[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
 


==== ФС.2.1.0540 Орлистат (Orlistatum)


*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0540_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

[(2__S__)-1-[(2__S__,3__S__)-3-Гексил-4-оксооксетан-2-ил]тридекан-2-ил][(2__S__)-4-метил-2-формамидопентаноат].

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % орлистата C~29~H~53~NO~5~ в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Растворимость.* Легко растворим в этаноле и метаноле, практически
нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^-1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца орлистата.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика орлистата на
хроматограмме раствора стандартного образца орлистата (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От –48 до –51 в пересчёте на безводное вещество
(3 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

*Родственные примеси.*

*_1. Примесь 1._* Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная
хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

_Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Этилацетат—толуол 20:80.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в ацетоне и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси 1._ В мерную колбу вместимостью
20 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
примеси 1
((3__S__,4__S__)-3-гексил-4-[(2__R__)-2-гидрокситридецил]оксетан-2-он
[104872-06-2]), растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы_. В мерную
колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл раствора стандартного образца
примеси 1 и доводят объём раствора ацетоном до метки.

_Реактив для детектирования._ В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 2,5 г фосфорномолибденовой кислоты, 1 г церия сульфата,
прибавляют метанол, обрабатывают ультразвуком в течение 30 мин, и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора
(500 мкг), раствора стандартного образца примеси 1 (1 мкг) и раствора
для проверки пригодности хроматографической системы (0,5 мкг). Пластинку
с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно
насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда
фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её
вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают
реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при
температуре 120 °С в течение 30 мин и просматривают в видимом свете.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы должна обнаруживаться
чёткая зона адсорбции примеси 1.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора
зона адсорбции примеси 1 по совокупности величины и интенсивности
окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора
стандартного образца примеси 1 (не более 0,2 %).

*_2. Примесь 2_*. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая
хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в метиленхлориде и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси 2_. В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
примеси 2, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мл
полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворе стандартного образца
примеси 2 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь 2: ди(пропан-2-ил)гидразин-1,2-дикарбоксилат [19740-72-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===
|Колонка 2+|капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем
поли[метил(95)фенил(5)]силоксана, 0,25 мкм; |
|Детектор |пламенно-ионизационный; | |

|Газ-носитель |гелий для хроматографии; | |

|Скорость потока |Газ-носитель |1 мл/мин, |

| |Водород |35 мл/мин, |

| |Воздух |350 мл/мин; |

|Деление потока |20:1; | |

|Объём пробы |2 мкл. | |
|===

_Температурная программа_

[cols="34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
| |Время, мин |Температура, °C
|Колонка |0–30 |50 → 170
| |30–34 |170 → 300
| |34–64 |300
|Инжектор | |270
|Детектор | |280
|===

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси 2, раствор
сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Примесь 2 – около 26 мин.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца примеси 2:

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика примеси 2 должно
быть не более 10,0 % (6 введений).

Содержание примеси 2 в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0540_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика примеси 2 на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~2~_	–	площадь пика примеси 2 на хроматограмме раствора сравнения; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца примеси 2, мг; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~2~_	–	навеска субстанции, взятая для приготовления раствора сравнения, мг; +
	_P_	–	содержание орлистата в фармакопейном стандартном образце орлистата,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 2 – не более 0,05 %.

*_3. Примесь 4 и 8._* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытуемый раствор и раствор стандартного образца орлистата хранят при
температуре 8 °С.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Вода—метанол 170:830.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ацетонитриле, обрабатывают
ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца орлистата._ В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца орлистата, растворяют в ацетонитриле, обрабатывают ультразвуком
в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси 4._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 2,4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца примеси 4, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца орлистата, растворяют в ацетонитриле, обрабатывают
ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1 мл
раствора стандартного образца примеси 4 и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь 4: +
[(3__S__,4__R__,6__S__)-3-гексил-2-оксо-6-ундецилтетрагидро-2__H__-пиран-4-ил][(2__S__)-4-метил-2-формамидопентаноат] +
[130793-27-0].

Примесь 8: +
[(7__S__,8__S__,10__S__)-8-гидрокси-7-[(1__R__)-1-фенилэтил)карбамоил]генэйкозан-10-ил][(2__S__,3__S__)-3-метил-2-формамидопентаноат].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,0 мм силикагель октилсилильный для хроматографии,
4 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Температура образца |5 °С; | |

|Скорость потока |0,6 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 205 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|1,5-кратное от времени удерживания пика
орлистата. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор стандартного образца примеси 4, раствор стандартного
образца орлистата и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Орлистат – 1 (около
40 мин); примесь 4 – около 0,94; примесь 8 – около 1,25.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси 4 используют
относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора
стандартного образца примеси 4. Для идентификации пика примеси 8
используют относительное время удерживания соединений.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы _отношение сигнал/шум_
(_S/N_) для пика примеси 4 должно быть не менее 3.

На хроматограмме раствора стандартного образца орлистата _относительное
стандартное отклонение_ площади пика орлистата должно быть не более
2,0 % (6 введений);

_Поправочные коэффициенты_. Для расчёта содержания площадь пика примеси
8 умножают на 0,23.

Содержание примеси 4 и 8 в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0540_3.png[]
|===

где	S~1~	–	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; +
	S~0~	–	площадь пика основного вещества на хроматограмме раствора стандартного образца орлистата; +
	а~1~	–	навеска субстанции, мг; +
	а~0~	–	навеска фармакопейного стандартного образца орлистата, мг; +
	P	–	содержание орлистата в фармакопейном стандартном образце орлистата,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 4 – не более 0,2 %;

- примесь 8 – не более 0,1 %.

*_4. Примесь 5._* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и хранят в защищённом от
света месте.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Растворяют 4,1 г натрия ацетата и 40 мг ЭДТА в
950 мл воды, доводят значение pH натрия гидроксида раствором 0,1 М до
7,2, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу
вместимостью 1000 мл, доводят объём раствора водой до метки и прибавляют
2,5 мл тетрагидрофурана.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Растворяют 2,7 г натрия ацетата и 40 мг ЭДТА в
200 мл воды, доводят значение pH натрия гидроксида раствором 0,1 М до
7,2, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу
вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

_Дериватизирующий реагент._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
0,5 г (точная навеска) фталевого альдегида и 0,5 мл меркаптопропионовой
кислоты, прибавляют 40 мл боратного буферного раствора рН 10,4,
обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу с притёртой крышкой вместимостью
20 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 10 мл
натрия гидроксида раствора 4 М, герметично закрывают, выдерживают на
кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают до комнатной температуры и
перемешивают. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мл
полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают
1,0 мл полученного раствора, 4 мл боратного буферного раствора рН 10,4 и
1 мл дериватизирующего реагента.

_Раствор стандартного образца примеси 5._ В мерную колбу с притёртой
крышкой вместимостью 20 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца примеси 5, прибавляют 10 м натрия гидроксида
раствора 4 М, герметично закрывают, выдерживают на кипящей водяной бане
в течение 1 ч, охлаждают до комнатной температуры и перемешивают. В
мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мл полученного раствора и
доводят объём раствора водой до метки. Смешивают 1 мл полученного
раствора, 4 мл боратного буферного раствора рН 10,4 и 1 мл
дериватизирующего реагента.

_Контрольный раствор._ В мерную колбу с притёртой крышкой помещают 10 мл
натрия гидроксида раствора 4 М, герметично закрывают, выдерживают на
кипящей водяной бане в течение 1 ч и охлаждают до комнатной температуры.
В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мл полученного раствора и
доводят объём раствора водой до метки. Смешивают 1,0 мл полученного
раствора, 4 мл боратного буферного раствора рН 10,4 и 1 мл
дериватизирующего реагента.

*Примечание*

Примесь 5: +
[(2__S__)-1-[(2__S__,3__S__)-3-гексил-4-оксооксетан-2-ил]тридекан-2-ил][(2__S__,3__S__)-3-метил-2-формамидопентаноат]
[1072902-75-0].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Предколонка 2+|20 × 2,1 мм силикагель октадецилсилильный для
хроматографии, 5 мкм; |

|Колонка 2+|200 × 2,1 мм силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Температура образца |5 °С; | |

|Скорость потока |0,5 мл/мин; | |

|Детектор 2+|флуорометрический, волна возбуждения – 340 нм; волна
испускания – 450 нм; |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–20 |96,7 → 60 |3,3 → 40
|20–24 |60 → 0 |40 → 100
|24–38 |0 |100
|38–38,1 |0 → 96,7 |100 → 3,3
|38,1–45 |96,7 |3,3
|===

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси 5, испытуемый
раствор и контрольный раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Примесь 5 – около 15 мин.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси 5 используют
относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора
стандартного образца примеси 5.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца примеси 5 _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_)
примеси 5 должен быть не более 2,0.

Содержание примеси 5 в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0540_4.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика примеси 5 на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика примеси 5 на хроматограмме раствора стандартного образца примеси 5; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца примеси 5, мг; +
	_P_	–	содержание примеси 5 в фармакопейном стандартном образце примеси 5,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 5 – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика примеси
5 на хроматограмме контрольного раствора.

*_5. Другие примеси._* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытуемый раствор и раствор фармакопейного стандартного образца
орлистата хранят при температуре 5 °С.

_Подвижная фаза_. Фосфорная кислота концентрированная—вода—ацетонитрил
0,05:140:860.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца орлистата._ В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
орлистата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем
до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мг фармакопейного стандартного
образца примеси 3, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл
полученного раствора, 2 мл раствора стандартного образца орлистата и
доводят объём раствора ПФ до метки.

*Примечание*

Примесь 3: трифенил-λ^5^-фосфанон [791-28-6].

Примесь 6: (2__S__)-4-метил-2-формамидопентановая кислота [6113-61-7].

Примесь 7:
(2__S__,3__R__,5__S__)-2-гексил-3-гидрокси‐5‐{[(2__S__)‐2‐формамидо‐

4-метилпентаноил]окси}гексадекановая кислота [130793-28-1].

Примесь 9:
[(2__S__)-1-[(2__S__,3__S__)-3-гексил-4-оксооксетан-2-ил]тридекан-2-ил][(2__R__)-4-метил-2-формамидопентаноат]
[104872-28-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 3,9 мм силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
4 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Температура образца |5 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 195 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|1,5-кратное от времени удерживания пика
орлистата. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор стандартного образца орлистата и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Орлистат – 1 (около
10,5 мин); примесь 6 – около 0,10; примесь 3 – около 0,13; примесь 7 –
около 0,44; примесь 4 – около 0,90; примесь 8 – около 0,90; примесь 9 –
около 1,18.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси 3 используют
относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для
проверки пригодности хроматографической системы. Для идентификации пиков
примесей 4, 6, 7 и 8 используют относительное время удерживания
соединений.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы _отношение сигнал/шум_
(_S/N_) для пика примеси 3 должно быть не менее 3.

_Поправочные коэффициенты_. Для расчёта содержания примесей площади
пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные
коэффициенты: примесь 6 – 0,25; примесь 3 – 0,03.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0540_5.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика орлистата на хроматограмме раствора стандартного образца орлистата; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг;   +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца орлистата, мг; +
	_P_	–	содержание орлистата в фармакопейном стандартном образце орлистата,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 3 – не более 0,05 %;

- примесь 6 – не более 0,2 %;

- примесь 7 – не более 0,2 %;

- примесь 9 – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

*Вода.* Не более 0,2 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные
примеси. Другие примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца орлистата и испытуемый
раствор.

Содержание орлистата C~29~H~53~NO~5~ в субстанции в пересчёте на
безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество
в процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0540_6.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика орлистата на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика основного вещества на хроматограмме раствора стандартного образца орлистата; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца орлистата, мг; +
	_P_	–	содержание орлистата в фармакопейном стандартном образце орлистата,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В плотно укупоренной упаковке, при температуре от 2 до 8 °С.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


