[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


===== ОФС.1.2.1.1.0014 Турбидиметрия

*Вводится впервые*
 

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод
турбидиметрии.

====== Область применения

Турбидиметрический метод используют для определения степени мутности
различных лекарственных форм (суспензий, эмульсий, экстрактов, растворов
и др.) и коллоидной устойчивости белков.

Также метод применяют для количественного определения лекарственных
средств или биомаркеров в жидкостях организма, таких как сыворотка,
плазма или моча, а также при проведении иммунологических исследований с
целью регистрации образования иммунных комплексов антиген-антитело,
сопровождающихся образованием соответствующего преципитата и др.

Турбидиметрический метод применим, главным образом, для определения
степени мутности в образцах, не содержащих окрашенных компонентов, а
также представляющих собой устойчивые суспензии.

====== Метод

Метод основан на линейном измерении ослабления интенсивности светового
потока, прошедшего через раствор, содержащий взвешенные частицы,
вследствие поглощения и рассеивания светового потока.

*_Требования к методу турбидиметрии_*

. Применяют сильноразбавленные растворы. Полученные взвеси должны иметь
очень низкую растворимость.

. Точность результата при анализе суспензий зависит от методики
получения суспензий и от воспроизводимости их оптических свойств. На это
влияют следующие факторы:
[none]
** 1) концентрация ионов, образующих осадок;
** 2) отношение между концентрациями смешиваемых растворов;
** 3) скорость смешивания;
** 4) порядок смешивания;
** 5) время, требуемое для получения максимальной мутности;
** 6) стабильность дисперсности;
** 7) присутствие посторонних веществ;
** 8) температура;
** 9) наличие защитных коллоидов.

[arabic,start=3]
. Взвеси должны быть устойчивы во времени. Для увеличения стойкости
взвеси часто применяют защитные коллоиды.

Таким образом, стандартизация условий подготовки растворов к
турбидиметрическому определению необходима для получения правильных
результатов.

*_Оборудование_*

В качестве прибора используют турбидиметры, нефелометры, мутномеры,
спектрофотометры и т.п. Если растворитель и рассеивающие частицы
бесцветны, то максимальная чувствительность достигается при
использовании излучения голубой или ближней ультрафиолетовой области.
Если системы окрашены, то оптимальную длину волны подбирают
экспериментально.

[[im_ofs_1.2.1.1.0014_1]]
[caption="Рисунок 1. "]
.Схема турбидиметрического анализа
image::im_ofs_1.2.1.1.0014_1.png[]



При турбидиметрических исследованиях интенсивность прошедшего светового
потока _I~t~_ может быть определена по уравнению:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_ofs_1.2.1.1.0014_2.png[]
|===


где	_I~t~_	–	интенсивность светового потока, прошедшего через раствор; +
_I~0~_	–	интенсивность падающего светового потока; +
_α, k_	–	константы, зависящие от природы суспензии и метода измерения; +
_C_	–	концентрация рассеивающих частиц в растворе; +
_b_	–	толщина поглощающего слоя раствора; +
_d_	–	средний диаметр рассеивающих частиц;
_λ_	–	длина волны.


====== Относительная турбидиметрия

Определение опалесценции (мутности) как бесцветных, так и окрашенных
жидкостей проводят методом относительной турбидиметрии. Метод
относительной турбидиметрии сочетает принципы турбидиметрии и
нефелометрии.

Окрашенные жидкости имеют свойство понижать величину мутности, так как
при прохождении через них падающего, и рассеянного света происходит его
ослабление. Эффект настолько выражен, что даже для образцов с умеренной
окраской, обычные приборы для измерения мутности использовать нельзя.

В относительной турбидиметрии определяют отношение интенсивности
прошедшего света к интенсивности рассеянного света. Эта процедура
компенсирует влияние окрашивания испытуемого образца. В приборах в
качестве источника света используют вольфрамовую лампу со спектральной
чувствительностью около 550 нм, работающую при температуре нити 2700 К.
В качестве альтернативы для окрашенных растворов можно использовать
инфракрасный светоизлучающий диод (ИК-светодиод), имеющий максимум
излучения при 860 нм с шириной спектральной полосы 60 нм в качестве
источника света прибора. Допускается использование других подходящих
источников света.

В качестве детекторов используют кремниевые фотодиоды и фотоумножители.
Свет, рассеянный под углом 90±2,5°, измеряется первичным детектором.
Другие детекторы измеряют обратное и прямое рассеяние (отраженный свет),
а также проходящий свет.

Используемые приборы должны быть откалиброваны по эталонам мутности и
могут автоматически измерять мутность. Полученные значения выражаются в
относительных единицах NTU (Nephelometric Turbidity Units _–_
нефелометрические единицы мутности). Измерение мутности эталонов
сравнения I-IV с помощью относительной турбидиметрии показывает линейную
зависимость между концентрацией и значениями NTU. Линейность достигается
путём вычисления отношения измерения рассеянного света под углом 90° к
сумме измерения прямого рассеянного света и измерения проходящего света.
Эталоны суспензии I–IV могут использоваться для калибровки. Допускается
для калибровки приборов использование эталонов с другими значениями
величин NTU или в других единицах мутности, согласно указаниям в
методике испытания.

[[tab_ofs_1.2.1.1.0014_1]]
[caption="Таблица 1. "]
.Эталоны для калибровки приборов

[cols="^52%,^48%",options="header",]
|===
| |*Значения величин NTU*
|Эталон сравнения I |3
|Эталон сравнения II |6
|Эталон сравнения III |18
|Эталон сравнения IV |30
|Основной эталон |60
|Исходный эталон |4000
|===

*_Технические условия пригодности прибора_*

_Единица измерения NTU_ основана на мутности первичного стандартного
образца формазина. Также могут использоваться FTU (Formazin Turbidity
Units – единицы мутности по формазину) или FNU (Formazin Nephelometry
Units – формазиновые нефелометрические единицы), которые эквивалентны
NTU при низких значениях мутности (до 40 NTU).

_Диапазон измерений_: 0,01–1100 NTU.

_Разрешение_: 0,01 NTU в диапазоне 0–10 NTU; 0,1 NTU в диапазоне от
10–100 NTU; 1 NTU в диапазоне более 100 NTU. Прибор должен быть
откалиброван с помощью эталонов сравнения.

_Точность_: в диапазоне 0–10 NTU: ±(2% показания прибора + 0,01) NTU; в
диапазоне 10–1000 NTU: ±5 %.

_Повторяемость_: в диапазоне 1–10 NTU: ±0,01 NTU; в диапазоне
10-1000 NTU: ±2 % от измеренного значения.

_Калибровка_: проводят с помощью 4 эталонов сравнения в интересующем
диапазоне значений. Для этого могут использоваться эталонные суспензии
или подходящие стандартные растворы, откалиброванные с помощью исходного
эталона. При определении мутности лекарственных средств допускается
использовать для калибровки приборов эталоны сравнения, приготовленные в
соответствии с требованиями ОФС «Прозрачность и степень опалесценции
(мутности) жидкостей».

_Посторонний свет_ является существенным источником ошибок при низких
значениях измеряемой мутности. Посторонний свет попадает в детектор из
оптической системы, а не от испытуемого образца; менее 0,15 NTU в
диапазоне 0–10 NTU; менее 0,5 NTU, в диапазоне 10–1000 NTU.

Приборы, соответствующие перечисленным характеристикам и откалиброванные
с использованием эталонов сравнения, можно использовать вместо
визуального метода исследования для определения соответствия требованиям
фармакопейных статей. Приборы, у которых технические характеристики
(диапазон, разрешение, точность, повторяемость) отличаются от указанных
выше, могут использоваться в случае, если они валидированы надлежащим
образом и пригодны для использования по назначению. Методика испытания
также должна быть валидирована в целях подтверждения её аналитической
пригодности. Прибор и методика должны соответствовать параметрам
испытуемого образца.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


