[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

 

==== ФС.2.1.0580 Такролимус моногидрат

|*Такролимус* +
*Tacrolimusum monohydricum* 

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0580_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(3__S__,4__R__,5__S__,8__R__,9__E__,12__S__,14__S__,15__R__,16__S__,18__R__,19__R__,26a__S__)-5,19-Дигидрокси-3-{(1__E__)-1-[(1__R__,3__R__,4__R__)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-(проп-2-ен-1-ил)-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7__H__-15,19-эпоксипиридо[2,1-_c_][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(23__H__)-тетраон
моногидрат.

Представляет собой вещество, полученное путём роста определённых
штаммов _Streptomyces tsukubaensis_.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % такролимуса C~44~H~69~NO~12~
в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Растворимость*. Растворим в спирте 96 %. Практически нерастворим в воде
и гептане.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца такролимуса моногидрата.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
такролимуса на хроматограмме раствора стандартного образца такролимуса
моногидрата (раздел «количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора.* Раствор 0,2 г субстанции в 20,0 мл спирта 96 %
должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции
(мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY~7~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие такролимус, защищают от света и перед
использованием выдерживают в течение 3 ч при комнатной температуре.

_Раствор А._ трет-Бутилметиловый эфир—ацетонитрил 19:81.

_Раствор Б._ К 1000 мл воды прибавляют 0,4 мл фосфорной кислоты
концентрированной и перемешивают.

_Подвижная фаза А (ПФА)_. Раствор А—раствор Б 200:800.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)_. Раствор Б—раствор А 200:800.

_Растворитель._ Вода—ацетонитрил 30:70.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ Растворяют 3,0 мг фармакопейного стандартного образца
такролимуса для проверки пригодности системы (содержит примесь А) в
1,0 мл растворителя.

*Примечание*

Примесь A: +
(3__S__,4__R__,5__S__,8__R__,9__E__,12__S__,14__S__,15__R__,16__S__,18__R__,19__R__,26a__S__)-5,19-дигидрокси-3-{(1__E__)-1-[(1__R__,3__R__,4__R__)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-этил-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7__H__-15,19-эпоксипиридо[2,1-_c_][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(23__H__)-тетраон +
[104987-12-4].

Примесь B: +
(3__S__,4__R__,5__S__,8__R__,9__E__,12__S__,14__S__,15__S__,16__S__,18__R__,19__R__,26a__S__)-5,19-дигидрокси-3-{(1__E__)-1-[(1__R__,3__R__,4__R__)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-этил-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7__H__-15,19-эпоксипиридо[2,1-_c_][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(23__H__)-тетраон.

Такролимуса таутомер 1: +
(3__S__,4__R__,5__S__,8__R__,9__E__,12__S__,14__S__,15__R__,16__S__,18__R__,26a__S__)-5,15-дигидрокси-3-{(1__E__)-1-[(1__R__,3__R__,4__R__)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-(проп-2-ен-1-ил)-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7__H__-пиридо[2,1-_c_][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,19,20,21(23__H__)-пентаон.

Такролимуса таутомер 2: +
(3__S__,4__R__,5__S__,8__R__,9__E__,12__S__,14__S__,15__R__,16__S__,18__R__,19__S__,26a__S__)-5,19-дигидрокси-3-{(1__E__)-1-[(1__R__,3__R__,4__R__)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-(проп-2-ен-1-ил)-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7__H__-15,19-эпоксипиридо[2,1-_c_][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(23__H__)-тетраон +
[144490-63-1].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный
для хроматографии, 3 мкм; |

|Температура колонки |60 °С; | |

|Температура образца |4 °С; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 220 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^34%,^32%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–30 |72 |28
|30–53 |72 → 15 |28 → 85
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Такролимус – 1 (около
24 мин); такролимуса таутомер 1 (широкий пик) – около 0,5; примесь B
(острый пик) – около 0,5; такролимуса таутомер 2 – около 0,6; примесь A
– около 0,9.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пика примеси А используют
хроматограмму раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному
стандартному образцу такролимуса для проверки пригодности системы.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками примеси A и такролимуса должно быть не
менее 3,0.

_Интегрирование:_ пик примеси В, элюируемый вместе с такролимуса
таутомером 1, является пиком-наездником и поэтому должен интегрироваться
методом тангенциальной касательной. Важно, чтобы интегрируемая площадь
пика такролимуса таутомера 1 сохраняла Гауссову форму.

_Допустимое содержание примесей_. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать пятикратную площадь
основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 1,5-кратную
площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,15 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную
площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более
1,0 %).

Не учитывают пики такролимуса таутомеров 1 и 2 и пики, площадь которых
составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора
сравнения (менее 0,05 %).

*Вода.* От 1,5 % до 4,0 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси» со следующими изменениями.

_Раствор стандартного образца такролимуса моногидрата_. В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного
стандартного образца такролимуса моногидрата, растворяют в растворителе
и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца такролимуса моногидрата и
испытуемый раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца такролимуса моногидрата _относительное стандартное
отклонение_ площади пика такролимуса должно быть не более 2,0 %
(6 определений).

Содержание такролимуса C~44~H~69~NO~12~ в субстанции в процентах (_X_) в
пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических
растворителей вещество вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0580_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	сумма площадей пиков такролимуса и такролимуса таутомеров 1 и 2 на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	сумма площадей пиков такролимуса и такролимуса таутомеров 1 и 2 на хроматограмме раствора стандартного образца такролимуса моногидрата; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца такролимуса моногидрата, мг; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_P_	–	содержание такролимуса в фармакопейном стандартном образце такролимуса моногидрата,%.


[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


