[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0058 Аскорбиновая кислота (Acidum ascorbicum)

*Взамен ФС.2.1.0058.18*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0058_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(5__R__)-5-[(1__S__)-1,2-Дигидроксиэтил]-3,4-дигидроксифуран-2(5__H__)-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % аскорбиновой кислоты
C~6~H~8~O~6~ в пересчёте на свободное от остаточных органических
растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные
кристаллы, обесцвечивающиеся при воздействии воздуха и влаги.

*Растворимость.* Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте
96 %, практически нерастворим в хлороформе.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия._ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1^ по положению полос по
поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного
образца аскорбиновой кислоты.

. _Спектрофотометрия._ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

[none]
* _Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мг
субстанции и растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,1 М и
доводят объём раствора до метки.
* Ультрафиолетовый спектр испытуемого раствора в области длин волн от 230
до 300 нм должен иметь максимум поглощения при длине волны 243 нм с
удельным показателем поглощения от 545 до 585.

[arabic,start=3]
. _Качественная реакция._ Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды и
прибавляют 0,2 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и 0,5 мл серебра
нитрата раствора 1,7 %; должен появиться тёмный осадок.

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора.* Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть
прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора.* Окраска раствора, полученного в испытании
«Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном BY~7~
(ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Удельное вращение. От +20,5 до +21,5 (1 г субстанции в 10 мл воды;
определение проводят сразу после приготовления испытуемого раствора, ОФС
«Оптическое вращение).

*рН.* От 2,1 до 2,6 (Испытание проводят в растворе, полученном в
испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

_Буферный раствор._ В химический стакан помещают 6,8 г калия
дигидрофосфата, растворяют в 175 мл воды, фильтруют через мембранный
фильтр с размером пор 0,45 мкм, количественно переносят в мерную колбу
вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора до метки.

_Подвижная фаза._ Буферный раствор―ацетонитрил 25:75.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,50 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в подвижной фазе и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси С._ В мерную колбу вместимостью
5 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
аскорбиновой кислоты примеси С, растворяют в подвижной фазе и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца аскорбиновой
кислоты примеси D, 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца аскорбиновой кислоты, растворяют в подвижной фазе, прибавляют
2,5 мл раствора стандартного образца примеси С и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1 мл испытуемого
раствора, доводят объём раствора подвижной фазой до метки и
перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1 мл раствора
стандартного образца примеси С и перемешивают.

_Хроматографические условия_

[cols=",^,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,6 мм, *силикагель аминопропилсилильный для
хроматографии*, 5 мкм; | |

|Температура колонки |45 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 210 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования |2,5 – кратное от времени удерживания пика
аскорбиновой кислоты. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания_ _соединений._ Аскорбиновая кислота – 1
(около 11 мин); примесь D – около 0,4; примесь С – около 1,7.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси С и пика
примеси D используют относительное время удерживания соединений,
хроматограмму стандартного раствора.

_Пригодность хроматографической системы_

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (Rs)_ между пиками аскорбиновой
кислоты и примеси С должно быть не менее 3.

На хроматограмме стандартного раствора _отношение сигнал/шум (S/N)_ для
пика аскорбиновой кислоты должно быть не менее 20 (6 введений).

_Допустимое содержание примесей_

На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей С и D не должна более чем в 1,5 раза
превышать площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме
стандартного раствора (не более 0,15 % каждая);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площади пика
аскорбиновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора (не более
0,10%);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме С и D) не должна превышать
двукратную площадь пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме
стандартного раствора (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика аскорбиновой
кислоты на хроматограмме стандартного раствора (менее 0,05 %).

*Щавелевая кислота.* Не более 0,2 %.

_Испытуемый раствор._ Растворяют 0,25 г субстанции в 5 мл воды,
нейтрализуют натрия гидроксида раствором 10 %, прибавляют 1 мл уксусной
кислоты раствора 12 %, 0,5 мл кальция хлорида раствора 7,35 % и
перемешивают.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 70 мг
щавелевой кислоты, растворяют в воде, доводят объём раствора тем же
растворителем до метки. К 5 мл полученного раствора прибавляют 1 мл
раствора уксусной кислоты разведённой 12 %, 0,5 мл кальция хлорида
раствора 7,35 % и перемешивают. Раствор готовят одновременно с
испытуемым раствором.

Испытуемый раствор и раствор сравнения выдерживают в течение 1 ч.

Опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию
раствора сравнения.

*Медь.* Не более 0,0005 %. Определение проводят методом ААС
(ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Используют свежеприготовленные растворы.

_Растворитель._ Азотной кислоты раствор 0,1 М с минимальным содержанием
элементных примесей.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Стандартный раствор меди._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
0,393 г меди сульфат пентагидрат, растворяют в воде и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой
до метки.

_Калибровочные растворы_. В три мерные колбы вместимостью 100 мл
помещают стандартный раствор меди в количестве: 2,0; 4,0; 6,0 мл,
доводят объём каждого раствора растворителем до метки и перемешивают
(содержание меди соответственно: 0,2; 0,4; 0,6 мкг/мл).

_Условия испытания_

[cols="34%,^66%",]
|===

|Источник излучения |лампа с полым медным катодом;
|Длина волны |324,8 нм;
|Атомизация |воздушно-ацетиленовое пламя.
|===

Устанавливают нулевую точку на приборе, используя азотной кислоты
раствор 0,1 М. Измеряют поглощение калибровочных растворов меди и
испытуемого раствора. Для каждого раствора проводят не менее 3
измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов
величины поглощения от концентрации меди (мкг/мл). Определяют параметры
линейной регрессии.

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию меди в
испытуемом растворе.

Содержание меди в субстанции в процентах (_X_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0058_2.png[]
|===

где	_C_	-	концентрация меди в испытуемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл; +
	_а_	-	навеска субстанции, г.


*Железо.* Не более 0,0002 %. Определение проводят методом ААС (ОФС
«Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Используют свежеприготовленные растворы.

_Растворитель._ Азотной кислоты раствор 0,1 М с минимальным содержанием
элементных примесей.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в азотной кислоты растворе
0,1 М, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Стандартный раствор железа._ В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 0,863 г квасцов железоаммониевых, растворяют в 25 мл серной
кислоты разведённой 9,8 % и доводят объём раствора водой до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и
доводят объём раствора водой до метки.

_Калибровочные растворы_. В три мерные колбы вместимостью 100 мл
помещают стандартный раствор железа в количестве: 1,0; 2,0; 3,0 мл,
доводят объём каждого раствора растворителем до метки и перемешивают
(содержание железа соответственно 0,2; 0,4; 0,6 мкг/мл).

_Условия испытания_

[cols="34%,^66%"]
|===

|Источник излучения |лампа с полым железным катодом;
|Длина волны |248,3 нм;
|Атомизация |воздушно-ацетиленовое пламя.
|===

Устанавливают нулевую точку на приборе, используя азотной кислоты
раствор 0,1 М. Измеряют поглощение калибровочных растворов железа и
испытуемого раствора при длине волны 248,3 нм. Для каждого раствора
проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости
средних результатов величины поглощения от концентрации железа (мкг/мл).
Определяют параметры линейной регрессии.

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию железа в
испытуемом растворе.

Содержание железа в субстанции в процентах (_X_)
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0058_2.png[]
|===

где	_C_	-	концентрация железа в испытуемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл; +
	_а_ -	навеска субстанции, г.


*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

+*+ *Бактериальные эндотоксины.* Не более 1,2 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный
раствор субстанции с концентрацией 50 мг/мл, а затем разводят его не
менее чем в 100 раз.

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия
(титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл серной
кислоты раствора 1 М и 80 мл воды и титруют 0,05 М раствором йода до
появления устойчивого фиолетово-синего окрашивания (индикатор – 1 мл
крахмала раствора 1 %, содержащего 0,01 % ртути(II) йодида).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 8,806 мг аскорбиновой кислоты
C~6~H~8~O~6~.

[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

+*+ Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


