[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===
 
 
==== ФС.2.1.0390 Варфарин натрия клатрат

*Варфарин* +
*Warfarinum natricum clathratum* 

*Вводится впервые*


[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0390_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

2-Оксо-3-[(1__RS__)-3-оксо-1-фенилбутил]-2__H__-1-бензопиран-4-олят
натрия—пропан-2-ол (2:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % варфарина натрия
C~19~H~15~NaO~4~ в пересчёте на безводное и свободное от 2-пропанола и
остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. *Гигроскопичен.

*Растворимость.* Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте,
растворим в ацетоне, очень мало растворим в метиленхлориде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^−1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца варфарина натрия клатрата.

. _ГХ_ (ОФС «Газовая хроматография»). Время удерживания основного пика
на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени
удерживания пика 2-пропанола на хроматограмме стандартного раствора
(раздел «2-Пропанол»).

. _Качественная реакция_. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды,
прибавляют 5 мл азотной кислоты концентрированной, фильтруют, прибавляют
2 мл калия дихромата раствора 0,5 % и встряхивают в течение 5 мин; через
20 мин должно появиться зеленовато-голубое окрашивание.

. _Качественная реакция._ Субстанция должна давать характерную реакцию
Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

*Прозрачность раствора.* Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть
прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»,
метод 2).

*pH.* От 7,6 до 8,6 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси.* Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Растворитель._ Метанол—вода 250:750.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода
10:250:750.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг
субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же
растворителем до метки.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг примеси В и
2 мг примеси С, растворяют в 25 мл метанола и доводят объём раствора
водой до метки.

*Примечание*

Примесь В: 4-гидрокси-2__H__-1-бензопиран-2-он [1076-38-6].

Примесь С: (3__E__)-4-фенилбут-3-ен-2-он [1896-62-4].

_Хроматографические условия_

[cols=",^,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |250 × 4,0 мм, силикагель цианосилильный для хроматографии,
5 мкм; | |
|Температура колонки |30 °С; | |

|Скорость потока |1,5 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 260 нм; | |

|Объём пробы |20 мкл; | |

|Время хроматографирования |2-х кратное от времени удерживания
варфарина. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений._ Варфарин – 1 (около
9 мин); примесь В – около 0,4; примесь С – около 0,6.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков примесей В и С
используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму
раствора для проверки разделительной способности хроматографической
системы.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение_ (_R_) между пиками примеси В и примеси С должно быть не
менее 2,0.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты:
примесь В – 0,5; примесь С – 0,4.

_Допустимое содержание примесей_. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей В и С не должна более чем в 1,5 раза
превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не
более 0,15 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика
на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную
площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее половины площади
пика варфарина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

*2-Пропанол.* От 8,0 до 8,5 %. Определение проводят методом ГХ
(ОФС «Газовая хроматография»).

_Раствор внутреннего стандарта._ В мерную колбу вместимостью 20 мл
помещают 0,17 г пропанола и доводят объём раствора водой до метки. В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора водой до метки.

_Испытуемый раствор_. Растворяют 0,1 г субстанции в 2,0 мл воды и
прибавляют 2,0 мл раствора внутреннего стандарта.

_Стандартный раствор._ В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,17 г
2-пропанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу
вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём
раствора водой до метки. Смешивают 2,0 мл полученного раствора и 2,0 мл
раствора внутреннего стандарта.

_Хроматографические условия_

[cols=",^,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем
поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана, 1,8 мкм; | |
|Детектор |пламенно-ионизационный; | |

|Расход газа-носителя (азот) |1,0 мл/мин; | |

|Деление потока |80:1; | |

|Объём пробы |1 мкл; | |

|Температура | |Время, мин |Температура, °C

| |Колонка |
0–20

20–40

40–50

|
40;

40 → 240;

240;

| |Инжектор |– |140;

| |Детектор |– |240.
|===

Хроматографируют контрольный, стандартный и испытуемый растворы.

_Относительное время удерживания соединений._ 2-Пропанол – 1; пропанол –
около 1,5.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме стандартного
раствора:

- _разрешение (R~s~)_ между пиками 2-пропанола и пропанола должно быть
не менее 5,0;

- _фактор асимметрии_ _пика_ (_A~s~_) 2-пропанола должен быть не более
1,3;

- _относительные стандартные отклонения_ площадей пиков 2-пропанола и
пропанола должны быть не более 2,0 % (6 введений).

_Допустимое содержание примесей_. Содержание 2-пропанола в субстанции в
процентах (_Х_) вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0390_2.png[]
|===

где	_B~1~_	–	отношение площади пика 2-пропанола к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_B~0~_	–	отношение площади пика 2-пропанола к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора; +
	_a~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_a~0~_	–	навеска 2-пропанола, мг; +
	_P_	–	содержание основного вещества в 2-пропаноле,%.


Фенольные кетоны. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС
«Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,25 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 2 %
и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор
используют сразу после приготовления.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в
максимуме поглощения при длине волны 385 нм в кювете с толщиной слоя
1 см, используя в качестве раствора сравнения натрия гидроксида раствор
2 %.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,2.

*Вода.* Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 2,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после
сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в
ультрафиолетовой и видимой областях»).

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе
0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора тем же растворителем до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в
максимуме поглощения при длине волны 308 нм в кювете с толщиной слоя
1 см, используя в качестве раствора сравнения натрия гидроксида раствор
0,01 М.

Содержание варфарина натрия C~19~H~15~NaO~4~ в процентах (_Х_) в
пересчёте на безводное, свободное от 2-пропанола и остаточных
органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0390_3.png[]
|===

где	_A~1~_	-	оптическая плотность испытуемого раствора; +
	_a~1~_	-	навеска субстанции, г; +
	_431_	-	удельный показатель поглощения варфарина натрия, ( image:im_fs_2.1.0390_4.png[] ); +
	_W_	-	суммарное содержание воды, 2-пропанола и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

[discrete]
===== Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

+*+ Приводится для информации.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


