
[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
  


==== ФС.2.1.0544 Паклитаксел (Paclitaxelum)


*Вводится впервые*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0544_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

[4,10β-Бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % паклитаксела
C~47~H~51~NO~14~ в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество.

Субстанцию получают из природного сырья или производят полусинтетическим
способом.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок.

+*+ Проявляет полиморфизм.

*Растворимость.* Легко растворим в метиленхлориде, растворим в метаноле,
практически нерастворим в воде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца паклитаксела.

[none]
* Если спектры различаются, растворяют по отдельности 10 мг испытуемой
субстанции и 10 мг фармакопейного стандартного образца в 0,4 мл
метиленхлорида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

[arabic,start=2]
. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого
раствора должно соответствовать времени удерживания пика паклитаксела на
хроматограмме раствора стандартного образца паклитаксела (раздел
«Количественное определение»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение*. От –49,0 до –55,0 в пересчёте на безводное вещество
(1,0 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл метанола должен
быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»,
метод 2).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

*_1. Для субстанции, полученной полусинтетическим способом._* Растворы,
содержащие паклитаксел и его примеси, используют свежеприготовленными.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Ацетонитрил—вода 200:300.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Ацетонитрил.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
субстанции, растворяют в ацетонитриле, при необходимости используя
ультразвуковую баню, и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки.

_Раствор стандартного образца примеси 8._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 7,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси 8,
растворяют в ацетонитриле, встряхивают 10 мин и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._ В мерную
колбу вместимостью 25 мл помещают 30 мг фармакопейного стандартного
образца паклитаксела, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца
примеси 8, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора для проверки
пригодности хроматографической системы и доводят объём раствора
ацетонитрилом до метки.

*Примечание*

Примесь 1 (10-дезацетилбаккатин III): +
[4-(ацетилокси)-1,7β,10β,13α-тетрагидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[32981-86-5].

Примесь 2 (баккатин III): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7β,13α-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[27548-93-2].

Примесь 3: +
[(2__R__,4__S__,5__S__,7__R__,10__S__,12__S__,13__S__,15__S__,16__S__)-2,10-бис(ацетилокси)-
15-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-5,13-дигидрокси-4,16,17,17-тетраметил-3-оксо-8-оксапентацикло[11.3.1.0^1,11^.0^4,11^.0^7,10^]гептадекан-12-ил]бензоат
[146139-03-9].

Примесь 4 (10-дезацетилпаклитаксел): +
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10β-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[78432-77-6].

Примесь 5 (2-дебензоилпаклитаксел-2-пентеноат): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил][(2__E__)-2-метилбут-2-еноат] +
[173101-54-7].

Примесь 6: +
[5β,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,2α,4,7β-тетрагидрокси-9-оксотакс-11-ен-20-ил]бензоат
[932042-85-8].

Примесь 7 (10-ацетоацетилпаклитаксел): +
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-10β-[(3-оксобутаноил)окси]-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат.

Примесь 8 (10-дезацетил-7-эпипаклитаксел): +
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10α-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[78454-17-8].

Примесь 9 (7-эпипклитаксел): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7α-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[105454-04-4].

Примесь 10: +
[4-(ацетилокси)-13α-бис{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-10β-бис{[(2__S__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-2-гидрокси)окси]-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат.

Примесь 11 (7-ацетилпаклитаксел): +
[4,7β,10β-трис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1-гидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[92950-39-5].

Примесь 12 (13-__O__-триэтилсилилбаккатин III): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7β-дигидрокси-9-оксо-13α-[(триэтилсилил)окси]-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[208406-86-4].

Примесь 13 (7-__O__-триэтилсилилпаклитаксел): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1-гидрокси-9-оксо-7β-[(триэтилсилил)окси]-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[148930-55-6].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии,
3 мкм; |

|Температура колонки |35 °С; | |

|Скорость потока |1,2 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 227 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–26 |100 |0
|26–60 |100 → 17 |0 → 83
|60–67 |17 → 100 |83 → 0
|67–75 |100 |0
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки пригодности
хроматографической системы, и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Паклитаксел – 1 (около
21 мин); примесь 1 – около 0,11; примесь 2 – около 0,19; примесь 3 –
около 0,42; примесь 4 – около 0,47; примесь 5 – около 0,80; примеси 6
и 7 – около 0,92; примесь 8 – около 0,94; примесь 9 – около 1,37;
примесь 10 – около 1,45; примесь 11 – около 1,54; примесь 12 –
около 1,80; примесь 13 – около 2,14.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика примеси 8 должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической
системы:

- _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси 8 и паклитаксела должно быть
не менее 1,2;

- _фактор асимметрии_ пика (_A~S~_) паклитаксела должен быть не
более 2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика паклитаксела
должно быть не более 2,0 % (6 введений).

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты:
примесь 1 – 1,24; примесь 2 – 1,29; примесь 3 – 1,39; примесь 12 – 1,75.

_Допустимое содержание примесей._ Содержание каждой из примесей в
субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС
«Хроматография»):

- примесь 5 – не более 0,7 %;

- примесь 11 – не более 0,6 %;

- примеси 4, 9 и 10 – не более 0,5 % каждая;

- примесь 13 – не более 0,3 %;

- примесь 2 – не более 0,2 %;

- примеси 1, 3 и 12 – не более 0,1 % каждая;

- сумма примесей 6, 7 и 8 – не более 0,4 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика примеси 8 на
хроматограмме раствора для оценки чувствительности хроматографической
системы (менее 0,06 %).

*_2. Для субстанции, полученной из природного сырья._* Растворы,
содержащие паклитаксел и его примеси, используют свежеприготовленными.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Ацетонитрил.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Вода.

_Растворитель._ Уксусная кислота—метанол 1:200.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости используя
ультразвуковую баню, и доводят объём раствора тем же растворителем до
метки.

_Раствор стандартного образца паклитаксела._ В мерную колбу вместимостью
100 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца паклитаксела,
растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем
до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного
раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают по 10 мг
фармакопейного стандартного образца примеси 15 и фармакопейного
стандартного образца примеси 8, растворяют в метаноле и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора
метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы_. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного
образца паклитаксела и доводят объём раствора растворителем до метки.

*Примечание*

Примесь 2 (баккатин III): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7β,13α-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[27548-93-2].

Примесь 4 (10-дезацетилпаклитаксел): +
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10β-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[78432-77-6].

Примесь 8 (10-дезацетил-7-эпипаклитаксел): +
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10α-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[78454-17-8].

Примесь 9 (7-эпипклитаксел): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7α-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[105454-04-4].

Примесь 14 (7-ксилозилпаклитаксел): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1-гидрокси-7β-[(β-D-ксилопиранозил)окси]-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[90332-66-4].

Примесь 15 (цефаломанин): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7β-дигидрокси-13α-{[(2__R__,3__S__)-2-гидрокси-3-[(2__E__)-2-метилбут-2-енамидо]-3-фенилпропаноил]окси}-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[71610-00-9].

Примесь 16 (2'',3''-дигидроцефаломанин): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-2-гидрокси-3-[(2__RS__)-2-метилбутанамидо]-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[159001-25-9].

Примесь 17: +
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-2-гидрокси-3-фенил-3-(2-фенилацетамидо)пропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[173101-56-9].

Примесь 18 (3'',4''-дегидропаклитаксел C): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2__R__,3__S__)-3-[(3__E__)-гекс-3-енамидо]-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[502626-06-4].

Примесь 19 (7-эпицефаломаннин): +
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7α-дигидрокси-13α-{[(2__R__,3__S__)-2-гидрокси-3-[(2__E__)-2-метилбут-2-енамидо]-3-фенилпропаноил]окси}-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[150547-36-7].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель пентафторфенилпропильный для
хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |30 °С; | |

|Скорость потока |2,6 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 227 нм; | |

|Объём пробы |15 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–35 |35 |65
|35–60 |35 → 80 |65 → 20
|60–70 |80 → 35 |20 → 65
|70–80 |35 |65
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор стандартного образца
паклитаксела и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Паклитаксел – 1; примесь 2
– около 0,24; примесь 4 – около 0,53; примесь 14 – около 0,57;
примеси 15 и 16 – около 0,78; примесь 8 – около 0,86; примеси 17 и 18 –
около 1,10; примесь 19 – около 1,40; примесь 9 – около 1,85.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика паклитаксела должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси 15 и
примеси 8 должно быть не менее 1,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца
паклитаксела _относительное стандартное отклонение_ площади пика
паклитаксела должно быть не более 2,0 % (6 введений).

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты:
примеси 15 и 16 – 1,26; примесь 2 – 1,29.

_Допустимое содержание примесей._ Содержание каждой из примесей в
субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС
«Хроматография»):

- примеси 4, 8 и 9 – не более 0,5 % каждая;

- примесь 19 – не более 0,3 %;

- примеси 2 и 14 – не более 0,2 % каждая;

- сумма примесей 15 и 16 – не более 0,5 %;

- сумма примесей 17 и 18 – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы
площадей всех пиков.

*Вода.* Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,05 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола.* Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины.* Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг паклитаксела (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный
раствор субстанции с концентрацией 5 мг паклитаксела в 1 мл этилового
спирта 96 %.

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная
хроматография»).

_Подвижная фаза (ПФ)._ Ацетонитрил—вода 450:550.

_Растворитель._ Уксусная кислота—метанол 1:200.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при
необходимости используя ультразвуковую баню, и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки.

_Раствор стандартного образца паклитаксела._ В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного
образца паклитаксела, растворяют в растворителе, при необходимости
используя ультразвуковую баню, и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель пентафторфенилпропильный для
хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 227 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования |18 мин. | |
|===

Хроматографируют раствор стандартного образца паклитаксела и испытуемый
раствор.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
стандартного образца паклитаксела:

- _фактор асимметрии_ пика (_A~S~_) паклитаксела должен быть не
более 1,3;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика паклитаксела
должно быть не более 1,5 % (6 введений);

Содержание паклитаксела C~47~H~51~NO~14~ в субстанции в процентах
(_X_) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0544_2.png[]
|===

где	_S~1~_	-	площадь пика паклитаксела на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	-	площадь пика паклитаксела на хроматограмме раствора стандартного образца паклитаксела; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	-	навеска фармакопейного стандартного образца паклитаксела, мг; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_P_	-	содержание паклитаксела в фармакопейном стандартном образце паклитаксела,%.


[discrete]
===== Хранение

В защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


