[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
 
 

==== ФС.2.1.0596 Зидовудин (Zidovudinum)

*Взамен ФС 42-3412-97*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0596_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

1-(3-Азидо-2,3-дидезокси-β-D-_эритро_-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % зидовудина
C~10~H~13~N~5~O~4~ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый с коричневатым оттенком
кристаллический порошок.

+*+ Проявляет полиморфизм.

*Растворимость*. Легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96 %,
умеренно растворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^-1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца зидовудина.

[none]
* Если спектры различаются, субстанцию и фармакопейный стандартный образец
зидовудина по отдельности растворяют в минимальном количестве воды,
упаривают в вакууме, высушивают в вакуумном эксикаторе над фосфора(V)
оксидом и записывают спектры сухих остатков.

[arabic,start=2]
. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика зидовудина на
хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное
определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение*. От +60,5 до +63,0 в пересчёте на безводное и
свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор
субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора*. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл воды должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»). При необходимости раствор подогревают.

*Цветность раствора*. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY~5~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

*pH раствора*. От 5,0 до 7,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси*

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная
хроматография»).

Сумма примесей, определённая методами 1 и 2, – не более 1,0%.

*_1. Примеси A, B, C, E, F, G_*

_Буферный раствор._ Растворяют 2,0 г ацетата аммония в 850 мл воды,
доводят pH до 6,80 уксусной кислотой разведённой 12 %. Переносят
полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём
раствора водой до метки.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Буферный раствор.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Ацетонитрил.

_Растворитель._ Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 4:20:76.

_Испытуемый раствор А_. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси B._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси B,
растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до
метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного
образца зидовудина для проверки пригодности системы, содержащего примесь
G, растворяют в растворе стандартного образца примеси B и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.
В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца примеси D._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси D,
растворяют в смеси растворителей (ацетонитрил—метанол—буферный раствор
4:40:56) и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора той же смесью растворителей до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу
вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь A: +
1-(2,3-дидезокси-β-D-_глицеро_-пент-2-ен-фуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион +
[3056-17-5].

Примесь B: З'-хлор-3'-дезокситимидин [25526-94-7].

Примесь C: 5-метилпиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион [65-71-4].

Примесь D: трифенилметанол [76-84-6].

Примесь E: +
1-(2-дезокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион +
[50-89-5].

Примесь F: +
1-(2-Дезокси-β-D-_трео_-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион +
[16053-52-4].

Примесь G: З'-(З'-азидо-З'-дезокситимидин-3-ил)-З'-дезокситимидин 
[148665-49-0].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный
по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 265 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА, % |ПФБ, %
|0–3 |95 |5
|3–18 |95 → 85 |5 → 15
|18–28 |85 → 30 |15 → 70
|28–43 |30 |70
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки пригодности
хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D,
раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Зидовудин − 1 (около
16 мин); примесь B − около 1,05; примесь G − около 1,5; примесь D −
около 2,0.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков примесей B и G
используют хроматограмму раствора для проверки пригодности
хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному
стандартному образцу зидовудина для пригодности системы. Для
идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора
стандартного образца примеси трифенилметанола.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы _разрешение (R~S~)_
между пиками зидовудина и примеси B должно быть не менее 2,0.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна превышать двукратную площадь пика
зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика
зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

Не учитывают пики, обусловленные примесью D, пики, элюирующиеся после
пика примеси D, и пики, площадь которых менее 0,5 площади пика
зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

*_2. Примеси D, J, K_*

_Подвижная фаза (ПФ)._ Вода—ацетонитрил 300:700.

_Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят
объём раствора ПФ до метки.

_Раствор стандартного образца примеси D._ В мерную колбу вместимостью
10 мл добавляют 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца примеси D и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 100 мл добавляют 1,0 мл
раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора ПФ до
метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы_. В мерную
колбу вместимостью 50 мл добавляют 1,0 мл раствора стандартного образца
примеси D и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

*Примечание*

Примесь D: трифенилметанол [76-84-6].

Примесь J: +
1-[3-азидо-5-_O_-(трифенилметил)-2,3-дидезокси-β-D-_эритро_-пентофуранозил]-5-метилпиримидин-2,4(1__H__,3__H__)-дион +
[29706-84-1].

Примесь K: 1,1',1"-(метоксиметантриил)трибензол [596-31-6].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный
по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 210 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|10-кратное от времени удерживания пика
зидовудина. | 
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Зидовудин – 1 (около
1,5 мин); примесь D – около 2,5.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси D используют
хроматограмму раствора сравнения.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы _разрешение (R~S~)_
между пиками зидовудина и примеси D должно быть не менее 5,0.

Содержание примеси D в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0596_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг.


_Допустимое содержание примесей:_

- любая примесь – не более 0,10 %.

Не учитывают пики, элюирующиеся до пика примеси D, и пики, содержание
каждой из которых менее 0,05 %.

*Вода*. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,25 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после
сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

{asterisk}{asterisk} *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный
раствор субстанции с концентрацией 1 мг зидовудина в 1 мл воды для БЭТ.

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Примеси A, B, C, E, F, G» со следующими изменениями.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл добавляют
10,0 мл испытуемого раствора из раздела «Родственные примеси» и доводят
объём раствора растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца зидовудина._ В мерную колбу вместимостью
20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца зидовудина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до
метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца зидовудина и испытуемый
раствор.

Содержание зидовудина C~10~H~13~N~5~O~4~ в субстанции в процентах в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество
(_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0596_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика зидовудина на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика зидовудина на хроматограмме  стандартного раствора; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца зидовудина, мг; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_P_	–	содержание зидовудина в фармакопейном стандартном образце зидовудина,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.

{asterisk}{asterisk} Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


