
[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


==== ФС 2.1.0328 Этопозид (Etoposidum)

*Вводится впервые*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0328_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(5__R__,5a__R__,8a__R__,9__S__)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-({4,6-_O_-[(1__R__)-этан-1,1-диил]-β-D-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-_d_][1,3]диоксол-6(5a__H__)-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % этопозида в пересчёте на
безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый кристаллический порошок.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость*. Умеренно растворим в метаноле, мало растворим в спирте
96 %, практически нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца этопозида.

. _ВЭЖХ_. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика этопозида на
хроматограмме раствора стандартного образца этопозида (раздел
«Количественное определение»).

. _Качественная реакция._ В пробирке растворяют 5 мг субстанции в 5 мл
уксусной кислоты ледяной и прибавляют 50 мкл железа(III) хлорида
раствора 10,5 %, перемешивают и осторожно прибавляют 2 мл серной кислоты
концентрированной, избегая смешивания двух слоёв. Оставляют примерно на
30 мин; на поверхности раздела должно появиться кольцо от розового до
красно-коричневого цвета, верхний слой должен быть жёлтым.

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От –106 до –114 в пересчёте на безводное вещество
(0,5 % раствор субстанции в смеси метанол—метиленхлорид 1:9, ОФС
«Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,6 г субстанции в 20 мл смеси
метанол—метиленхлорид 1:9 должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и
степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y~6~или BY~6~ (ОФС
«Степень окраски жидкостей», метод 2).

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Муравьиная кислота безводная—триэтиламин—вода
1:1:998.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)_. Муравьиная кислота
безводная—триэтиламин—ацетонитрил 1:1:998.

_Растворитель._ ПФА—ПФБ 50:50.

Растворы используют свежеприготовленными.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._
Растворяют 4 мг фармакопейного стандартного образца этопозида для
проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси В,
С, D, Е, N и О в 1 мл растворителя.

*Примечание*

Примесь В: + 
(5__R__,5a__S__,8a__R__,9__S__)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-({4,6-_O_-[(1__R__)-этан-1,1-диил]-β-D-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-_d_][1,3]диоксол-6(5a__H__)-он +
[100007-56-5].

Примесь С: +
(5__R__,5a__R__,8a__R__,9__S__)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-({4,6-_O_-[(1__R__)-этан-1,1-диил]-α-D-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-_d_][1,3]диоксол-6(5a__H__)-он +
[100007-53-2].

Примесь D: +
(5__R__,5a__R__,8a__R__,9__S__)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-(β-D-глюкопиранозилокси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-_d_][1,3]диоксол-6(5a__H__)-он +
[23363-35-1].

Примесь Е: +
(5__R__,5a__R__,8a__R__,9__S__)-9-Гидрокси-5-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-_d_][1,3]диоксол-6(5a__H__)-он +
[6559-91-7].

Примесь N: +
(5__R__,5a__R__,8a__R__,9__S__)-5-(4-{[(5__R__,5a__R__,8a__R__,9__S__)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-6-оксо-5,5a,6,8,8a,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-_d_][1,3]диоксол-9-ил]окси}-3,5-диметоксифенил)-9-({4,6-_O_-[(1__R__)-этан-1,1-диил]-β-D-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-_d_][1,3]диоксол-6(5a__H__)-он.

Примесь О: +
(5__R__,5a__R__,8a__R__,9__S__)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-({2,3-ди-_O_-(дихлорацетил)-4,6-_O_-[(1__R__)-этан-1,1-диил]-β-L-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-_d_][1,3]диоксол-6(5__H__)-он.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный,
для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |40 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 285 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–7 |75 |25
|7–23 |75 → 27 |25 → 73
|23–30 |27 → 75 |73 → 25
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Этопозид – 1 (около
5 мин); примесь D – около 0,4; примесь Е – около 0,8; примесь С – около
1,1; примесь В – около 1,2; примесь N – около 3,1; примесь О – около
4,2.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков используют
относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для
проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму,
прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу этопозида для проверки
пригодности системы.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _отношение максимум/минимум (p/v)_ между пиками примеси С и этопозида
должно быть не менее 2,0;

- _отношение максимум/минимум (p/v)_ между пиками примеси В и примеси С
должно быть не менее 3,0.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площадь пика примеси
О умножают на 1,7.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B, С, D, E, N не должна более чем в 2
раза превышать площадь пика этопозида на хроматограмме раствора
сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси О не должна превышать 1,5 площади основного пика
этопозида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика
этопозида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную
площадь пика этопозида на хроматограмме раствора сравнения (не более
1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика
этопозида на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

*Вода.* Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

{asterisk}{asterisk} *Бактериальные эндотоксины.* Не более 0,8 ЕЭ на 1 мг этопозида (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный
раствор субстанции в спирте 96 % c концентрацией 10 мг/мл.

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора до метки.

_Раствор стандартного образца этопозида._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца этопозида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора до
метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца этопозида и испытуемый
раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца этопозида _относительное стандартное отклонение_
площади пика этопозида должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание этопозида C~29~H~32~O~13~ в субстанции в пересчёте на
безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество
в процентах (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0328_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика этопозида на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика этопозида на хроматограмме раствора стандартного образца этопозида; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца этопозида, мг; +
	_P_	–	содержание этопозида в фармакопейном стандартном образце этопозида,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.



[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.

{asterisk}{asterisk} Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.
  

[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


