[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|*ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ*
|===


 
==== ФС.2.1.0116 Кофеин (Coffeinum)



*Взамен ФС.2.1.0116.18*

[cols="^a",grid=none,frame=none]
|===

|image::im_fs_2.1.0116_1.png[]
|===

[discrete]
===== Определение

1,3,7-Триметил-3,7-дигидро-1__H__-пурин-2,6-дион.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % кофеина C~8~H~10~N~4~O~2~ в
пересчёте на сухое вещество.

[discrete]
===== Свойства

*Описание.* Белые шелковистые игольчатые кристаллы или белый
кристаллический порошок. На воздухе выветривается, при нагревании
возгоняется.

*Растворимость*. Легко растворим в горячей воде и хлороформе, умеренно
(медленно) растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

[discrete]
===== Идентификация

. _ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной
области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до
400 см^−1^ по положению полос поглощения должен соответствовать спектру
фармакопейного стандартного образца кофеина.

. _Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и
видимой областях»).

[none]
* _Испытуемый раствор_. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают
0,10 г субстанции, растворяют в 70 мл хлористоводородной кислоты
растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В
мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и
доводят объём раствора тем же растворителем до метки.


* Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до
300 нм должен иметь максимум при 273 нм.

[arabic,start=3]
. _Качественная реакция_. В фарфоровую чашку помещают 10 мг субстанции,
прибавляют 0,5 мл водорода пероксида, 0,5 мл хлористоводородной кислоты
разведённой 8,3 % и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смачивают
0,1 мл раствора аммиака; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание.

. _Качественная реакция._ Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл горячей
воды, охлаждают, прибавляют 0,2 мл раствора йода 0,1 М; не должно
появиться ни помутнения, ни осадка. При прибавлении нескольких капель
хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % должен образоваться
коричневый осадок, растворимый в натрия гидроксида растворе 2 М.

[discrete]
===== Испытания

*Температура плавления.* От 234 до 239 °С (ОФС «Температура плавления»,
метод 1).

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г субстанции в 50 мл горячей воды.
Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции
(мутности) жидкостей»).

*Цветность раствора.* Раствор, полученный в испытании «Прозрачность
раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкости»,
метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл горячей
воды. После охлаждения к раствору прибавляют 0,1 мл бромтимолового
синего раствора 0,05 %. Должно появиться жёлтое или зелёное окрашивание.
Для изменения окраски раствора на синий должно потребоваться не более
0,1 мл натрия гидроксида раствора 0,02 М.

*Родственные примеси*. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

_Буферный раствор рН 4,5._ Растворяют 0,82 г (точная навеска) натрия
ацетата безводного в 900 мл воды и доводят значение рН уксусной кислотой
ледяной до 4,5, количественно переносят полученный раствор в мерную
колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

_Подвижная фаза  (ПФ)._ Смесь тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный
раствор рН 4,5 20:25:955.

_Испытуемый раствор._ В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г
(точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл ПФ и доводят объём
раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью
10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ
до метки.

_Раствор сравнения_. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл
испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную
колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят
объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки пригодности хроматографической системы._
Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
кофеина для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего
примеси А, C, D и F) в 3,0 мл ПФ и доводят объём раствора тем же
растворителем до 5 мл. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл
полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

_Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы._ В
мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и
доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

*Примечание*

Примесь A: 1,3-диметил-3,7-дигидро-1__H__-пурин-2,6-дион [58-55-9].

Примесь C: 1,3,9-триметил-3,7-дигидро-1__H__-пурин-2,6-дион [519-32-4].

Примесь D: 3,7-диметил-3,7-дигидро-1__H__-пурин-2,6-дион [83-67-0].

Примесь F: 1,7-диметил-3,7-дигидро-1__H__-пурин-2,6-дион [611-59-6].

_Хроматографические условия_

[cols=",,^,^",grid=none,frame=none]
|===

|Колонка 2+|150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный
по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |

|Температура колонки |25 °С | |

|Скорость потока |1,0 мл/мин; | |

|Детектор |спектрофотометрический, 275 нм; | |

|Объём пробы |10 мкл; | |

|Время хроматографирования 2+|1,5-кратное от времени удерживания основного
пика. |
|===

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической
системы, раствор сравнения, испытуемый раствор.

_Относительное время удерживания соединений_. Кофеин – 1 (около 8 мин);
примесь С – около 0,42; примесь D – около 0,46; примесь F – около 0,63;
примесь A – около 0,69.

_Идентификация примесей_. Для идентификации пиков примесей используют
относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к
стандартному образцу кофеина для проверки пригодности хроматографической
системы.

_Пригодность хроматографической системы._ На хроматограмме раствора для
проверки пригодности хроматографической системы:

- _разрешение_ (_R~S~_) между пиками примесей С и D должно быть не менее
2,0;

- _разрешение_ (_R~S~_) между пиками примесей А и F должно быть не менее
2,5;

- _фактор ассиметрии_ _пика_ (_A~S~_) кофеина должен быть не более 2,0;

- _относительное стандартное отклонение_ площади пика кофеина должно
быть не более 2,0 % (6 введений).

_Допустимое содержание примесей_. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси должна быть не более 0,5 площади основного
пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,5 площади
пика основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более
0,1 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на
хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

*Потеря в массе при высушивании.* Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе
при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная
навеска) субстанции.

Посторонние алкалоиды. К 10 мл 2 % раствора субстанции прибавляют 0,2 мл
реактива Майера; не должно наблюдаться помутнения раствора.

Органические примеси. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл серной кислоты
концентрированной должен быть прозрачным и бесцветным. Раствор 0,5 г
субстанции в 5 мл азотной кислоты концентрированной должен быть
прозрачным и бесцветным.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения
используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

*Хлориды.* Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Помещают 1 г субстанции в
мерную колбу вместимостью 50 мл, встряхивают в течение 1 мин с 5 мл
горячей воды, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Для
определения используют 10 мл фильтрата.

*Сульфатная зола*. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для
определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

*Тяжёлые металлы.* Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии
с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в
испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

*Остаточные органические растворители.* В соответствии с ОФС «Остаточные
органические растворители».

*Микробиологическая чистота*. В соответствии с ОФС «Микробиологическая
чистота».

[discrete]
===== Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия
(титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции, предварительно высушенной
до постоянной массы, в 2 мл хлороформа, прибавляют 40 мл уксусного
ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты в метаноле. Конечную
точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое
титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 19,42 мг кофеина
безводного С~8~Н~10~N~4~O~2~.

[discrete]
===== Хранение

В герметично укупоренной упаковке.


[cols="^",grid=none,frame=none]
|===

|+________________________________________________________________________________________________________________+
|===


