария
хлорида и около 0,5 мг индикатора фталеинового пурпурного. Избыток
хлорида бария титруют 0,1 М раствором эдетата натрия до начала изменения
окраски. Далее прибавляют 50 мл спирта 96 % и продолжают титрование до
исчезновения фиолетово-синей окраски раствора.

1 мл 0,1 М раствора бария хлорида соответствует 9,606 мг сульфатов
SO~4~.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители*. В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

{asterisk}{asterisk} *Аномальная токсичность*. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС
«Аномальная токсичность»). Тест-доза – 1,8 мг канамицина в 0,5 мл воды
для инъекций на мышь. Скорость введения – 0,1 мл/с. Срок наблюдения –
48 ч.

{asterisk}{asterisk} *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг канамицина (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»).

{asterisk}{asterisk} *Испытание на депрессорные вещества*. Субстанция не должна обладать
депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»).
Тест-доза – 10 мг канамицина в 1 мл воды для инъекций на 1 кг массы
животного.

{asterisk}{asterisk} *Стерильность*. Субстанция должна быть стерильной
(ОФС «Стерильность»).

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение антимикробной
активности антибиотиков методом диффузии в агар». В качестве
стандартного образца используют фармакопейный стандартный образец
канамицина моносульфата.

[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренном контейнере.

+*+ Приводится для информации.

{asterisk}{asterisk} Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


