[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===

  

==== ФС 2.1.0337 Аргинин (Argininum)

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image:im_fs_2.1.0337_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

(2__S__)-2-Амино-5-(карбамимидоиламино)пентановая кислота.

L-Аргинин.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % аргинина C~6~H~14~N~4~O~2~ в
пересчёте на сухое вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные
кристаллы.

+*+ Гигроскопичен.

*Растворимость.* Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте
96 % , практически нерастворим в хлороформе.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия
бромидом, в области от 4000 до 400 см^–1^, по положению полос поглощения
должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца
аргинина.

[none]
* Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец
высушивают при температуре 105 °С и записывают спектры сухих остатков.

[arabic,start=2] 
. _ТСХ_ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). Основная зона адсорбции на
хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, величине и окраске
должна соответствовать зоне адсорбции аргинина на хроматограмме раствора
стандартного образца аргинина (раздел «Родственные примеси. 1.
Аминосоединения»).

. Качественная реакция._ Растворяют 25 мг субстанции в 2 мл воды,
прибавляют 1 мл _α_-нафтола раствора 0,1 % и 2 мл смеси, состоящей из
натрия гипохлорита раствора концентрированного и воды (1:1); должно
появиться красное окрашивание.

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От +25,5 до +28,5 в пересчёте на сухое вещество
(8 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоте 25 %, ОФС
«Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора.* Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды
дистиллированной должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень
опалесценции (мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY~6~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

*рН раствора*. От 10,5 до 12,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

*Родственные примеси*

*_1. Аминосоединения._* Определение проводят методом ТСХ
(ОФС «Тонкослойная хроматография»).

_Пластинка._ ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Аммиака раствор концентрированный 25 %—2-пропанол
30:70.

_Испытуемый раствор А._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г
субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

_Испытуемый раствор Б._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор стандартного образца аргинина._ В мерную колбу вместимостью
50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца аргинина,
растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,1 М и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

_Раствор сравнения А._ В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают
1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор сравнения Б._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают
10,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора водой до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг стандартного
образца аргинина и 10 мг стандартного образца лизина гидрохлорида,
растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,1 М и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора А
(50 мкг), испытуемого раствора Б (1 мкг), раствора стандартного образца
аргинина (1 мкг), раствора сравнения А (0,25 мкг), раствора сравнения Б
(0,1 мкг), раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы (по 2 мкг аргинина и лизина гидрохлорида) и
хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %. Пластинку с нанесёнными
пробами сушат на воздухе, в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и
хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её
вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей при
температуре 100–105 °С, опрыскивают нингидрина раствором 0,2 %,
выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение
15 мин и просматривают в видимом свете.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора
сравнения Б должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны
адсорбции.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора
зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности
окраски не должна превышать зону адсорбции аргинина на хроматограмме
раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и
интенсивности окраски их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого
раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах растворов
сравнения не должно превышать 2,0 %.

Зону адсорбции хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % не
учитывают.

*_2. Другие примеси._* Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

_Фосфорной кислоты раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают
1 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой
до метки.

_Модифицирующий реактив._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают
1 мл водорода пероксида и доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Растворяют 2,4 г натрия дигидрофосфата безводного
и 1,9 г натрия гексансульфоната в 965 мл воды, доводят значение рН
фосфорной кислотой концентрированной до 2,30±0,05, количественно
переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и
доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

_Испытуемый раствор._ Растворяют 20 мг субстанции в смеси 1 мл фосфорной
кислоты раствора и 9 мл ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком
до растворения и охлаждают до комнатной температуры.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную
колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг субстанции,
прибавляют 10 мл модифицирующего реактива, выдерживают в течение 2 ч при
температуре 80 °С, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём
раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6,0 мл раствора сравнения и
доводят объём раствора ПФ до метки.

_Хроматографические условия_

[cols=",,,",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка |100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный,
для хроматографии, 2,6 мкм; | |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 195 нм; | |

|Объём пробы |5 мкл; | |

|Время хроматографирования |1,5-кратное от времени удерживания пика
аргинина. | |
|===

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности
хроматографической системы, раствор для проверки разделительной
способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый
раствор.

_Время удерживания_ аргинина – около 7,5 мин.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки чувствительности хроматографической системы _отношение
сигнал/шум (S/N)_ для пика аргинина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности
хроматографической системы _разрешение (R~S~)_ между пиками примеси с
относительным временем удерживания 0,85 и аргинина должно быть не менее
3,0.

На хроматограмме раствора сравнения _относительное стандартное
отклонение_ площади пика аргинина должно быть не более 2,0 %
(6 введений).

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика аргинина
на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную
площадь пика аргинина на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,15 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика аргинина на
хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической
системы (менее 0,03 %).

*Аммоний.* Не более 0,02 %.

_Стандартный раствор аммония._ В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 74,1 мг (точная навеска) аммония хлорида, растворяют в воде и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу
вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл полученного раствора. Раствор
готовится непосредственно перед использованием.

_Испытуемый раствор_. В коническую колбу с притёртой пробкой
вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 1 мл воды,
прибавляют 0,3 г магния оксида и перемешивают.

_Эталонный раствор_. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 мл
стандартного раствора аммония, прибавляют 1 мл воды, 0,3 г магния оксида
и перемешивают.

Над реакционными смесями испытуемого и эталонного растворов подвешивают
по полоске полиэтилена шириной 1 см с прикреплёнными несколькими каплями
воды отрезками серебряно-марганцевой бумаги, и закрывают колбы пробками.
Содержимое колб перемешивают, не допуская попадания брызг на бумагу, и
выдерживают на водяной бане при температуре 40 °С в течение 30 мин.
Окраска бумаги, используемой в испытуемом растворе, не должна быть
интенсивнее окраски бумаги, используемой в эталонном растворе.

*Железо.* Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС
«Железо» (метод 1), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г
субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием стандартного
раствора железо(III)-иона 10 мкг/мл.

*Потеря в массе при высушивании.* Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная
навеска) субстанции.

*Сульфаты.* Не более 0,03 %. (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 10 мл воды
растворяют 0,33 г субстанции.

*Хлориды*. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). В 10 мл воды растворяют
0,1 г субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) с использованием эталонного
раствора 1.

+*+ *Аномальная токсичность*. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС
«Аномальная токсичность»). Тест-доза – 11 мг субстанции в 0,5 мл
раствора натрия хлорида для инъекций 0,9 % на мышь, внутривенно, со
скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 часов.

+*+ *Бактериальные эндотоксины.* Не более 10,0 ЕЭ на 1 г аргинина (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный
раствор субстанции с концентрацией аргинина 45 мг/мл в
хлористоводородной кислоты растворе 0,25 М, приготовленном на воде для
определения бактериальных эндотоксинов. Коррекцию pH исходного раствора
субстанции осуществляют с использованием буферных растворов.

*Микробиологическая чистота.* В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия
(титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют
0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до перехода окраски из
зелёной в фиолетово-красную (индикатор – 0,2 мл метилового красного
смешанного раствора).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 17,42 мг
аргинина C~6~H~14~N~4~O~2~.

[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке, защищённом от света месте.

+*+ Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


