[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС 2.1.0314 Цефепима дигидрохлорид моногидрат

*Цефепим* +
*Cefepimi dihydrochloridum monohydricum* 

*Вводится впервые*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0314_1.png[]
|===


[discrete]
===== Определение

(6__R__,7__R__)-7-[(2__Z__)-2-(2-Амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилата
дигидрохлорид моногидрат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % цефепима дигидрохлорида
C~19~H~24~N~6~O~5~S~2~·2HCl в пересчёте на безводное и свободное от
остаточных органических растворителей вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание*. Белый или почти белый кристаллический порошок.

*Растворимость*. Легко растворим в воде и метаноле, практически
нерастворим в метиленхлориде.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^–1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата.

. _ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме
испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
цефепима на хроматограмме раствора стандартного образца цефепима
дигидрохлорида моногидрата (раздел «Количественное определение»).

. _Качественная реакция._ Субстанция должна давать характерную
реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

[discrete]
===== Испытания

*Удельное вращение.* От +40 до +45 в пересчёте на безводное вещество
(1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

*Прозрачность раствора.* Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть
прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности)
жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y~3~ (ОФС «Степень
окраски жидкостей», метод 2).

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС
«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

*_1. Примесь G._* Не более 0,5 %.

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

_Подвижная фаза (ПФ)._ Ацетонитрил—азотной кислоты 0,01 М раствор
10:1000. Фильтруют через фильтр с размером пор 0,2 мкм.

_Растворитель._ Азотной кислоты 0,01 М раствор.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём
раствора растворителем до метки.

_Раствор N-метилпирролидина._ В мерную колбу вместимостью 100 мл
помещают 0,25 г (точная навеска) _N_-метилпирролидина (примесь G,
1-метилпирролидин [120-94-5]) и доводят объём раствора водой до метки. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора растворителем до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г
пирролидина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора
растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают
2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до
метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора и 5,0 мл раствора
_N_-метилпирролидина.

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|50 × 4,6 мм, катионообменная смола сильная (протонированная
форма), 5 мкм; |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |кондуктометрический; | |

|Объём пробы |100 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|1,1-кратное от времени удерживания пика
цефепима. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, раствор _N_-метилпирролидина и испытуемый
раствор.

_Время удерживания_ цефепима – около 50 мин.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_отношение максимум/минимум (p/v)_ между пиками пирролидина и примеси G
должно быть не менее 3.

На хроматограмме раствора _N_-метилпирролидина:

- _фактор асимметрии_ _пика (A~S~)_ примеси G должен быть не более 2,5;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика примеси G должно
быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание примеси G в субстанции в процентах (_Х_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0314_2.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика примеси G на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика N-метилпирролидина на хроматограмме раствора N-метилпирролидина; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, г; +
	_а~0~_	–	навеска N-метилпирролидина, г; +
	_P_	–	содержание основного вещества в N-метилпирролидине,%.


*_2. Другие примеси_*

Все растворы готовят непосредственно перед использованием или хранят при
температуре 4–8 °С не более 12 ч.

_Буферный раствор._ Растворяют 0,68 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды
и доводят рН раствора калия гидроксида раствором 0,5 М до 5,00.
Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и
доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза А (ПФА)._ Ацетонитрил—буферный раствор 100:900.

_Подвижная фаза Б (ПФБ)._ Ацетонитрил—буферный раствор 500:500.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 70 мг
(точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора
тем же растворителем до метки, обрабатывают ультразвуком в течение 30 с
и перемешивают в течение 5 мин.

_Раствор сравнения._ В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную
колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора ПФА до метки.

_Раствор стандартного образца примеси Е._ В мерную колбу вместимость
25 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е,
растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.
В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора ПФА до метки.

_Раствор для проверки разделительной способности хроматографической
системы._ В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 7 мг фармакопейного
стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата для проверки
пригодности системы, содержащего примеси А, В, F, растворяют в ПФА и
доводят объём раствора ПФА до метки.

*Примечание*

Примесь А: +
(6__R__,7__R__)-7-[(2__E__)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат +
[149261-27-8].

Примесь В: +
(6__R__,7__R__)-7-[(2__Z__)-2-[(2__Z__)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-1,3-тиазол-4-ил]-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат.

Примесь Е: +
(6__R__,7__R__)-7-амино-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат +
[103296-32-8].

Примесь F: +
(6__R__,7__R__)-7-[(6__R__,7__R__)-7-[(2__Z__)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат
(катион).

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный,
для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С; | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 254 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл. | |
|===

_Режим хроматографирования_

[cols="^34%,^33%,^33%",options="header",]
|===
|Время, мин |ПФА,% |ПФБ,%
|0–10 |100 |0
|10–30 |100 → 50 |0 → 50
|30–35 |50 |50
|35–36 |50 → 100 |50 → 0
|36–45 |100 |0
|===

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности
хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси Е,
раствор сравнения и испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Цефепим – 1 (около 7 мин);
примесь E – около 0,4; примесь F – около 0,8; примесь А – около 2,5;
примесь B – около 4,1.

_Идентификация примесей._ Для идентификации пиков примесей А, В, F
используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму
раствора для проверки разделительной способности хроматографической
системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному
образцу цефепима дигидрохлорида моногидрата для проверки пригодности
системы. Для идентификации пика примеси Е используют хроматограмму
раствора стандартного образца примеси Е.

_Пригодность хроматографической системы_. На хроматограмме раствора для
проверки разделительной способности хроматографической системы
_разрешение (R~S~)_ между пиками примеси F и цефепима должно быть не
менее 1,5.

_Поправочные коэффициенты._ Для расчёта содержания площади пиков
следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты:
примесь А – 1,4, примесь В – 1,4; примесь Е – 1,8.

_Допустимое содержание примесей._ На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 1,5 раза превышать
площадь пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей B и F не должна превышать площадь пика
цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси Е не должна превышать 0,5 площади пика цефепима
на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

– площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика
цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную
площадь пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более
1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,25 площади
основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

*Вода.* От 3,0 до 4,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для
определения используют 0,4 г (точная навеска) субстанции.

*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы*. Не более 0,002 % Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном
в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

+*+ *Аномальная токсичность.* Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС
«Аномальная токсичность»). Тест-доза – 20 мг цефепима в 0,5 мл воды для
инъекций на мышь, внутривенно. Скорость введения 0,1 мл/с. Срок
наблюдения – 48 ч.

+*+ *Бактериальные эндотоксины*. Не более 0,04 ЕЭ на 1 мг цефепима (ОФС
«Бактериальные эндотоксины»).

+*+ *Стерильность.* Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные
примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

_Подвижная фаза (ПФ)._ ПФА.

_Раствор стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата_. В
мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 70 мг (точная навеска)
фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата,
растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки,
обрабатывают ультразвуком в течение 30 с и перемешивают в течение 5 мин.

_Хроматографические условия_

* Время хроматографирования: 1,4-кратное от времени удерживания пика
цефепима.


Хроматографируют раствор стандартного образца цефепима дигидрохлорида
моногидрата и испытуемый раствор.

Содержание цефепима дигидрохлорида C~19~H~24~N~6~O~5~S~2~·2HCl в
субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных
органических растворителей вещество в процентах (_X_) вычисляют по
формуле:

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0314_3.png[]
|===

где	_S~1~_	–	площадь пика цефепима на хроматограмме испытуемого раствора; +
	_S~0~_	–	площадь пика цефепима на хроматограмме раствора стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата; +
	_а~1~_	–	навеска субстанции, мг; +
	_а~0~_	–	навеска фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата, мг; +
	_W_	–	суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%; +
	_P_	–	содержание цефепима дигидрохлорида в фармакопейном стандартном образце цефепима дигидрохлорида моногидрата,%.


[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной стерильной упаковке, в защищённом от света
месте.

+*+ Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства
лекарственных препаратов для парентерального применения.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


