[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 
==== ФС.2.1.0086 Глицин

*Взамен ФС.2.1.0086.18*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0086_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

Аминоуксусная кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % глицина C~2~H~5~NO~2~ в
пересчёте на сухое вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок.

+*+ Проявляет полиморфизм.

*Растворимость*. Легко растворим в воде и муравьиной кислоте, очень мало
растворим или практически нерастворим в спирте 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^−1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца глицина.

[none]
* Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный
стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах
спирта 60 %, выпаривают досуха и записывают спектры полученных образцов.

[arabic,start=2]
. _Тонкослойная хроматография_ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

[none]
* _Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем целлюлозы.
* _Подвижная фаза (ПФ)._ Уксусная кислота—вода—бутанол 20:20:60.
* _Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.
* _Раствор стандартного образца глицина._ В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца глицина,
растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки.
* _Реактив для детектирования_. Нингидрина раствор 0,2 %.
* На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и
раствора стандартного образца глицина. Пластинку с нанесёнными пробами
сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим
способом. Когда фронт подвижной фазы пройдёт около 80–90 % длины
пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления
следов растворителей при температуре 80 ^о^С в течение 30 мин,
опрыскивают реактивом для детектирования, повторно сушат при температуре
105 ^о^С в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.
* _Результат._ Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого
раствора по положению, окраске и величине должна соответствовать зоне
адсорбции глицина на хроматограмме раствора стандартного образца
глицина.

[arabic,start=3]
. _Качественная реакция._ Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл воды,
прибавляют 1 мл натрия гипохлорита раствора концентрированного и кипятят
в течение 2 мин. Прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты
концентрированной и кипятят в течение 4–5 мин. Прибавляют 2 мл
хлористоводородной кислоты концентрированной и 1 мл резорцина раствора
20 г/л, кипятят в течение 1 мин и охлаждают до комнатной температуры. К
полученному раствору прибавляют 10 мл воды и перемешивают. К 5 мл
полученного раствора прибавляют 6 мл раствора натрия гидроксида 8,5 %;
раствор должен окраситься в фиолетовый цвет с зеленовато-жёлтой
флуоресценцией, с постепенным переходом окраски в оранжевую и в жёлтую,
с сохранением интенсивной флуоресценции.

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора.* Раствор 10 % субстанции в воде, свободной от
углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень
опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y~7~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей»).

*pH раствора.* От 5,9 до 6,4 (5 % раствор в воде, свободной от углерода
диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Подвижная фаза (ПФ)._ В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают
1,4 г натрия пентансульфоната растворяют в 900 мл воды, доводят рН
раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,2. Полученный раствор
переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора
водой до метки.

_Растворитель._ Фосфорная кислота концентрированная—ПФ 1,5:500.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора
доводят объём раствора растворителем до метки.

_Стандартный раствор_. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг
javascript:try%20%7B%20openDoc('1192200E.htm',%20'_self')%20%7D%20catch(e)%20%7B%20%7D;[глицина]
ангидрида (примесь В) (точная навеска), 50 мг диглицина (примесь Н)
(точная навеска) и 50 мг триглицина (примесь I) (точная навеска)
растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до
метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 80 мг субстанции и
80 мг иминодиуксусной кислоты (примесь А) (точная навеска) растворяют в
растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь A (иминодиуксусная кислота): 2,2ʹ-азандиилдиуксусная кислота
[142-73-4].

Примесь B (глицина ангидрид): пиперазин-2,5-дион [106-57-0].

Примесь H (диглицин): глицилглицин [556-50-3].

Примесь I (триглицин): глицилглицилглицин [556-33-2].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный,
для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 210 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования |4-кратное от времени удерживания пика
глицина. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, стандартный раствор, раствор сравнения и
испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Глицин – 1,0 (около
5,5 мин); примесь А – около 0,7; примесь В – около 0,75; примесь Н –
около 1,7; примесь I – около 2,0.

_Идентификация примесей_. Для идентификации пиков примесей В, Н и I
используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму
стандартного раствора.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками примеси А и глицина должно быть не
менее 5,0.

Содержание каждой из примесей B, H и I в субстанции в процентах
(_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0086_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика каждой из примесей B, H и I на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска каждой соответствующей примеси мг; +
	_P_	–	содержание основного вещества в каждой соответствующей примеси,%.


Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах
(_X_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0086_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика глицина на хроматограмме раствора сравнения. +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг;


_Допустимое содержание примесей:_

- примеси B, H и I – не более 0,1 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

*Нингидрин-положительные примеси.* Определение проводят в соответствии с
ОФС «Аминокислотный анализ» (Метод 1).

Примечание – Концентрации испытуемого и стандартных растворов могут быть
адаптированы в соответствии с чувствительностью используемого
оборудования. Концентрации всех растворов допускается регулировать,
таким образом, чтобы выполнялись требования пригодности системы, при
сохранении соотношений концентраций между всеми растворами, как описано.

_Растворитель._ Вода или буферный раствор для пробоподготовки,
подходящий для используемого прибора.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, доводят объём
растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём растворителем до метки,
перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор L-пролина._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг
(точная навеска) L-пролина растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл
помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная
навеска) L-изолейцина и 30 мг (точная навеска) L-лейцина растворяют в
растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Детектор 2+|спектрофотометрический, 570 нм (для определения
нингидрин-положительного вещества); |

| 2+|спектрофотометрический, 440 нм (для определения
нингидрин-положительного вещества). |
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, раствор L-пролина, раствор сравнения и
испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками L-изолейцина и L-лейцина должно быть не
менее 1,5.

Содержание любой нингидрин-положительной примеси, обнаруженной при длине
волны 570 нм, в субстанции в процентах (_X_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0086_4.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика любой нингидрин-положительной примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика глицина на хроматограмме раствора сравнения. +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг;


Содержание любой нингидрин-положительной примеси, обнаруженной при длине
волны 440 нм в субстанции в процентах (_X_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0086_5.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика любой нингидрин-положительной примеси на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика L-пролина на хроматограмме раствора L-пролина. +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска L-пролина, мг; +
	_P_	–	содержание основного вещества в L-пролине,%.


Если концентрация обнаруженной нингидрин-положительной примеси при обоих
значениях длины волны превышает 0,05 %, следует использовать результат,
полученный при длине волны 570 нм.

_Допустимое содержание примесей:_

- любой нингидрин-положительной примеси – не более 0,1 % каждая;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают примеси, содержание которых менее 0,05 %.

Хлориды. Не более 0,0075 % (ОФС «Хлориды»). 0,267 г субстанции
растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 10 мл.

*Сульфаты.* Не более 0,0065 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). 1,54 г
субстанции растворяют в воде при нагревании на водяной бане до 40 °С и
доводят водой до 10,0 мл.

{asterisk}{asterisk}{asterisk} *Аммоний.* Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный
анализ» (Метод 1) в условиях испытания «Нингидрин-положительные примеси»
со следующими изменениями.

_Стандартный раствор аммоний-иона_. В мерную колбу вместимостью 50 мл
помещают 6,0 мл аммония стандартного раствора 100 мкг/мл, доводят объём
растворителем до метки, перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
растворителем до метки.

_Контрольный раствор_. Растворитель.

_Хроматографические условия_

[none]
* Детектор спектрофотометрический, 570 нм.


Хроматографируют контрольный раствор, стандартный раствор аммоний-иона и
испытуемый раствор.

_Допустимое содержание примесей_

На хроматограмме испытуемого раствора (при длине волны 570 нм) площадь
пика аммоний-иона не должна превышать площадь основного пика на
хроматограмме стандартного раствора аммоний-иона с учётом пика
аммония-иона на хроматограмме контрольного раствора (не более 0,02 %).

*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

{asterisk}{asterisk}{asterisk} *Железо.* Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС
«Железо» (метод 3) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,3 г
субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием стандартного
раствора железо(III)-иона 1 мкг/мл.

{asterisk}{asterisk} *Мышьяк.* Не более 0,0001 %. (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения
используют 0,5 г субстанции.

*Потеря в массе при высушивании*. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная
навеска) субстанции.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

{asterisk}{asterisk} *Бактериальные эндотоксины.* Не более 6,0 ЕЭ на 1 г субстанции глицина
(ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия
(титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 70 мг (точная навеска) субстанции в 5 мл муравьиной кислоты
безводной, прибавляют 50 мл кислоты уксусной ледяной и немедленно после
растворения титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку
титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое
титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 7,51 мг глицина
C~2~H~5~NO~2~.

[discrete]
===== Хранение

В хорошо укупоренной упаковке.

{asterisk} Приводится для информации.

{asterisk}{asterisk} Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.

{asterisk}{asterisk}{asterisk} Если допускается технологическим процессом.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


