
[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
 


==== ФС 2.1.0214 Циклофосфамид моногидрат

*Циклофосфамид* +
*Cyclophosphamidum monohydricum* 

*Взамен ФС.2.1.0214.18*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0214_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

2-[Бис(2-хлорэтил)амино]-1,3,2λ^5^-оксазафосфинан-2-он моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % циклофосфамида
C~7~H~15~Cl~2~N~2~O~2~P в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый кристаллический порошок или белые
кристаллы.

*Растворимость*. Легко растворим в спирте 96 % и хлороформе, умеренно
растворим или растворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца циклофосфамида.

. _Тонкослойная хроматография._ Основная зона адсорбции на
хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, величине и окраске
должна соответствовать зоне адсорбции циклофосфамида на хроматограмме
раствора стандартного образца циклофосфамида (раздел «Родственные
примеси»).

. _Качественная реакция._ Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды и
прибавляют 5 мл нитрата серебра раствора 4,25 %; раствор должен остаться
прозрачным. Раствор нагревают до кипения; должен образоваться белый
осадок, который растворяется в аммиака растворе концентрированном 25 % и
вновь осаждаться при добавлении азотной кислоты разведённой 12,5 %.

. _Качественная реакция._ Прибавляют к 0,1 г субстанции 3 мл азотной
кислоты концентрированной и 1 мл серной кислоты концентрированной и
нагревают до обесцвечивания. Полученный раствор охлаждают до комнатной
температуры, прибавляют 10 мл воды, нагревают до 60 °С и прибавляют
10 мл аммония молибдата раствора 10 %; должно появиться ярко-жёлтое
окрашивание и через некоторое время выпасть жёлтый осадок.

[discrete]
===== Испытания

*Температура плавления.* От 47 до 51 °C (ОФС «Температура плавления»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора*. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y~6~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

*рН раствора*. От 4,1 до 7,0 (1 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия»,
метод 3). Определение проводят немедленно после приготовления раствора.

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ТСХ (ОФС
«Тонкослойная хроматография»).

_Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Муравьиная кислота
безводная—ацетон—вода—метилэтилкетон 2:4:12:80.

_Испытуемый раствор А._ В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г
субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора до метки
тем же растворителем.

_Испытуемый раствор Б._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора спиртом 96 % до
метки.

_Раствор стандартного образца циклофосфамида._ В мерную колбу
вместимостью 5 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца
циклофосфамида, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора до
метки тем же растворителем.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мл
испытуемого раствора А и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора А
(200 мкг), испытуемого раствора Б (20 мкг), раствора стандартного
образца циклофосфамида (20 мкг) и раствор сравнения (2 мкг). Пластинку с
нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в
камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ
пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из
камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном
шкафу при температуре 110 °С в течение 10 мин.

На дно хроматографической камеры помещают чашку для выпаривания,
содержащую калия перманганата раствор 5 %, к которому прибавляют равный
объём хлористоводородной кислоты концентрированной. В камеру помещают
горячую ТСХ пластинку, закрывают и выдерживают в течение 2 мин. Вынимают
пластинку и помещают в поток холодного воздуха для удаления избытка
хлора – при нанесении на пластину ниже уровня проб одной капли раствора
крахмала с калия йодидом должно появляться лишь бледно-синее окрашивание
(следует избегать длительного воздействия холодного воздуха).
Опрыскивают раствором крахмала с калия йодидом и выдерживают в течение
5 мин.

_Допустимое содержание примесей._ Зона адсорбции любой примеси на
хроматограмме испытуемого раствора А по совокупности величины и
интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на
хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Зоны адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

*Вода*. От 5,7 % до 6,9 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфаты*. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). В мерную колбу
вместимостью 25 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде и
доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10 мл
полученного раствора.

*Фосфаты*. Не более 0,01 % (ОФС «Фосфаты»). В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём
раствора водой до метки.

*Хлориды*. Не более 0,05 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 2,0 мл раствора полученного в испытании «Сульфаты» и
доводят объём раствора водой до метки.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).
1,0 г субстанции растворяют в 10 мл воды.

*Остаточные органические растворители*. В соответствие с ОФС «Остаточные
органические растворители».

+*+ *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»).

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

+*+ *Стерильность*. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия
(титриметрические методы анализа)».

Переносят 0,2 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу
вместимостью 250 мл, растворяют в 4 мл спирта 96 %, прибавляют 20 мл
воды и 20 мл 0,5 М спиртового раствора калия гидроксида. Смесь кипятят с
обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают и количественно
переносят с помощью 20 мл воды в мерную колбу вместимостью 100 мл__.__
Прибавляют 5 мл азотной кислоты разведённой 16 %, 25 мл 0,1 М раствора
нитрата серебра и доводят объём раствора водой до метки. Содержимое
колбы хорошо перемешивают и фильтруют, отбрасывая первые 20 мл
фильтрата. К 50 мл фильтрата прибавляют 10 мл азотной кислоты
разведённой 16 %, 5 мл железа(III) аммония сульфата раствора 30 % и
титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до появления красноватой
окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора нитрата серебра соответствует 13,05 мг
циклофосфамида C~7~H~15~Cl~2~N~2~O~2~P.

[discrete]
===== Хранение

В плотно закрытой упаковке в защищённом от света месте при температуре
от 2 до 8 °С.

+*+ Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


