[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0459 Мелатонин (Melatoninum)


*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0459_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

_N_-[2-(5-Метокси-1__H__-индол-3-ил)этил]ацетамид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % мелатонина
C~13~H~16~N~2~O~2~, в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Растворимость.* Растворим в метаноле, умеренно растворим в хлороформе и
этилацетате, мало или очень мало растворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^-1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца мелатонина.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика мелатонина на
хроматограмме раствора стандартного образца мелатонина (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Температура плавления.* От 116 до 119 °C (ОФС «Температура плавления»,
метод 1).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ +
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Растворяют 2,45 г калия дигидрофосфата в
900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до
3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу
вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Ацетонитрил.

_Растворитель (А)_. Ацетонитрил ―Вода 200:800.

_Растворитель (Б)._ ПФБ―ПФА 200:800.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе А и доводят объём
раствора этим же растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем А до метки.
В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы_. В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца мелатонина и 50 мг (точная навеска) примеси
5-метокситриптамина, растворяют в растворителе А и доводят объём
раствора этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем А до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
10 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем А до
метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и
доводят объём раствора растворителем А до метки.

*Примечание*

*Примесь 1:* 5-метокситриптамин:
2-(5-метокси-1__H__-индол-3-ил)этан-1-амин [608-07-1].

_Хроматографические условия._

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|50 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный
для хроматографии, 1,8 мкм; |

|Температура колонки |25 °C; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 225 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время регистрации хроматограммы |36 мин. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–20 |90 → 70 |10 → 30
|20–36 |70 → 30 |30 → 70
|36–41 |30 → 90 |70 → 10
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки пригодности
хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Мелатонин – 1 (около
7 мин); примесь 1 – около 0,3.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси 1 используют
относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствор для
проверки пригодности хроматографической системы.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _отношение сигнал/шум (S/N)_ для пиков мелатонина и примеси 1 должно
быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической
системы:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками 5-метокситриптамина и мелатонина
должно быть не менее 10,0;

- _фактор асимметрии_ _пика (A~S~)_ мелатонина должен быть не более 2,0.

Содержание 5-метокситриптамина в субстанции в процентах (_X_) вычисляют
по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0459_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика 5-метокситриптамина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика 5-метокситриптамина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_ -	навеска стандартного образца 5-метокситриптамина, мг; +
	_P_ -	содержание 5-метокситриптамина в стандартном образце 5-метокситриптамина,%.


Содержание любой другой примеси в субстанции (_X~i~_) в процентах
вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0459_3.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика мелатонина на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	-	навеска стандартного образца мелатонина, мг; +
	_P_	-	содержание мелатонина в стандартном образце мелатонина,%


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь 1 – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма всех примесей – не более 0,5 %.


Не учитывают пики, содержание каждой из которых менее 0,05 %.


*Вода.* Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1  г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с +
ОФС «Остаточные органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с +
ОФС «Микробиологическая чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями:

_Подвижная фаза (ПФ)._ ПФБ—ПФА 200:800.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе Б и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем Б до метки.

_Раствор_ _стандартного образца мелатонина._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца мелатонина, растворяют в растворителе Б и доводят объём раствора
этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл
помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем Б до метки.

Объём вводимой пробы в хроматографическую систему – 5 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца мелатонина и испытуемый
раствор.

Время хроматографирования: двукратное от времени удерживания пика
мелатонина (около 2 мин).

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца мелатонина _фактор асимметрии пика (A~S~)_
мелатонина должен быть не более 2,0;

Содержание мелатонина C~13~H~16~N~2~O~2~ в субстанции в процентах в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество (_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0459_4.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика мелатонина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика мелатонина на хроматограмме раствора стандартного образца мелатонина; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	-	навеска стандартного образца мелатонина, мг; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %; +
	_P_	-	содержание мелатонина в стандартном образце мелатонина,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


