[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС.2.1.0056 Ампициллин натрия

*Ампициллин* +
*Ampicillinum natricum* 

*Взамен ФС.2.1.0056.18*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0056_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(2__S__,5__R__,6__R__)-6-[(2__R__)-2-Амино-2-фенилацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксилат
натрия.

Cодержит не менее 91,0 % и не более 102,0 % ампициллина натрия
C~16~H~18~N~3~NaO~4~S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость.* Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %,
умеренно растворим в ацетоне.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца, снятый в диске с
калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1^, по положению полос
поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного
образца ампициллина натрия.

. _ВЭЖХ_. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика ампициллина на
хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина натрия (раздел
«Количественное определение»).

. _Качественная реакция._ Субстанция должна давать характерную реакцию
А или Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

Удельное вращение. От +258 до +287 в пересчёте на безводное вещество
(0,25 % раствор субстанции в калия гидрофталата растворе 0,4 %, ОФС
«Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора*. Опалесценция свежеприготовленных испытуемого
раствора А и испытуемого раствора Б не должна превышать опалесценцию
эталона сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции
(мутности) жидкостей»).

_Испытуемый раствор А_. В коническую колбу помещают 1,0 г субстанции и
медленно при постоянном помешивании добавляют 10 мл хлористоводородной
кислоты раствор 1 М.

_Испытуемый раствор Б._ Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды.

*Оптическая плотность.* Оптическая плотность 10 % раствора субстанции в
воде, измеренная при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см
(по сравнению с водой), не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия
в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН. От 8,0 до 10,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие ампициллин и его примеси, используют
свежеприготовленными или хранят при температуре 4 ^о^С не более 1 суток.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
0,5 мл уксусной кислоты разведённой 12 %, 50 мл калия дигидрофосфата
раствора 0,2 М, 50 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до
метки.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
0,5 мл уксусной кислоты разведённой 12 %, 50 мл калия дигидрофосфата
раствора 0,2 М, 400 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до
метки.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 31 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца ампициллина натрия_. В мерную колбу
вместимостью 50 мл помещают 27 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца ампициллина натрия, растворяют в ПФА и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл
раствора стандартного образца ампициллина натрия и доводят объём
раствора ПФА до метки.

_Раствор для идентификации_. Раствор 0,2 г субстанции в 1 мл воды
нагревают в течение 1 ч при температуре 60 °С. В мерную колбу
вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём
раствора ПФА до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг фармакопейного
стандартного образца цефрадина, растворяют в ПФА и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки. Смешивают 5,0 мл полученного
раствора с 5,0 мл раствора стандартного образца ампициллина натрия.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы_. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора и
доводят объем раствора ПФА до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; | |
|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |50 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0 – t~R~ |85 |15

|t~R~ – (t~R~+30) |85 → 0 |15 → 100

|(t~R~+30) – (t~R~+45) |0 |100

|(t~R~+45) – (t~R~+60) |85 |15

|(t~R~+60) – (t~R~+70) |85 |15

3+<|t~R~ – время удерживания ампициллина, определённое по хроматограмме
раствора сравнения. 
|===

Уравновешивают колонку при ПФБ–ПФА 15:85 в течение не менее 1 ч.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор сравнения (ПФБ–ПФА
15:85), раствор для идентификации и испытуемый раствор (градиентный
режим).

_Относительное время удерживания соединений._ Ампициллин – 1 (около
11 мин); ампициллина димер – 2,8.

_Идентификация примесей_. Для идентификации пиков примесей используют
относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для
идентификации.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R)_ между пиками ампициллина и цефрадина должно быть не
менее 3,0. При необходимости корректируют соотношение подвижных фаз.

_Допустимое содержание примесей_. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика ампициллина димера не должна превышать 4,5 площади пика
ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную
площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более
2,0 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика ампициллина на
хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической
системы (менее 0,1 %).

*__N,N__-Диметиланилин.* Не более 0,002 % +
(ОФС «_N,N_-Диметиланилина»).

*2-Этилгексановая кислота.* Не более 0,8 % м/м +
(ОФС «2-Этилгексановой кислоты»).

*Вода.* Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

{asterisk}{asterisk} *Аномальная токсичность.* Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС
«Аномальная токсичность»). Тест-доза – 40 мг ампициллина в 0,5 мл воды
для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

{asterisk}{asterisk} *Бактериальные эндотоксины.* Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг ампициллина (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»).

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

{asterisk}{asterisk} *Стерильность.* Субстанция должна быть стерильной
(ОФС «Стерильность»).

[discrete]
===== Количественное определение

Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

Корректируют соотношение подвижных фаз при необходимости.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца
ампициллина натрия.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца ампициллина натрия _относительное стандартное
отклонение_ площади пика ампициллина должно быть не более 1,0 % (6
определений).

Содержание ампициллина натрия C~16~H~18~N~3~NaO~4~S в субстанции в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество в процентах (_X_) вычисляют по
формуле:


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0056_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина натрия; +
	_а~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца ампициллина натрия, мг; +
	P	-	содержание ампициллина натрия в фармакопейном стандартном образце ампициллина натрия,%; +
	W	-	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.

{asterisk}{asterisk} Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


