[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
 

==== ФС.2.1.0542 Осельтамивира фосфат

*Осельтамивир* +
*Oseltamiviri phosphas* 

*Вводится впервые*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0542_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

Этил[(3__R__,4__R__,5__S__)-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоксилата]
фосфат (1:1).

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % осельтамивира фосфата
C~16~H~28~N~2~O~4~·H~3~PO~4~ в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый кристаллический порошок.

+*+ Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в метаноле, практически
нерастворим в метиленхлориде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^–1^, снятый в диске с калия
бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца осельтамивира фосфата.

[none]
* Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по
отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха
и записывают спектры сухих остатков.

[arabic,start=2]
. _ВЭЖХ_. Время удерживания основного пика на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
осельтамивира на хроматограмме раствора стандартного образца
осельтамивира фосфата (раздел «Количественное определение»).

. _Качественная реакция._ Субстанция должна давать характерную реакцию
на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От –30,7 до –32,6 в пересчёте на сухое вещество
(1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

*Родственные примеси*

*_Примесь В._* Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная
жидкостная хроматография»).

_Раствор аммония ацетата._ В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают
1,54 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем
же растворителем до метки.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Раствор аммония ацетата—ацетонитрил—вода для
хроматографии 100:300:600.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси В_. В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца примеси В, растворяют в 5 мл этанола и доводят объём раствора
водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг
(точная навеска) фармакопейного стандартного образца осельтамивира
фосфата, не содержащего примесь В, растворяют в растворе стандартного
образца примеси В и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного
образца примеси В и доводят объём раствора водой до метки.

*Примечание*

Примесь В: +
этил{(1__R__,2__R__,3__R__,4__R__,5__S__)-2-азидо-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогексан-1-карбоксилат}.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|50 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для
хроматографии, 5 мкм; |
|Температура колонки |40 °С;  | |

|Скорость потока |0,5 мл/мин (без деления потока); | |

| 3+<|Примечание - Возможно использование скорости потока до 1,5 мл/мин
при применении деления потока;

|Детектор |масс-спектрометрический; | |

|Объём пробы |1 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|2-кратное от времени удерживания пика
осельтамивира фосфата. |
|===

_Условия детектирования_

Приводимые значения параметров являются рекомендуемыми и при
необходимости могут быть изменены при условии выполнения критериев
пригодности системы.

[cols="20%,80%",grid=none,frame=none]
|===

|Источник ионизации |электроспрей (ESI);
|Режим ионизации |положительный (ESI+);
|Режим детектирования |мониторинг избранного иона (SIM);
|Величина m/z для детектируемого иона |356,2;
|Напряжение на капилляре |3 кВ;
|Время выдержки |580 мс;
|Напряжение на фрагментаторе |120 В;
|Температура газа |350 °С;
|Расход газа-осушителя |13 л/мин;
|Давление небулайзера |345 кПа.
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси В используют
хроматограмму раствора стандартного образца примеси В.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика примеси В должно быть не менее 10,0.

Содержание примеси В в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0542_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска стандартного образца примеси В, мг; +
	_P_	–	содержание примеси В в стандартном образце примеси В,%.


_Допустимое содержание примесей:_

- примесь В – не более 0,01 %.

*_Примесь Н._* Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая
хроматография»).

+*+ Гигроскопична.

_Силулирующий реагент._
Хлортриметилсилан-гексаметилдисилазан-пиридин безводный 1:2:10.

_Испытуемый раствор._ К 0,15 г субстанции прибавляют 10,0 мл
силулирующего реагента, перемешивают, нагревают при температуре 60 °С в
течение 20 мин и центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин.

_Стандартный раствор._ Растворяют 15 мг (точная навеска) стандартного
образца примеси Н в 1 мл пиридина безводного. В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 10 мкл полученного раствора, прибавляют
10 мкл испытуемого раствора и доводят объём раствора пиридином безводным
до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл стандартного раствора и
доводят объём раствора пиридином безводным до метки.

*Примечание*

Примесь H: трибутил-λ^5^-фосфанон [814-29-9].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая поли(диметил)силоксаном,
0,25 мкм; |
|Детектор |пламенно-ионизационный; | |

|Расход: газа-носителя (азот) |1,2 мл/мин; | |

|Деление потока |1:50; | |

|Объём пробы |1 мкл; | |

|Время хроматографирования |21 мин. | |
|===

_Температурная программа_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header"]
|===
| |Время, мин |Температура, °C
|Колонка |0–2 |180
| |2–11 |180 → 250
| |11–21 |250
|Инжектор | |260
|Детектор | |260
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Осельтамивир – 1 (около
10 мин); примесь Н – около 0,5.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси H используют
относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного
раствора.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика примеси Н должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме стандартного раствора _фактор асимметрии_ _пика_
(_A~S~_) примеси Н должен быть не более 2,0.

_Допустимое содержание примесей_. На хроматограмме испытуемого раствора
площадь пика примеси Н не должна превышать 1,5 площади пика примеси Н на
хроматограмме стандартного раствора (не более 0,15 %).

_**Другие примеси**._ Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Буферный раствор_. Растворяют 6,8 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды,
доводят значение рН калия гидроксида раствором 1 М до 6,0, количественно
переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора
водой до метки.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 135:245:620.

_Растворитель._ Ацетонитрил—метанол—вода 135:245:620.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 15 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная
навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 5 мг (точная
навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в
растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную
колбу вместимостью 20 мл помещают 1,5 мл полученного раствора и доводят
объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и
доводят объём раствора растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь А: +
(3__R__,4__R__,5__S__)-4-амино-5-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоновая
кислота [1364932-19-3].

Примесь С: +
(3__R__,4__R__,5__S__)-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоновая
кислота [187227-45-8].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для
хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |50 °С; | |

|Скорость потока |1,2 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 207 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|2-кратное от времени удерживания пика
осельтамивира. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый
раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Осельтамивир – 1 (около
17 мин); примесь А – около 0,17; примесь С – около 0,18.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков примесей А и C
используют относительное время удерживания и хроматограмму раствора для
проверки разделительной способности хроматографической.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика осельтамивира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение_ (_R~S~_) между пиками примеси А
и примеси C должно быть не менее 1,5.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площадь пика примеси
С умножают на поправочный коэффициент 0,71.

_Допустимое содержание примесей_. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна превышать трёхкратную площадь пика
осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика
осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать семикратную
площадь пика осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,7 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на
хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

*Вода*. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после
сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца осельтамивира фосфата._ В мерную колбу
вместимостью 20 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца осельтамивира фосфата, не содержащего примесь В,
растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до
метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца осельтамивира фосфата и
испытуемый раствор.

Содержание осельтамивира фосфата C~16~H~28~N~2~O~4~·H~3~PO~4~ в
субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0542_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска стандартного образца примеси В, мг; +
	_P_	–	содержание примеси В в стандартном образце примеси В,%.


[discrete]
===== Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


