[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

  
==== ФС.2.1.0103 Инозин (Inosinum)

*Взамен ФС.2.1.0103.18*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0103_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

9-(β-D-Рибофуранозил)-1,9-дигидро-6__H__-пурин-6-он.

Содержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % C~10~H~12~N~4~O~5~ в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Растворимость*. Умеренно или мало растворим в воде, очень мало
растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия._ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1^ по положению полос поглощения
должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца
инозина.

. _ВЭЖХ_. (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Время
удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно
соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме
раствора стандартного образца инозина (раздел «Количественное
определение»).

. _Качественная реакция._ Растворяют 0,1 г субстанции в 20 мл воды. К
2 мл полученного раствора прибавляют 5 мл железа (III) хлорида 0,1 %
раствора в хлористоводородной кислоте концентрированной и 5 мл орцина
раствора 10 % в спирте 96 %. Смесь выдерживают в течение 20 мин в
кипящей водяной бане; должно появиться зелёное окрашивание.

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора*. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

*Удельное вращение*. От –47 до –54 в пересчёте на сухое вещество (1 %
раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

*рН раствора*. От 4,8 до 5,8 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза (ПФ)_. Растворяют 2,72 г калия дигидрофосфата в 700 мл
воды и доводят значение рН калия гидроксида раствором 10 % до 5,55,
количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью
1000 мл и доводят объём раствора водой до метки, перемешивают, фильтруют
и дегазируют.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ
до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы_. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и
доводят объём раствора ПФ до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 50 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца инозина, 50 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В и 50 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А,
растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу
вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора ПФ до метки.

*Примечание*

Примесь А (гуанозин):
2-амино-9-(β-D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6__H__-пурин-6-он [118-00-3].

Примесь В (гипоксантин): 1,7-Дигидро-6__Н__-пурин-6-он.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|300 × 2,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
10 мкм; |

|Температура колонки |50 °С; | |

|Скорость потока |0,6 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|2-кратное от времени удерживания основного
пика. | 
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор сравнения, стандартный раствор и
испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Инозин – 1 (около 10 мин);
примесь В – около 0,5; примесь А – около 1,1.

_Идентификация примесей_. Для идентификации пиков примесей А и В
используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму
стандартного раствора.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
сравнения:

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~S~_) инозина должен быть не более 1,2;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика инозина должно
быть не более 5,0 % (6 введений);

На хроматограмме стандартного раствора:

- _разрешение_ _(R~S~)_ между пиками инозина и примеси А должно быть не
менее 1,25;

- _разрешение_ _(R~S~)_ между пиками примеси В и инозина должно быть не
менее 1,25.

Содержание примеси А или примеси В в субстанции в процентах (_Х_)
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0103_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика примеси А или примеси В на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика примеси А или примеси В на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца примеси А или фармакопейного стандартного образца примеси В, мг; +
	_P_	-	содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце индапамида,%.


_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого
раствора:

- сумма площадей пиков примесей А и В не должна превышать площадь пика
инозина на хроматограмме стандартного раствора (не более 2,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,5 площади
пика инозина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади
основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

*Вода*. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после
сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

*Железо*. Не более 0,0015 %. Определение проводят в соответствии с
требованиями ОФС «Железо», в зольном остатке, полученном после сжигания
2,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола», с использованием эталонного
раствора 3 мкг/мл).

*Медь*. В фарфоровом тигле прокаливают 1,5 г субстанции, остаток
растворяют в 5 мл азотной кислоты, осторожно разбавляют водой до 15 мл и
фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 5 мл аммиака раствора 10 % и
фильтруют; фильтрат не должен окрашиваться в голубой цвет.

*Остаточные органические растворители*. В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

+*+ *Аномальная токсичность*. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС
«Аномальная токсичность»). Тест-доза – 4 мг субстанции в 0,5 мл
N-метилглюкамина раствора 0,8 % на мышь, внутривенно. Срок наблюдения
– 48 ч.

+*+ *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,29 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 20 мг/мл.
Для проведения испытания препарат разводят не менее чем в 60 раз.

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца инозина._ В мерную колбу вместимостью
25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца инозина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца и раствор сравнения.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора
стандартного образца инозина:

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика инозина должно
быть не более 0,73 % (6 введений);

- _фактор ассиметрии_ пика (_As)_ инозина должен быть не более 1,5.

Содержание инозина C~10~H~12~N~4~O~5~ в субстанции в процентах (_Х_) в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0103_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика инозина на хроматограмме раствора сравнения; +
	_S~0_	–	площадь пика инозина на хроматограмме раствора стандартного образца инозина; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца инозина, мг; +
	_P_	–	содержание инозина в фармакопейном стандартном образце инозина,%; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.

+*+ Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


