АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СМЕСЕЙ

При анализе многокомпонентных лекарственных форм используют различные варианты титрования: прямое, обратное, заместительное, с контрольным опытом и др. (см. табл. 1).

Способы расчета концентраций определяемого ингредиента зависят от вида лекарственной формы, величин эквивалентов (особенно при определении по разности) и т.д.

Для самостоятельного составления схемы количественного анализа, а также в целях обеспечения точности определения и экономного расходования реактивов провизору-аналитику необходимо уметь производить предварительные расчеты массы (объема) лекарственной формы, необходимой для анализа, величины разведения, среднего ориентировочного титра, коэффициентов пересчета, теоретического объема титранта, оценивать результаты анализа и делать выводы.

Расчеты при титровании

Концентрацию ингредиента в смеси в процентах или его содержание рассчитывают в тех единицах, в каких данный ингредиент выписан в прописи.

При прямом титровании концентрацию ингредиентов в процентах (в жидких лекарственных формах, мазях, порошках) рассчитывают по формуле:

где С - концентрация определяемого вещества, в %;

V - объем титрованного раствора ,в мл;

k - коэффициент поправки на титрованный раствор;

Т - титр по определяемому веществу (титриметрический фактор пересчета);

а - масса (в г) или объем (в мл) анализируемой смеси.

Титр по определяемому веществу (или титриметрический фактор пересчета) - это масса анализируемого вещества (в г), взаимодействующая с 1 мл титрованного раствора.

Титриметрический фактор пересчета рассчитывают по формуле:

где С - молярная концентрация титранта в моль/л;

- молярная масса эквивалента определяемого вещества в г/моль.

Титриметрический фактор пересчета - величина постоянная для данного лекарственного вещества, определяемого конкретным титриметрическим методом с известной концентрацией титранта. Поэтому провизорыаналитики в своей работе пользуются таблицами с указаниями величин титра по определяемому веществу.

Содержание ингредиентов в граммах (в жидких лекарственных формах, порошках, мазях) рассчитывают по формулам:

где X - масса определяемого лекарственного вещества, в г;

V - объем титрованного раствора, в мл;

V₁ объем жидкой лекарственной формы по прописи, в мл;

Р - общая масса порошка, мази по прописи, в г;

а - объем, в мл, или масса, в г, лекарственной формы, отобранные для анализа;

k - поправочный коэффициент.

Если при анализе жидкой лекарственной формы предварительно делали разведение и для титрования использовали часть полученного разведения (А), то концентрацию определяемого вещества рассчитывают по формуле:

где В - объем мерной колбы, в мл;

А - объем разведенного раствора, отобранный для титрования (аликвотная доля), в мл.

При необходимости выразить содержание анализируемого вещества в граммах, в числитель вместо цифры 100 подставляют величину общей массы (Р, в г) или объема (V₁, в мл) лекарственной формы:

При обратном титровании (или титровании по избытку) используют два титрованных раствора. Тогда концентрацию ингредиентов в % (в жидких лекарственных формах, мазях, порошках) рассчитывают по формуле:

где V₁ - объем первого титранта, взятого в избытке, в мл;

k₁ - коэффициент поправки на первый титрованный раствор;

V₂ объем второго титранта, затраченного на титрование избытка первого титрованного раствора, в мл;

k₂ - коэффициент поправки на второй титрованный раствор; остальные обозначения см. в формуле (1).

Содержание ингредиентов в граммах (в жидких лекарственных формах, порошках, мазях) рассчитывают по формулам:

где V₃ объем жидкой лекарственной формы по прописи, в мл;

Р - общая масса порошка, мази по прописи, в г; остальные обозначения см. в формуле (1).

В экспресс-анализе иногда проводят контрольный (холостой) опыт при прямом и обратном способах титрования. Контрольный опыт в случае прямого титрования проводят при:

В приведенных примерах концентрацию определяемого вещества в процентах и в граммах вычисляют с учетом контрольного опыта по формулам:

где V_0.0 - объем титрованного раствора, израсходованный на титрование определяемого вещества, в мл;

V_K.0 - объем титрованного раствора, израсходованный на титрование контрольного опыта, в мл;

Р - масса порошка или мази, в г;

остальные обозначения см. в формуле (1).

При прямом ацидиметрическом титровании некоторых лекарственных веществ (гексаметилентетрамин, калия ацетат, натрия бензоат и др.) контрольный опыт проводится с целью сравнения перехода окраски индикатора в точке эквивалентности в анализируемом и контрольном растворах. В этом случае количество титрованного раствора, израсходованное на титрование в контрольном опыте, при расчетах не учитывается.

В экспресс-анализе проведение контрольного опыта в случае обратного титрования необходимо при:

Концентрацию определяемого вещества в процентах и в граммах вычисляют с учетом контрольного опыта по формулам:

где V_K0 - объем второго титранта, пошедший на титрование контрольного оптыта, в мл;

V₀₀ - объем второго титранта, пошедший на титрование основного опыта, в мл;

Р - масса порошка или мази, в г; остальные обозначения см. в формуле (1).

Кроме того, контрольный опыт ставят, если необходимо отфильтровать осадок и титровать избыток раствора в аликвотной части фильтрата. В этом случае расчет ведут по формулам:

где В - объем мерной колбы (в мл);

А - объем фильтрата, взятого на титрование (в мл);

Р - масса порошка или мази (в г);

остальные обозначения см. в формуле (1).

При заместительном титровании, т.е. титровании вещества, образующегося в результате реакции в количестве, эквивалентом определяемому компоненту, расчет ведут, как при прямом титровании, но титриметрический фактор пересчета определяют не по титруемому заместителю, а по определяемому веществу. Например, при пропускании через катионитную колонку натрия цитрата образуется эквивалентное количество лимонной кислоты, которую титруют стандартным раствором натрия гидроксида. При расчете титр определяют по натрия цитрату, а не по лимонной кислоте.

При определении по разности лекарственные вещества титруют суммарно общим для них методом, а затем один из компонентов аналиЗИРУЮТ другим методом, при котором второй компонент не мешает определению. Вычисление по разности включает несколько вариантов в зависимости от типа протекающих реакций.

Если при титровании разными методами молярные массы эквивалентов М (1/z) анализируемых веществ не меняются, то объем тированного раствора (V₁), пошедший на титрование вещества, определяемого ПО разности, рассчитывают по алгебраической разности между ОБЪЕМОМ, затраченным на титрование суммы веществ (V_c), и объемом другого титрованного раствора (V₂), израсходованного на титрование ВТОРОГО вещества:

V₁ = V_c - V₂ (17)

Такой расчет справедлив, если при титровании использовали одиНАКОВЫЕ МАССЫ (объемы) лекарственной смеси и одинаковые конценТРАЦИИ титрованных растворов. Разберем это на примере прописи 16.

ПРОПИСЬ 16

Эфедрина гидрохлорида 0,6

Новокаина 0,9

Воды очищенной до 120 мл

Для количественного определения новокаина и эфедрина гидрохлорида вначале в аликвотной доле титруют сумму двух лекарственных веществ 0,1 н. раствором серебра нитрата:

C₁₃H₂₀N₂0₂ · HCl + C_1OH₁₅NO · HCl + 2AgNO₃ = C₁₃H₂₀N₂O₂ · HNO₃ + C₁₀H₁₅NO · HNO₃ + 2AgCl ↓

Согласно уравнению реакции, значение "z" при расчете М (1/z) для каждого лекарственного вещества равно 1.

Затем проводят второе титрование в аликвотной доле 0,1 М раствором натрия нитрита для определения новокаина:

Величина "z" для новокаина и в этой реакции равна 1. Эфедрин в этом случае не мешает определению новокаина и объем 0,1 М раствора натрия нитрита эквивалентен только количеству новокаина.

Расчет содержания новокаина проводят по формуле:

Количество эфедрина гидрохлорида рассчитывают по разности между объемом 0,1 н. раствора серебра нитрата (пошедшего на титрование суммы новокаина и эфедрина гидрохлорида) и объемом 0,1 М раствора натрия нитрита, пошедшего на титрование новокаина:

В случае если для количественного определения используют разные массы (объемы) лекарственной смеси, то в расчетной формуле это учитывают следующим образом: предположим, что для определения суммы новокаина и эфедрина гидрохлорида взяли аликвотную долю объемом 2 мл (титрант - 0,1 н. раствор серебра нитрата), а для титрования новокаина 1 мл (титрант 0,1 М раствор натрия нитрита), тогда при расчете содержания эфедрина гидрохлорида объем раствора натрия нитрита, пошедший на титрование новокаина, умножают на два и расчетная формула приобретает вид:

И наоборот, когда для титрования суммы новокаина и эфедрина гидрохлорида берут 1,0 мл раствора лекарственной формы, а для определения новокаина 2 мл, то объем натрия нитрита, пошедший на титрование, следует разделить на два:

Данные формулы расчета справедливы при использовании титрованных растворов одинаковых концентраций, т.е. в данном случае необходимо только приведение к одному объему аликвотной части или к одной массе.

Использование различных концентраций титрованных растворов в процессе количественного определения ингредиентов смеси отражаются в формуле следующим образом: предположим, что для определения суммы новокаина и эфедрина гидрохлорида использовали 0,1 н. раствор серебра нитрата, а для титрования новокаина 0,02 М раствор натрия нитрита. При этом аликвотные доли в первом и во втором случаях были равны. В данном примере на титрование навески новокаина пойдет в пять раз больше 0,02 М раствора натрия нитрита, чем 0,1 н. раствора серебра нитрата. Поэтому при расчете содержания эфедрина гидрохлорида по разности для приведения объемов титрантов к одной концентрации объем раствора натрия нитрита делят на пять:

Более сложным случаем расчета является схема анализа, когда для определения содержания ингредиентов берут разные аликвотные доли и титрование проводят стандартными растворами различной концентрации.

Например, для анализа новокаина берут аликвотную долю 2,0 мл и титрование проводят 0,02 М раствором натрия нитрита; сумму новокаина и эфедрина гидрохлорида определяют в аликвотной доле 0,5 мл и титрование проводят 0,1 н. раствором серебра нитрата. Для пересчета объема 0,02 М раствора натрия нитрита, эквивалентного 0,1 н. раствору серебра нитрата, объем натрия нитрита делят на пять. Объем раствора натрия нитрита при определении новокаина в 2,0 мл смеси будет в четыре раза превышать объем этого же титранта, пошедший на титрование новокаина в навеске, равной 0,5 мл смеси. Расчет по разности приобретает следующий вид:

Т.е. в данном случае необходимо сделать приведение к одному объему аликвотной доли и одной концентрации титрантов.

При использовании расчетов по разности необходимо максимально устранить неточности при определении сопутствующих ингредиентов (особенно если их три и более в составе одной смеси), так как допущенные ошибки существенно сказываются на результате количественного определения вещества, рассчитываемого по разности. Примером может служить пропись 2 ( жидкость Полосухина; состав см. выше).

При разработке схемы количественного анализа необходимо учесть, как определить по разности вещество, содержащееся в прописи в значительно большем количестве. Так, определение натрия тиосульфата проводят методом йодометрии, кальция хлорид титруют раствором трилона Б, а натрия хлорид определяют по методу Фольгарда. Количества натрия тиосульфата и кальция хлорида рассчитывают раздельно по объемам йода (V₁₂) и трилона Б (V_Tp.Б). Количество натрия хлорида рассчитывают по разности: (V_AGNO3 - V_NH4CNS) - (V₁₂ - V_TpB)

где V₁ - объем О, 1 н. раствора серебра нитрата, взятого в избытке, в мл;

V₂ - объем О, 1 н. раствора аммония роданида, пошедшего на титрование избытка серебра нитрата, в мл;

V₃ - объем О, 1 н. раствора йода, пошедшего на титрование 1 натрия тиосульфата) в мл;

V₄ - объем 0,01 М раствора трилона Б, пошедшего на титрование кальция хлорида, в мл.

Концентрация трилона Б выражена в молярных единицах, а остальных растворов в виде нормальной концентрации. Поскольку при титровании кальция хлорида раствором трилона Б значение «z» равно 2, необходимо молярную концентрацию трилона Б (С_M) перевести в нормальную (C_N) И только после этого объем трилона Б использовать при вычислении по разности:

Если при титровании разными методами эквиваленты анализируемых веществ меняются, важно правильно рассчитать количества титрантов. Примером служит пропись 17.

ПРОПИСЬ 17

Раствора кислоты

хлористоводородной 1% 200,0 мл

Кислоты аскорбиновой 1,0

Вначале определяют сумму кислот титрованием 0,1 н. раствором натрия гидроксида. При этом значение величины «z» при расчете молярной массы эквивалента М (1/z) для каждого вещества равно 1.

Количество натрия гидроксида эквивалентно сумме кислоты хлористоводородной и кислоты аскорбиновой. Далее для определения кислоты аскорбиновой полученный аскорбинат натрия титруют 0,1 н. раствором йода.

При титровании кислоты аскорбиновой 0,1 н. раствором йода значение величины «z» при расчете М (1/z) равно 2, а это означает, что на одну и ту же аликвотную долю смеси будет расходоваться 0,1 н. раствора йода в два раза больше, чем 0,1 н. раствора натрия гидроксида. Поэтому при расчете количества раствора, пошедшего на титрование кислоты хлористоводородной, из общего объема 0,1 н. раствора гидроксида натрия следует вычесть ¹/₂ объема 0,1 н. раствора йода, израсходованного на титрование кислоты аскорбиновой:

Содержание в лекарственных смесях веществ близких по химическому строению и свойствам (соли галогеноводородных кислот, сульфаниламиды и др.) затрудняет их раздельное определение общепринятыми титриметрическими методами. Как исключение в подобных случаях допускается применять средний ориентировочный титр (СОТ) для определения суммы веществ. СОТ это масса смеси определяемых веществ в граммах, соответствующая 1 мл титранта. Его величина зависит от значений титриметрических факторов пересчета ингредиентов смеси и соотношения этих веществ в лекарственной смеси.

Существует несколько способов расчета СОТ:

где C₁, C₂ …​С_n - концентрации веществ, входящих в лекарственную смесь;

Т₁, Т₂ …​ Т_n - титриметрические факторы пересчета (титры по определяемому веществу) веществ.

где С_N - концентрация титрованного раствора, используемого для титрования суммы ингредиентов.

где T₁ титр по определяемому веществу первого ингредиента;

Т₂ титр по определяемому веществу второго ингредиента;

а - прописанная масса первого ингредиента, в г;

b - прописанная масса второго ингредиента, в г.

обозначения см. формулу (22)

ПРОПИСЬ 18

Раствор Рингера:

Состав:

Натрия хлорида 0,9

Калия хлорида 0,02

Кальция хлорида 0,02

Натрия гидрокарбоната 0,02

Воды для инъекций до 100,0 мл

Натрия и калия хлориды раздельно определить в данной прописи методиками, принятыми в экспресс-анализе, невозможно (кальция хлорид определяют комплексиметрически). Сумму хлоридов натрия и калия рассчитывают по формуле:

где V_AGNO3 объем 0,1 н. раствора серебра нитрата, пошедший на титрование суммы хлоридов натрия, калия и кальция;

V_TpБ - объем трилона Б, пошедший на титрование кальция хлорида;

T_{AgNO3/NaCl+KCl} - средний ориентировочный титр (СОТ) при титровании натрия и калия хлоридов 0,1 н. раствором серебра нитрата.

Значение СОТ 0,1 н. раствора серебра нитрата для суммы натрия и калия хлоридов рассчитывают следующим образом:

Условный титр. Некоторые лекарственные вещества представляют собой комплексные соединения, состоящие из двух веществ (кофеин-бензоат натрия, эуфиллин, темисал и др.). Такие соединения в лекарственных смесях можно определять по входящим в них компонентам, содержание которых согласно требованиям ГФ и др. НД должно быть в строго определенных пределах.

Например, кофеин-бензоат натрия в экспресс-анализе чаще анализируют по бензоату натрия, которого в препарате должно быть 58 -62%. Если пользоваться титром 0,01441 г/мл, исходя из М.м. натрия бензоата (144,1 г/моль) и титрантом 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной, то в результате получим содержание натрия бензоата в лекарственной форме. Для пересчета на кофеин-бензоат натрия полученный результат нужно дополнительно поделить на фактическое содержание (массовую долю) натрия бензоата в кофеине-бензоате натрия.

Чтобы не делать громоздких расчетов, можно использовать так называемый условный титр, пересчитанный на препарат. Для кофеина-бензоата натрия его определяют по формуле:

где а - содержание натрия бензота в данном образце кофеина-бензоата натрия (в %);

0,01441 - масса натрия бензоата (в г), соответствующая 1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной.

Величина Т_условн. может значительно колебаться. При содержании в кофеине-бензоате натрия 58% натрия бензоата Т_{условн.} = 0,02484, а при 62% Т_{условн.} = 0,02324. Поэтому для определения Т_{условн.} необходимо знать содержание натрия бензоата в препарате.

Если таких данных нет, расчеты следует вести по среднему пределу содержания данного компонента в препарате. Так, при титровании 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной эуфиллина по этилендиамину (содержание которого в комплексе находится в пределах 14-18%) T_{условн.} равен:

где 0,003005 - масса этилендиамина (в г), соответствующая 1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной.

Коэффициент пересчета. При анализе комплексных соединений, состоящих из двух веществ, чаще пользуются коэффициентом пересчета на определяемое вещество. Коэффициент пересчета частное от деления массы (или 100%) всего комплексного соединения на массу (или массовую долю) определяемого вещества, являющегося компонентом комплекса. Например, если определять эуфиллин титрованием по тео-филлину (содержание в препарате составляет 80 85%), то коэффициент пересчета составит 1,212 (100 : 82,5). При расчете количественного содержания эуфиллина в лекарственной смеси полученный результат нужно умножить на данный коэффициент, а при количественном определении препарата по этилендиамину коэффициент пересчета на эуфиллин (при содержании этилендиамина 16%) составит 6,25 (100 : 16).

Предварительный расчет расхода титрованного раствора.

Предварительный расчет объема титрованного раствора (V_теорет), который должен быть затрачен на титрование массы (объема) лекарственной смеси, в экспересс-анализе имеет важное значение. Так, при составлении схемы анализа химик-аналитик должен четко представлять теоретические объем титранта, и если V_тeopeт составляет менее 0,5 мл, а массу (объем) аликвотной доли увеличить нельзя, следует сделать разведение исходного титрованного раствора. Условия выполнения количественного определения ингредиентов лекарственной смеси необходимо подбирать сучетом того, чтобы V_тeopeт составлял не менее 1 мл (чтобы не увеличивать ошибку определения).

Значение V_тeopeт можно рассчитать по формуле:

где m - содержание лекарственного вещества (в г) в 1 мл смеси.

Предварительный расчет массы (объема) лекарственной смеси, необходимый для анализа.

В целях экономии титрованного раствора и для повышения точности анализа перед титрованием целесообразно рассчитывать предварительную массу (объем) лекарственной смеси (а), чтобы при титровании был израсходован определенный объем стандартного раствора (V):

Обозначения см. формулу (1)

В порошках (мазях, суппозиториях) вместо 100% подставляют величину общей массы порошка (мази, суппозиториев), а вместо С% X в граммах (формула 4).

Составление схемы количественного определения ингредиентов смеси.

При разработке схемы анализа смеси целесообразно привести все существующие методики количественного определения (фармакопейные и нефармакопейные) каждого ингредиента смеси в отдельности. В качестве примера составим схему количественного определения ингредиентов прописи 19.

ПРОПИСЬ 19

Калия йодида 4,0

Натрия гидрокарбоната 2,0

Воды очищенной 200,0 мл

Как видно из приведенной таблицы, для калия йодида и натрия гидрокарбоната нет общих методов количественного определения, поэтому для их анализа можно применить любой из указанных методов.

Схема анализа:

Определение калия йодида:

Аликвотная доля → любой из указанных методов

Определение натрия гидрокарбоната:

Аликвотная доля → ацидиметрия (титрант - 0,1 н. раствор раствор кислоты хлороводородной).

Предварительные расчеты:

1. Расчет V_теорет стандартного раствора, который пойдет на титрование 1 мл лекарственной смеси.

Предположим, что для определения калия йодида используют метод аргентометрии по Фаянсу-Ходакову:

Для определения V_теорет необходимо рассчитать массу калия йодида в 1 мл смеси. 4,0 г калия йодида содержится в 200 мл смеси, следовательно 1 мл смеси содержит 0,02 г препарата. Отсюда:

2. Расчет аликвотной доли смеси, необходимой для количественного определения калия йодида.

Поскольку V_теорет 0,1 н. раствора серебра нитрата (необходимый для титрования 1 мл смеси) больше 1 мл, то оптимальный объем аликвотной доли смеси равен 1 мл.

Количественное определение натрия гидрокарбоната проводится методом ацидиметрии:

Каждый мл смеси содержит по 0,01 г натрия гидрокарбоната, поэтому:

3. Расчет аликвотной доли смеси, необходимой для количественного определения натрия гидрокарбоната.

Величина V_теорет 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной (необходимого для анализа 1 мл смеси) больше 1 мл, поэтому для анализа натрия гидрокарбоната необходимо взять 1 мл смеси.

Расчет количества ингредиентов смеси.

Количества калия йодида и натрия гидрокарбоната определялись методом прямого титрования, поэтому расчет проводят по формулам:

Для решения вопроса о доброкачественности лекарственной смеси полученный результат необходимо сопоставить с допустимыми нормами отклонений (см. приложение табл. ). Удобнее всего для этого рассчитать отклонение от прописанной массы (в %).

Допустим, что в анализируемой жидкой лекарственной смеси, приготовленной массо-объемным методом, прописано 4,0 г калия йодида, а при количественном определении найдено 3,85 г. Отклонение от прописанной массы (в %) можно рассчитать двумя способами:

Из приложения (табл. ) видно, что для массы от 2,0 до 5,0 г допускается отклонение ± 4%, т.е. данная лекарственная смесь приготовлена удовлетворительно.

Анализ смесей веществ со сходными химическими свойствами.

Анализ ингредиентов смесей без разделения.

Если в состав смеси входят лекарственные вещества, близкие по химическим свойствам или растворимости, то их можно анализировать без предварительного разделения, прибегая к различным дополнительным приемам.

В случае анализа жидких лекарственных форм, содержащих соли неорганических соединений, протекают реакции гидролиза, мешающие кислотно-основному титрованию других компонентов смеси. Для получения точных результатов соль неорганической природы удаляют из реакционной среды путем осаждения. Этот прием лежит в основе количественного определения кислоты борной в сочетании с цинка сульфатом.

ПРОПИСЬ 20

Раствора цинка сульфата 0,25% 10,0 мл

Кислоты борной 0,2

Для количественного определения цинка сульфата используют метод комплексонометрии. Ионы Zn²⁺ с комплексоном трилоном Б три хелатных цикла:

Кислоту борную определяют методом алкалиметрии. Однако в результате гидролиза цинка сульфата реакция среды становится кислой, что мешает определению кислоты борной. Поэтому цинка сульфат предварительно осаждают калия гексацианоферратом (II):

3 ZnSO₄ + 2 K₄[Fe(CN)₆] = K₂Zn₃₂↓ + 3 K₂SO₄

Затем кислоту борную титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида в присутствии глицерина (химизм см. пропись 25)

Методика. Цинка сульфат. К 1 мл раствора прибавляют 5 мл раствора аммиачного буферного раствора, 0,02 г индикаторной смеси кислотного хромчерного специального и титруют 0,01 М раствором трилона Б до синего окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,01 М раствора трилона Б соответствует 0,002876 г ZnSO₄.

Кислота борная. К 0,5 мл раствора прибавляют 2 мл свежепрокипяченной охлажденной воды, 8 капель раствора калия гексацианоферрата (II), 5 6 мл нейтрализованного по фенолфталеину глицерина и титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида до розового окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,006183 г Н₃ВO₃.

Пропись 15 (см. стр. 32) содержит лекарственные вещества, проявляющие восстановительные свойства (аскорбиновая кислота 0,1 г и глюкоза 0,5 г), определяемые титрованием стандартным раствором йода. Однако изменение рН среды делает возможным их последовательное определение в одной навеске.

Кислота аскорбиновая, как более сильный восстановитель окисляется йодом в нейтральной среде до кислоты дегидроаскорбиновой.

Оттитрованную жидкость используют для дальнейшего определения глюкозы методом обратной йодометрии. В полученный раствор добавляют щелочь и избыток стандартного раствора йода:

Образовавшийся натрия гипойодит окисляет глюкозу до натриевой соли кислоты глюконовой:

С₆Н₁₂O₆ + NaOI + NaOH = C₆₁₁O₇Na + NaI + H₂0

После добавления избытка раствора кислоты серной выделяется йод.

NaOI + NaI + H₂SO₄ = I₂ + Na₂SO₄ +H₂O

Следует учесть, что в данной реакции участвуют и йоди полученные ранее при окислении кислоты аскорбиновой в экви ном к ней количестве. Это обстоятельство находит отражение муле последующего расчета содержания глюкозы.

Выделившийся йод оттитровывают стандартным раствором тиосульфата:

I₂ + 2Na₂S₂O₃ = 2 NaI + Na₂S₄O₆

Методика. Кислота аскорбиновая. Растворяют 0,2 г порош 5 мл воды и титруют 0,1 н. раствором йода до по неисчезающего желтого окрашивания (раствор сохраняк дальнейшего определения глюкозы).

1 мл 0,1 н. раствора йода соответствует 0,008806 г кислоты аскорбиновой.

где 0,6 - масса одного порошка по прописи, в г;

0,2 - навеска порошка, в г.

Глюкоза. Оттитрованную жидкость количественно пере мерную колбу емкостью 25 мл, обмывая колбу для титрована Объем доводят водой до метки и перемешивают. В склянку с пр пробкой вносят 5 мл полученного раствора, 10 мл 0,1 н. раство 10 капель раствора натрия гидроксида. Склянку закрывают г перемешивают и ставят в темное место. Через 5 минут прибавляют 5 мл кислоты серной разведенной и выделившийся йод титруют 0,1 твором натрия тиосульфата до исчезновения синего окрашива: дикатор - крахмал).

где 10 - объем 0,1 н. раствора йода, взятого в избытке, в мл;

V_Na2S2O3 - объем 0,1 н. раствора натрия тиосульфата, пошедшего на титрование избытка раствора йода, в мл;

- объем 0,1 н. раствора йода, пошедшего на титрование кислоты аскорбиновой с учетом разбавления, в мл;

Т₁₂/глюкоза - титр 0,1 н. раствора йода по глюкозе равный 0,009909 г/мл;

25 - объем мерной колбы, в мл;

5 - объем аликвотной доли, в мл.

Определение галогенидов при совместном присутствии

Для определения йодидов в присутствии хлоридов (если хлориды находятся в виде соли с двухвалентным металлом, например кальция хлорид) можно использовать три способа титрования в различных комбинациях. Это комплексонометрия, методы осаждения и окислительно-восстановительного титрования. На схеме представлены различные варианты количественного определения йодидов в присутствии хлоридов кальция или др. двухвалентных металлов.

Расчет содержания лекарственных веществ проводят по разности (в случае суммарного титрования йодидов и хлоридов), или по формуле прямого титрования (если йодиды и хлориды определяют отдельно).

В экспресс-анализе для количественного определения йодидов и хлоридов часто используют сочетание приведенных титриметрических методов с рефрактометрией.

Рассмотрим приведенную схему титрования на примере прописи 21.

ПРОПИСЬ 21

Кальция хлорида 3,0 Калия

йодида 2,0

Воды очищенной 100,0 мл

Вариант I. Кальция хлорид определяют трилонометрически, а калия йодид по методу Фаянса с индикатором эозинатом натрия (хлорид-ионы не мешают титрованию с индикатором эозинатом натрия).

Методика. Кальция хлорид. К 2 мл микстуры прибавляют 4 5 мл аммиачного буферного раствора, 0,1 г индикаторной смеси или 5-7 капель раствора кислотного хром темно-синего и титруют 0,05 М раствором трилона Б до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05М раствора трилона Б соответствует 0,01095 г СаСl₂ · 6Н₂O

Калия йодид. К 2 мл микстуры прибавляют 1 мл разведенной кислоты уксусной, 3-5 капель раствора натрия эозината и титруют 0,1 н. раствором серебра нитрата до ярко-розового окрашивания осадка.

1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,01660 г KI

Аргентометрическое титрование йодидов можно проводить с применением внешнего индикатора нитрозо-крахмальной бумаги.

Вариант II. Кальция хлорид определяют трилонометрически, а калия йодид - методом аргетометрии с применением внешнего индикатора. Определение конечной точки титрования основано на реакции йодидов с нитритом натрия в кислой среде:

2NaNO₂ + 2 NaI + 2 H₂SO₄ = I₂ + 2 NO + 2 Na₂SO₄ + 2 H₂O

Титрование стандартным 0,1 н. раствором серебра нитрата проводят до тех пор, пока капля реакционной среды, нанесенная на нитрозо-крахмальную бумагу, не будет вызывать ее посинения вследствие выделения йода.

Для получения более точных результатов необходимо предварительно рассчитать объем 0,1 н. титрованного раствора серебра нитрата, который должен пойти на титрование взятой навески. Можно также провести вначале ориентировочное титрование.

В данном случае V_тeopет 0,1 н. раствора серебра нитрата, необходимый для титрования 1 мл микстуры с содержанием 0,02 г калия йодида, рассчитывают по формуле:

Следует отметить, что определению йодидов по реакции с натрия нитритом не мешают хлориды и бромиды.

Кроме приведенных вариантов аргентометрического титрования, возможно определять сумму калия йодида и кальция хлорида по методу Фольгарда или Фаянса (с индикатором бромфеноловым синим), а затем содержание калия йодида рассчитывать по разности между объемом титрованного раствора, израсходованным на титрование суммы галогенидов, и объемом трилона Б, пошедшим на титрование кальция хлорида:

Определение СаСl₂ · 6 Н₂O проводят трилонометрически (расчет - см. вариант I).

Вариант III. Иодкрахмальныи метод Кольтгофа используют для определения йодидов в присутствии хлоридов и бромидов. В реакционную смесь, содержащую йодиды, прибавляют 1 каплю 0,1 н. раствора калия йодата, раствор крахмала и раствор серной кислоты разведенной. В результате реакции образуется йод, окрашивающий крахмал в синий цвет:

5 I^- + IO₃^- + 6 Н⁺ = 3 I₂ + 3 Н₂O

Окрашивание йодкрахмального комплекса устойчиво лишь в присутствии йодид-ионов. Если их связать серебра нитратом, синяя окраска раствора исчезает. На резкость изменения окраски влияет количество прибавленной воды. В экспресс-анализе объем раствора должен быть около 15 мл. Метод дает хорошие результаты при титровании йодидов в присутствии хлоридов, если концентрация последних не превышает концентрацию йодидов более чем в три раза.

Метод также удобен при определении йодидов в присутствии алкалоидов пуринового ряда и других оснований, барбитуратов, оснований. Однако его нельзя применять для анализа, содержащих лекарственные вещества, с которыми может взаимодействовать йод (кислота аскорбиновая, натрия салицилат и др.).

В присутствии бромидов титрование затруднено, а переход окраски от синей через серую до желтой наступает не резко. Поэтому до прибавления раствора кислоты серной к реакционной смеси приливают 5 мл 10% раствора аммония карбоната.

Методика. Калия йодид. К 2 мл микстуры прибавляют 10-15 мл воды, 1 каплю 0,1 н. раствора калия йодата, 2 мл свежеприготовленного раствора крахмала и по каплям серную кислоту разведенную до появления синего окрашивания жидкости. Далее титруют 0,1 н. раствором серебра нитрата до перехода синего окрашивания в желтое.

1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,0166 г KI.

Расчеты содержания калия йодида и кальция хлорида шестиводного см. вариант I.

Вариант IV. Количественное определение обоих компонентов можно провести методом меркуриметрии в одной навеске.

Калия йодид определяют безындикаторным методом Кольтгофа, основанным на растворении оранжевого осадка ртути дийодида в избытке калия йодида с образованием бесцветного комплекса.

2 KI + Hg(N0₃)₂ = Hgl₂! + 2 KN0₃ Hgl₂ + 2 KI = K₂[HgI₄]

После того как все свободные йодиды перейдут в комплекс тетрайодмеркурата калия, избыточная капля титрованного раствора ртути (II) нитрата, вступая во взаимодействие с частью комплексного иона, вновь образует нерастворимый оранжевый осадок ртути дийодида, свидетельствующий о конце титрования.

K₂[HgI₄] + Hg(NO₃)₂ = 2 HgI₂↓ + 2 KNO₃

При определении без индикатора йодид-ионы взаимодействуют фактически до комплексного соединения K₂[HgI₄], поэтому в данном случае z = 2.

Для определения кальция хлорида к оттитрованной жидкости прибавляют в качестве индикатора раствор дифенилкарбазона и титруют стандартным раствором ртути (II) нитрата до фиолетового окрашивания. При этом ртути (II) нитрат сначала разрушает полученное ранее комплексное соединение:

K₂[HgI₄] + Hg(NO₃)₂ = 2 HgI₂↓ + 2 KNO₃

Затем взаимодействует с кальция хлоридом:

СаСl₂ + Hg(NO₃)₂ = HgCl₂ + Ca(NO₃)₂

Избыточная капля ртути (II) нитрата реагирует с дифенилкарбазоном, образуя комплекс фиолетового цвета:

Методика. Калия йодид. 2 мл микстуры титруют 0,1 н. раствором ртути (II) нитрата до появления не исчезающей красно-оранжевой мути.

1 мл 0,1 н. раствора ртути (II) нитрата соответствует 0,03320 г KI

где V_Hg(NO3)2 - объем 0,1 н. раствора ртути (II) нитрата, пошедший на титрование калия йодида (в мл).

Кальция хлорид. К оттитрованной жидкости прибавляют 5-7 капель раствора дифенилкарбазона, 1-2 капли раствора кислоты азотной разведенной и титруют 0,1 н. раствором ртути (И) нитрата до фиолетового окрашивания.

1 мл О, 1 н. раствора ртути (II) нитрата соответствует 0,01095 г CaCl₂·6 Н₂О

где V_Hg(N03)2 - объем 0,1 н. раствора ртути (II) нитрата, пошедший на титрование калия йодида, в мл;

V_1Hg(NO3)2 объем 0,1 н. раствора ртути (И) нитрата, пошедший на титрование суммы калия йодида и кальция хлорида, в мл

Титрование указанных галогенидов солями Hg²⁺ протекает легко, но если в состав смеси входят соли алкалоидов или других азотистых оснований, содержащих третичный или четвертичный атом азота, то образующийся при титровании комплекс K₂[HgI₄] действует по типу общеалкалоидного реактива Майера и, следовательно, может давать осадки.

Барбитураты и сульфаниламиды также образуют осадки с солями Hg²⁺, но при подкислении раствором кислоты азотной (по бромфеноловому синему) титрование возможно в их присутствии (лучше с добавлением эфира).

Соли Hg²⁺ способны восстанавливаться до металлической ртути (Е° Hg²⁺/Hg⁰ = + 0,854 v), если в лекарственную смесь входят сильные восстановители (кислота аскорбиновая, натрия тиосульфат и др.), поэтому меркуриметрическое титрование в их присутствии общепринятыми методиками невозможно. Влияние кислоты аскорбиновой можно исключить прибавлением эквивалентного количества титрованного раствора церия (IV) сульфата до появления неисчезающего желтого окрашивания.

Вариант V. Кальция хлорид определяют трилонометрически, а калия йодид йодкрахмальным методом (с применением в качестве титрованного раствора ртути (II) нитрата).

Механизм реакции аналогичен титрованию йодидов по методу Кольтгофа с применением в качестве титранта раствора серебра нитрата. Точку эквивалентности устанавливают по исчезновению окраски йодкрахмального комплекса, синяя окраска которого изменяется через буроватую до чистой розовато-оранжевой:

Титрованию калия йодида не мешают кислота борная, рибофлавин, эуфиллин, натрия бензоат, натрия гидрокарбонат, прозерин.

Методика. Калия йодид. К 2 мл микстуры прибавляют 2 мл воды, 1 каплю 0,1 н. раствора калия йодата, 0,5 мл раствора крахмала растворимого, по каплям серную кислоту разведенную до появления устойчивого синего окрашивания и титруют 0,1 н. раствором ртути (II) нитрата до перехода синего окрашивания (через бурое) в яркое розово-оранжевое.

1 мл 0,1 н. раствора ртути (II) нитрата соответствует 0,01660 г KI

Расчет содержания СаСl₂ · 6 Н₂O - см. вариант I.

Расчет содержания KI см. - вариант IV.

Помимо приведенных методик определения калия йодида методами осадительного титрования в экспресс-анализе широко применяются окислительно-восстановительные способы титрования.

Вариант VI. Кальция хлорид определяют трилонометрически, а калия йодид - методом йодатометрии.

Йодид-ионы окисляются калия йодатом в среде кислоты хлороводородной сначала до йода:

Затем выделившийся йод титруют до йодмонохлорида:

При расчете молярной массы эквивалента - М (1/z), z = 3.

Методика. К 1 мл смеси добавляют 5 мл раствора кислоты хлороводородной 1 : 1 (готовится из 37% раствора кислоты хлороводородной), 1 мл раствора крахмала растворимого и быстро титруют 0,1 н. раствором калия йодата до появления светло бурой окраски. Затем титрование проводят медленно, по каплям, до перехода окраски в лимонно-желтую.

1 мл 0,1 н. раствора калия йодата соответствует 0,005533 г KI.

Расчет содержания СаСl₂ • 6 Н₂0 см. вариант I.

Вариант VII. Кальция хлорид определяют трилонометрически, калия йодид - броматометрически. Йодид-ионы окисляются калия броматом в среде кислоты хлороводородной до йодмонохлорида:

При расчете молярной массы эквивалента - М (1/z), z = 2.

Методика. К 1 мл микстуры прибавляют 5 мл раствора кислоты хлороводородной 1 : 1 (готовится из 37% раствора кислоты хлороводородной), 1 мл раствора крахмала и титруют О, 1 н. раствором калия бромата до перехода бурой окраски раствора в лимонно-желтую.

1 мл 0,1 н. раствора калия бромата соответствует 0,0083005 г KI.

Расчет содержания СаСl₂ · 6 Н₂0 - см. вариант I.

Вариант VIII. Кальция хлорид определяют трилонометрически, калия йодид - методом перманганатометрии.

Йодид-ионы окисляются калия перманганатом в среде кислоты хлороводородной разведенной:

При расчете молярной массы эквивалента - М (1/z), z = 2.

Определению йодидов не мешает присутствие в лекарственных смесях других галогенидов, сульфатов, фосфатов, рибофлавина, тиамина бромида, глутаминовой кислоты, теофиллина, эуфиллина, кофеина-бензоата натрия, эфедрина гидрохлорида.

Мешают титрованию сильные восстановители: кислота аскорбиновая, натрия тиосульфат, цистеин, ароматические амины, фенолы и их производные и другие лекарственные вещества, которые могут реагировать с калия перманганатом или образующимся при титровании йодмонохлоридом.

Методика. К 1 мл микстуры прибавляют 5 мл раствора кислоты хлороводородной 1 : 1 (готовится из 37% раствора хлороводолрода) и титруют 0,1 н. раствором калия перманганата до появления светло-бурой окраски раствора. Затем прибавляют 1 мл раствора крахмала растворимого и снова титруют по каплям до перехода окраски в лимонно-желтую.

1 мл 0,1 н. раствора калия перманганата соответствует 0,0083005 г КI.

Вариант IX. Кальция хлорид определяют трилонометрически, калия йодид методом йодхлорметрии.

Сущность метода заключается в следующем: к аликвотной части микстуры, содержащей калия йодид, прибавляют избыток 0,1 н. раствора йодмонохлорида. При этом протекает реакция:

КI + ICl = I₂ + KCl

Количество выделившегося йода эквивалентно вступившим в реакцию йодид-ионам, поэтому при расчете молярной массы эквивалента - M(l/z), z = 1.

Для связывания избытка йодмонохлорида в реакционную среду прибавляют натрия салицилат:

Через несколько минут выделившийся йод оттитровывают 0,1 н. стандартным раствором натрия тиосульфата:

I₂ + 2 Na₂S₂O₃ = 2 Nal + Na₂S₄O₆

Йодхлорметрическому определению йодидов не мешают хлориды, но мешают бромиды.

Методика. К 1 мл смеси прибавляют избыток (10-20 мл) 0,1 н. раствора йодмонохлорида и взбалтывают. Затем прибавляют 100 мл воды и 5-10 мл 1% раствора натрия салицилата. Через 3-5 минут выделившийся йод титруют 0,1 н. раствором натрия тиосульфата.

Расчет содержания СаСl₂ · 6 Н₂0 - см. вариант I.

Вариант X. Анализ можно осуществить с использованием метода рефрактометрии. Вначале проводят трилонометрическое определение кальция хлорида шестиводного, а затем определяют показатель преломления лекарственной смеси относитфьно воды.

Расчет содержания СаСl₂ · 6 Н₂O - см. вариант I.

Расчет содержания KI см. формулу 97.

Для количественного определения хлоридов в сочетании с бромидами в виде солей одновалентных металлов бромид-ионы окисляют калия перманганатом до свободного брома и далее удаляют образовавшийся бром путем превращения его в пентабромацетон:

После этого в растворе остаются только хлорид-ионы, которые определяют по методу Фольгарда.

Для определения бромидов сумму галогенидов титруют по методу Мора или определяют меркуриметрическим методом.

Примером служит анализ прописи 22.

ПРОПИСЬ 22

Натрия бромида

Натрия хлорида по 3,0

Воды очищенной до 100,0 мл

Определение натрия хлорида проводят после окисления бромид-ионов калия перманганатом и переведения образовавшегося брома в связанное состояние в виде пентабромацетона. Избыток калия перманганата удаляют водорода пероксидом и проводят определение натрия хлорида по методу Фольгарда.

В другой навеске определяют сумму галогенидов аргентометрическим или меркуриметрическим методами и расчет натрия бромида осуществляют по разности количеств титрантов первого и второго титрований.

Методика. Натрия хлорид. К 1 мл микстуры прибавляют 3-5 мл воды, по 3 мл серной кислоты разведенной и ацетона и по каплям 5% раствор калия перманганата до устойчивого в течение 10 минут розового окрашивания. Через 10 минут избыток калия перманганата удаляют осторожным прибавлением по каплям 3% раствора водорода пероксида. К обесцвеченному раствору прибавляют 10 мл 0,1 н. серебра нитрата, 15-20 капель раствора квасцов железоаммониевых и титруют 0,1 н. раствором аммония роданида до буровато-оранжевого окрашивания раствора над осадком.

1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,005844 г NaCl.

Натрия бромид.

1 мл О, 1 н. раствора ртути (II) нитрата соответствует 0,01029 г NaBr

где V₁- объем О, 1 н. раствора серебра нитрата или О, 1 н. раствора ртути (11) нитрата, пошедший на титрование суммы галогенидов, в мл;

k₁ - поправочный коэффициент к титрованным растворам серебра нитрата или ртути (П) нитрата.

Более сложной задачей является анализ лекарственных смесей, содержаiцих одновременно йодид-, бромид- и хлорид-ионы. В некоторых из подобных смесей содержат йоды и бромиды в виде солей одновалентных металлов, а хлориды - в виде солей с двухвалентными металлами. Схемы анализа подобных смесей могут быть различными. Особый интерес при этом представляет сочетание методов осаждения и окислительно-восстановительных методов (см. схему 2).

Более простой вариант титрования основан на различии окислительновосстановительных свойств йодидов и бромидов. Йодид как более сильный восстановитель окисляется стандартным раствором натрия нитрита (добавляют избыток титранта) до свободного йода. Затем избыток натрия нитрита удаляют с помощью мочевины. Выделившийся в эквивалентном к йодиду количестве йод оттитровывают стандартным раствором натрия тиосульфата:

2 KI + 2 NaNO₂ + 4 НСl = 2 NaCl + 2 КСl + I₂ + 2 H₂0 + 2 NO

2 NaNO₂ + H₂N-CO-NH₂ + 2 HCl = 2 NaCl + 2 N₂ + CO₂ + 3 H₂O

I₂ + 2 Na₂S₂O₃ = 2 Nal + Na₂S₄O₆

Предложенную схему иллюстрирует анализ прописи 23.

ПРОПИСЬ 23

Калия йодида

Калия бромида по 4,0

Раствора кальция хлорида из 10,0 - 200,0 мл

Кальция хлорид определяют методом трилонометрии.

Калия бромид определяют методом рефрактометрии (см. формулу 97).

Калия йодид определяют методом йодометрии (заместительное титрование).

Методика. Калия йодид. К 1 мл микстуры прибавляют 5-6 капель кислоты серной разведенной) 0,04 г мочевины и медленно по каплям при частом взбалтывании 2 мл 0,1 М раствора натрия нитрита и оставляют на 5-1О минут в темном месте в закрытой колбе. Затем прибавляют 0,1 г калия йодида для растворения выделившегося йода и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания. В конце титрования прибавляют 2-3 капли крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,01660 г КI

Кальция хлорид. 1 мл раствора помещают в мерный цилиндр емкостью 10 мл и объем доводят водой до метки. К 2 мл полученного раствора прибавляют 2 мл аммиачного буферного раствора, 0,02 г индикатора кислотного хром темно-синего и титруют 0,05 М раствором трилона Б до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора трилона Б соответствует 0,01095 г СаСl₂ · 6Н₂О

Калия бромид. Определяют рефрактометрически, см. формулу 97.

Анализ лекарственных смесей, содержащих лекарственные вещества с различными кислотно-основными и окислительно-восстановительными свойствами

Если два инrредиецта смеси обладают кислотными свойствами, а один из них является восстановителем, то возможно количественное определение в одной навеске. Примером такой лекарственной смеси является пропись 24.

ПРОПИСЬ 24

Кислоты глутаминовой 0,3

Кислоты аскорбиновой 0,1

Для количественного определения ингредиентов проводят последовательное титрование вначале суммы кислот стандартным раствором натрия гидроксида, а затем йодометрическим методом в той же аликвотной доле определяют кислоту аскорбиновую.

Расчет содержания кислоты глутаминовой проводят по разности титрований с учетом эквивалентных объемов титрантов, когда количество 0,1 н. раствора йода, пошедшего на титрование кислоты аскорбиновой в два раза больше, чем количество 0,1 н. раствора натрия гидроксида, израсходованного на такую же массу кислоты аскорбиновой.

Реакции кислоты аскорбиновой с натрия гидроксидом и йодом -см. пропись 15 (стр. 29 и 54).

Методика. Кислота глутаминовая и кислота аскорбиновая. 0,1 г порошка растворяют в 5 мл воды, добавляют 2 капли раствора нейтрального красного и титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида до желтого окрашивания.

Кислота аскорбиновая. К оттитрованной жидкости прибавляют крахмал и титруют 0,1 н. раствором йода до синего окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора йода соответствует 0,008806 г кислоты аскорбиновой.

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,01471 г C₅H₉NO₄ (кислоты глутаминовой).

Определение натрия гидрокарбоната и натрия тетрабората также можно провести в одной навеске на основании того, что при ацидиметрическом титровании смеси образуется эквивалентное натрия тетраборату количество кислоты борной, которое определяется методом алкалиметрии.

Примером является пропись 25.

ПРОПИСЬ 25 Натрия хлорида 0,2

Натрия гидрокарбоната

Натрия тетрабората по 0,4

Воды очищенной до 40,0 мл

Смесь титруют стандартным раствором кислоты хлороводородной, объем которой соответствует сумме натрия гидрокарбоната и натрия тетрабората:

NaHCO₃ + НСl = NaCl + CO₂↑ + Н₂O

Na₂B₄O₇ + 2 НСl + 5 Н₂O = 4 H₃BO₃ + 2 NaCl

Выделившуюся борную кислоту в присутствии глицерина титруют стандартным раствором натрия гидроксида:

Количество 0,1 н. раствора натрия гидроксида используют для расчета натрия тетрабората. А натрия гидрокарбонат определяют по разности между объемами стандартных растворов кислоты хлороводородной и натрия гидроксида, учитывая, что объем 0,1 н. раствора натрия гидроксида. пошедшего на титрование кислоты борной (эквивалентной натрию тетрабората) в два раза превышает объем 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной, израсходованной на титрование натрия гидрокарбоната.

Натрия хлорид в данной смеси определят методом аргентометрии.

Методика. Натрия хлорид. К 1 мл раствора прибавляют 3 - 4 капли раствора бромфенолового синего и по каплям кислоту уксусную разведенную до прекращения выделения пузырьков углерода (IV) оксида и появления зеленовато-желтого окрашивания и титруют 0,1 н. раствором серебра нитрата до окрашивания осадка в фиолетовый цвет.

1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,005844 г NaCl.

Натрия тетраборат и натрия гидрокарбонат. К 1 мл раствора прибавляют 3 мл свежепрокипяченной охлажденной воды, 2 3 капли метилового оранжевого и титруют 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной до появления розового окрашивания.

Оттитрованный раствор нагревают до кипения (для удаления углекислоты), охлаждают, прибавляют 2 мл нейтрализованного по фенолфталеину глицерина и титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида.

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,009534 г Na₂B₄O₇10 · Н₂O.

Содержание натрия гидрокарбоната определяют по формуле:

1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,008400 г NaHCO₃ (натрия гидрокарбоната).

Расчет содержания ингредиентов смеси по разности возможен с использованием двух и более титрованных растворов, как, например, в прописи 26.

ПРОПИСЬ 26

Кислоты аскорбиновой 0,2

Пиридоксина гидрохлорида 0,05

Кислоты никотиновой 0,02

Сумму трех кислот аскорбиновой, никотиновой и хлороводородной (пиридоксина гидрохлорид является солью слабого основания и сильной кислоты) определяют алкалиметрически с применением 0,1 н. раствора натрия гидроксида.

Кислоту аскорбиновую (как восстановитель) определяют методом йодометрии в отдельной навеске 0,1 н. раствором йода.

Пиридоксина гидрохлорид определяют аргентометрически.

Расчет содержания кислоты никотиновой проводят по разности титрований с учетом эквивалентных объемов титрантов.

Методика. Кислота аскорбиновая, кислота никотиновая, пиридоксина гидрохлорид. Точную навеску, соответствующую массе одного порошка, помещают в мерную колбу емкостью 50 мл, растворяют в 10 мл воды, добавляют 1-2 капли нейтрального красного и титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида до желтого окрашивания. Объем оттитрованного раствора доводят водой до метки (раствор А).

Кислота аскорбиновая. К 10 мл раствора А прибавляют 1 мл раствора крахмала и титруют 0,1 н. раствором йода до синего окрашивания.

1 мл О, 1 н. раствора йода соответствует 0,008806 г кислоты аскорбиновой.

где а - масса навески,в г;

10,0 объем аликвотной части, в мл;

50,0 - объем разведения, в мл;

0,27 масса порошка по прописи.

Пиридоксина гидрохлорид. К 10 мл раствора А прибавляют 2-3 капли бромфенолового синего, по каплям кислоту уксусную разведенную до получения зеленовато-желтого окрашивания и титруют 0,1 н. раствором серебра нитрата до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,02056 г C₈H₁₁NO₃ • HCl (пиридоксина гидрохлорида).

Содержание кислоты никотиновой в граммах на один порошок рассчитывают по формуле:

где V_NaOH/5 объем 0,1 н. раствора натрия гидроксида, пошедший на титрование суммы ингредиентов с учетом последовательного титрования лекарственных веществ, в мл.

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,01231 г C₆H₅O₂N (кислоты никотиновой).

Определение ингредиентов смесей с использованием различий в кислотно-основных свойствах

Если в состав смеси входят вещества, отличающиеся по своим кислотным или основным свойствам, то их определение возможно в одной пробе методом нейтрализации путем последовательного титрования с различными индикаторами. Таким образом могут быть определены смеси, содержащие кислоты, основания, а также соли, образованные сильными основаниями и слабыми кислотами или сильными кислотами и слабыми основаниями.

Известно, что при титровании сильных кислот и сильных оснований можно применять любые индикаторы, предназначенные для метода нейтрализации и имеющие интервал перехода окраски от рН 4 до рН 10, так как в результате реакции образуется вода и негидролизующаяся соль и реакция среды раствора становится нейтральной.

При добавлении избытка титрованного раствора концентрация ионов Н₃O⁺ или ОН^- в растворе быстро возрастает, что приводит к резкому изменению цвета индикатора.

При титровании слабых кислот, слабых оснований или солей, подвергающихся гидролизу, следует подбирать индикатор таким образом, чтобы среднее значение рН интервала перехода окраски индикатора совпало с рН среды в конечной точке титрования или находилось вблизи его.

При титровании сильных кислот сильными основаниями (и наоборот) вблизи конца титрования происходит резкий скачок рН. При титровании слабых кислот, слабых оснований или их солей скачок рН значительно меньше. В этих случаях для выбора индикатора рассчитывают значение рН в точке эквивалентности с использованием констант ионизации по следующим формулам:

где рК - отрицательный десятичный логарифм константы ионизации;

С - концентрация соли или кислоты, образующихся в конце титрования, г-моль/л.

Таким образом, при титровании смесей слабых кислот или оснований, или солей возможно последовательное - ступенчатое - титрование с использованием различных индикаторов при наличии двух резких скачков рН. Такое раздельное титрование возможно, если отношение величин констант диссоциации компонентов смеси не меньше 10³ - 10⁴. Если это отношение меньше, ступенчатое титрование невозможно.

При выборе индикаторов для последовательного титрования необходимо учитывать вклад каждого компонента в суммарную величину рН раствора.

Расчет рН в первой точке эквивалентности nроводят по формуле:

Для второй точки эквивалентности расчет проводят по формулам 27, 28, 29 с учетом концентрации вещества, образующегося в конце второго титрования.

При кислотно-основном титровании смесей веществ, близких по свойствам, эквивалентную точку лучше устанавливать потенциометрически (индикаторный электрод - стеклянный; электрод сравнения - каломельный или хлор-серебряный).

Установление точки эквивалентности с помощью потенциометра дает возможность с большей точностью и воспроизводимостью, чем индикаторное титрование, анализировать лекарственные вещества в сильно окрашенных жидкостях (например, определять соли алкалоидов и азотистых оснований в присутствии метиленового синего), исключать индикаторную ошибку, особенно при титровании разбавленных растворов.

Кривая потенциометрического титрования, позволяющая судить о ходе изменения рН в процессе титрования, может быть использована и при подборе индикаторов для определения ингредиентов смеси, особенно если в одной пробе проводят титров.ание по разным индикаторам. Зная величины рН, соответствующие эквивалентным точкам для каждого вещества, легко подобрать кислотно-основной индикатор.

Большие возможности в определении близких по химическим свойствам веществ дает метод кислотно-основного титрования в среде неводных растворителей. С помощью дифференцирующих растворителей (кислота уксусная ледяная, ангидрид уксусный, диметилформамид и их смеси с хлороформом, диоксаном, бензолом) можно добиться значительного различия в кислотно-основных свойствах веществ, титруемых вместе. Изменение величин констант ионизации анализируемых веществ с помощью неводных растворителей позволяет потенциометрически фиксировать конец титрования каждого из веществ без разделения смеси на составные компоненты.

Определение смесей кислот

Большинство лекарственных веществ, относящихся к кислотам, являются слабыми кислотами.

При титровании слабых кислот стандартными растворами щелочей образуются соли, подвергающиеся гидролизу, в результате чего получаются растворы со значением рН больше 7. Выбор индикатора, изменяющего цвет вблизи точки эквивалентности, определяется значением рН раствора соли, образующейся при титровании.

Значения рН растворов солей слабых кислот и сильных оснований вычисляют по формуле 27.

Пропись 27 является примером смеси лекарственных веществ, обладающих в разной степени выраженными кислотными свойствами.

ПРОПИСЬ 27

Кислоты ацетилсалициловой 0,3 г

Фенобарбитала 0,05 г

Кислота ацетилсалициловая как вещество, обладающее более сильными кислотными свойствами (рК_а = 3,48), титруется раствором щелочи первой (см рис. 1):

Фенобарбитал имеет значение рК_а = 7,43. Значение рН в первой точке эквивалентности вычисляют по формуле:

Этой величине рН соответствует индикатор метиловый красный (интервал изменения окраски 4,2 - 6,3).

Для определения второй точки эквивалентности (соответствующей фенобарбиталу) необходимо рассчитать значение рН раствора натриевой соли фенобарбитала, образующейся в результате второго титрования (см. рис. 1):

Такой расчет возможен только по конкретной методике.

Методика. 0,2 г порошка растворяют в 10 мл нейтрализованного по тимолфталеину спирта и титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида и титруют с индикатором метиловым красным до желтого окрашивания.

рН раствора натриевой соли фенобарбитала вычисляют по формуле 27:

Для определения концентрации натриевой соли фенобарбитала необходимо сделать дополнительные расчеты:

Теоретический расчет показывает, что на связывание кислоты ацетилсалициловой и фенобарбитала должно расходоваться 9,51 мл (на первое титрование) и 1,23 мл (на второе титрование) 0,1 н. раствора натрия гидроксида. Общий объем раствора после титрования составит - 20,74 мл (9,51 + 10 + 1,23 мл). Отсюда молярную концентрацию натриевой соли фенобарбитала рассчитывают следующим образом:

Этой величине рН соответствует индикатор тимолфталеин (интервал изменения окраски 9,3 - 10,5).

Методика. Кислота ацетилсалициловая. 0,2 г порошка растворяют в 10 мл 95% спирта, прибавляют 5 - 6 капель раствора метщювого красного и титруют О, 1 н. раствором натрия гидроксида до желтого окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,018016 г C₉H₈O₄ (кислоты ацетилсалициловой).

где V₁ - объем 0,1 н. раствора натрия гидроксида, пошедший на титрование кислоты ацетилсалициловой по индикатору метиловому красному.

Фенобарбитал. К оттитрованному раствору прибавляют 2 - 3 капли раствора тимолфталеина и титруют О, 1 н. раствором натрия гидроксида до появления синего окрашивания.

1 мл О, 1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,02322 г С₁₂Н₁₂N₂O₃ (фенобарбитала).

где V₂ - объем 0,1 н. раствора натрия гидроксида, пошедший на титрование фенобарбитала по тимолфталеину.

Определение смесей оснований

Органические основания, применяющиеся в медицине, представляют собой слабые основания. При титровании слабых оснований растворами сильных минеральных кислот образуются гидролизующиеся соли, рН растворов которых меньше 7. Выбор индикатора для фиксирования конечной точки титрования определяется значением рН раствора соли, образующейся при титровании.

При расчете рН следует учесть, что для оснований приводят значение рК_b, которое связано с рК_а соотношением:

pК_а = 14 - рК_b (31)

Рассмотрим титрование смеси лекарственных веществ, обладающих основными свойствами, на примере прописи 28, содержащей кодеин и амидопирин.

ПРОПИСЬ 28

Кодеина 0,015

Амидопирина 0,25

Кодеин как более сильное основание (рК_b = 6,05) титруется стандартным раствором кислоты первым (см. рис. 1)

Значение рН в первой точке эквивалентности рассчитывают по формуле 30 с учетом соотношения по формуле 31:

где рК_b1 - значение рК_b кодеина, равное 6,05; рК_b2 - значение рК_b амидопирина, равное 9,0

Этой величине рН соответствует область изменения окраски индикатора бромтимолового синего (6,0 - 7,6).

Для определения второй точки эквивалентности (при титровании амидопирина) необходимо рассчитать рН раствора образующегося гидрохлорида амидопирина по реакции (см. рис. 1):

Определение значения pН проводят на основе методики: 0,05 г по рошка растворяют в 1 мл спирта, добавляют 5 мл воды и титруют кодеин 0,01 н., а амидопирин 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной.

рН раствора гидрохлорида амидопирина вычисляют по формуле 28:

Для определения концентрации гидрохлорида амидопирина необходимо сделать дополнительные расчеты:

Теоретический расчет показывает, что на титрование кодеина и амидопирина должно быть израсходовано 0,88 мл 0,01н. раствора кислоты хлороводородной и 2,04 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной. Общий объем раствора после титрования составит 8,92 мл (0,88 + 2,04 + 1,0 + 5,0). Отсюда молярную концентрацию гидрохлорида амидопирина можно вычислить следующим образом:

Значение рН в точке эквивалентности при титровании амидопирина попадает в интервал перехода окраски индикатора бромфенолового синего (рН 3,0 - 4,6).

Методика. Кодеин. 0,05 г порошка растворяют в 1 мл спирта, прибавляют 1 - 2 капли раствора бромфенолового синего, 5 мл воды до ясного синего окрашивания и титруют 0,01н. раствором кислоты хлороводородной до появления желтого с зеленоватым оттенком окрашивания.

1 мл 0,01н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,003174 r C₁₈H₂₁NO₃ • Н₂O (кодеина).

Амидопирин. К оттитрованной жидкости прибавляют 3-4 капли раствора бромфенолового синего до фиолетового окрашивания раствоpa и титруют 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной до появления золотисто-желтого окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,02313 r C₁₃H₁₇N₂O (амидопирина).

Определение смесей солей, образованных сильными основаниями и слабыми кислотами

Соли сильных оснований и слабых кислот в результате гидролиза имеют в водных растворах щелочную реакцию среды. Это позволяет количественно их определять титрованием стандартными растворами кислот.

Для выбора индикатора также необходимо учитывать рН раствора в точках эквивалентности. Расчет рН в первой точке эквивалентности проводят по формуле 30, а рН раствора слабой кислоты, образующейся в процессе титрования - по формуле 29.

Примером смеси солей сильных оснований и слабых кислот является пропись 29.

ПРОПИСЬ 29

Натрия гидрокарбоната

Натрия бензоата по 4,0

Настоя травы термопсиса из 0,6 -200,0 мл

Для экспресс-анализа обычно берут навеску, содержащую по 0,1 - 0,15 г натрия гидрокарбоната и натрия бензоата и растворяют в 5-10 мл воды. В 5 мл данной жидкой лекарственной формы содержание лекарственных веществ находится в указанных пределах.

Титрование ингредиентов стандартным раствором кислоты хлороводородной осуществляется согласно уравнениям реакций:

Несмотря на то, что отношение константы ионизации кислоты бензойной (К_а = 6,35 · 10^-5) к константе ионизации кислоты угольной (К_а = 4,2 · 10^-7) меньше чем 10^-4, ступенчатое титрование данной смеси, тем не менее, возможно, благодаря тому, что кислота угольная удаляется из смеси в процессе титрования, разлагаясь с выделением СO₂.

Значение рН в первой точке эквивалентности составляет:

Поэтому при определении натрия гидрокарбоната используют в качестве индикатора метиловый красный (интервал перехода окраски при рН 4,2 - 6,3; см. рис. 1).

Для определения значения рН раствора кислоты бензойной, соответствующей второй точке эквивалентности, необходимо рассчитать теоретический расход титранта (объем аликвотной части микстуры - 5 мл):

Теоретический объем 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной, эквивалентный количеству натрия гидрокарбоната в 5 мл микстуры:

Общий объем раствора после титрования будет равен 23,85 мл (6,95 + 11,9 + 5,0).

Молярную концентрацию кислоты бензойной в полученном растворе рассчитывают следующим образом:

Накопление в растворе кислоты бензойной приводит к изменению цвета индикатора раньше достижения точки эквивалентности. Поэтому в реакционную среду добавляют эфир, в который экстрагируется кислота бензойная.

В качестве индикатора используют метиловый оранжевый, интервал изменения окраски которого наиболее близок для определения кислоты бензойной (рН 3,0 - 4,4 ). Следует также учесть, что метиловый оранжевый не растворяется в эфире (в отличие от метилового красного) и удобен для фиксирования точки эквивалентности реакции, протекающей в водной фазе.

Методика. Натрия гидрокарбонат. 5 мл микстуры помещают в склявку с притертой пробкой, прибавляют 2 капли раствора метилового красного и титруют О, 1 н. раствором кислоты хлороводородной до ярко-розового окрашивания (V₁).

1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,0084 r NaHCO₃

Натрия бензоат. К оттитрованиому раствору прибавляют 10 - 15 мл эфира, 2 капли раствора метилового оранжевого и титруют О, 1 н. раствором кислоты хлороводородной при энергичном взбалтывании до ярко-розового окрашивания водного слоя (V₂).

1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,01441 r C₇H₅NaO₂ (натрия бензоата).

Разделение смесей на основании различной растворимости компонентов

Для разделения смесей лекарственных веществ на основе их различной растворимости в воде и органических растворителях используют разнообразные приемы.

Твердые лекарственные формы (порошки, таблетки) для разделения на ингредиенты обрабатывают соответствующим растворителем и фильтруют. В зависимости от дальнейшей методики анализа растворитель удаляют (отгоняют или выпаривают) или проводят определение в полученном растворе.

Примером могут служить смеси фенилсалицилата с гексаметилентетрамином и висмута нитратом основным.

ПРОПИСЬ 30

Фенилсалицилата

Гексаметилентетрамина по 0,25

Гексаметилентетрамин легко растворим в воде и спирте, растворим в хлороформе, очень мало растворим в эфире.

Фенилсалицилат практически нерастворим в воде, растворим в спирте и растворах щелочей, легко растворим в хлороформе, очень легко - в эфире.

Для количественного определения компонентов смеси навеску порошка взбалтывают с водой и фильтруют. Остаток промывают водой и определяют гексаметилентетрамин в фильтрате ацидиметрически.

C₆H₁₂N₄ + HCl = C₆H₁₂N₄ · HCl

Фенилсалицилат определяют в нерастворившемся остатке по общей методике анализа для сложных эфиров.

ПРОПИСЬ 31

Висмута нитрата основного

Фенилсалицилата по 0,25

Висмута нитрат основной практически нерастворим в воде и спирте, легко растворим в кислотах азотной и хлороводородной. Растворимость фенилсалицилата см. пропись 30.

Так как фенилсалицилат растворим в органических растворителях, смесь разделяют, извлекая его эфиром. После отгонки растворителя фенилсалицилат определяют по сложно-эфирной группе.

После извлечения фенилсалицилата висмута нитрат основной определяют в остатке трилонометрически.

При анализе жидких лекарственных форм разделение веществ проводят методом экстракции органическим растворителем, несмешивающимся с водой (эфир, хлороформ) в нейтральной среде или при других значениях рН. Такой подход к анализу является классическим.

Согласно закону Нернста коэффициентом распределения вещества называется отношение концентраций, в которых определяемое вещество распределяется между двумя несмешивающимися фазами:

где К_H (Х) - коэффициент распределения вещества Х, не зависящий от концентрации;

С_α (Х), C_β - молярные концентрации растворенного вещества в фазах α и β соответственно.

Он зависит от природы вещества и растворителя, величины рН, температуры, но не зависит от исходной концентрации распределяющегося вещества и от наличия сопутствующих соединений.

Однократное извлечение анализируемого вещесtва органическим растворителем будет более полным, если объем водной фазы взят по возможности меньшим, а органического растворителя - большим. Лучшие результаты дает многократное извлечение относительно малыми порциями органического растворителя.

Для исключения nопадания водной фазы в органическую (а вместе с ней и сопутствующих ингредиентов) последнюю обезвожиеают высушенным при 120° С натрия сульфатом.

Извлечение органическими растворителями позволяет селективно определять вещества в смеси, близкие по химическим свойствам, определять два, а иногда и три компонента в одной пробе, повышает точность экспресс-анализа веществ, находящихся в смеси в малых количествах.

Способы извлечения веществ зависят от их природы.

Соли алкалоидов и других органических оснований в большинстве своем растворимы в воде и практически нерастворимы в органических растворителях, не смешивающихся с водой. Поэтому с помощью эфира, хлороформа можно отделять растворимые в них соединения (амидопирин, резорцин, фенобарбитал, кислоту ацетилсалициловую, бромкафору и др.).

Некоторые соли алкалоидов и других оснований могут растворяться в органических растворителях. Например, папаверина гидрохлорид растворяется в хлороформе, но практически не растворяется в эфире. Часто сопутствующие ему вещества (амидопирин, фенобарбитал, кислота ацетилсалициловая) растворимы в обоих растворителях. Поэтому для отделения папаверина гидрохлорида от указанных соединений следует применять в качестве экстрагента эфир) а не хлороформ. Примером может служить пропись 32.

ПРОПИСЬ 32

Папаверина гидрохлорида 0,03

Фенобарбитала 0,02

Сахара 0,3

Папа6ерина гидрохлорид медленно растворим в воде, растворим в хлороформе, нерастворим в эфире.

Фенобарбитал очень мало растворим в холодной воде, трудно растворим в кипящей воде и хлороформе, легко растворим в спирте и в растворах щелочей, растворим в эфире.

Сахар растворим в воде и нерастворим в органических растворителях.

Для определения смеси навеску порошка взбалтывают с эфиром, фильтруют, проверяя полноту извлечения фенобарбитала по отсутствию пятна после испарения части извлечения. Эфир отгоняют, остаток растворяют в спирте и фенобарбитал определяют алкалиметрически (см. пропись 27).

Остаток после извлечения фенобарбитала эфиром растворяют в воде и определяют папаверина гидрохлорид алкалиметрически:

Основания алкалоидов растворимы в органических растворителях и мало растворимы в воде. Исключение составляют эфедрин, пилокарпин, кодеин, кофеин, растворяющиеся в воде. Некоторые органические основания могут растворяться и в воде, и в органических растворителях (амидопирин, антипирин, гексаметилентетрамин), причем растворимость в эфире, хлороформе может быть различной.

Примером может служить схема анализа прописи 33.

ПРОПИСЬ 33

Раствора амидопирина 1 % - 100,0 мл

Кофеина-бензоата натрия 0,5

Гексаметилентетрамина 1,0

Амидопирин растворим в эфире и хлороформе. Кофеин-бензоат натрия и гексаметилентерамин нерастворимы в эфире.

Данную смесь трех органических оснований можно разделить, экстрагируя амидопирин эфиром (при этом кофеин-бензоат натрия и гексаметилентетрамин из водного раствора не экстрагируются). Амидопирин после отгонки растворителя определяют ацидиметрически (см. пропись 28).

Кофеин-бензоат натрия и гексаметилентерамин в водном растворе титруют в сумме ацидиметрически (индикатор - метиловый оранжевый) в присутствии эфира:

Далее кислоту бензойную оттитровывают в эфйрном слое стандартным раствором натрия гидроксида и объем титранта пересчитывают на содержание кофеина-бензоата натрия. Содержание натрия бензоата в кофеине-бензоате натрия находится в пределах 58 - 62%, поэтому при определении данного лекарственного вещества в лекарственных формах по натрия бензоату титр рассчитывают по содержанию последнего в кофеине-бензоате натрия. Так, при содержании натрия бензоата 62% условный титр рассчитывают следующим образом:

где 0,01441 - количество натрия бензоата (г), соответствующее 1 мл О, 1 н. раствора кислоты хлороводородной.

Гексаметилентетрамин рассчитывают по разности объемов стандартных растворов кислоты и щелочи.

Основания алкалоидов чаще извлекают хлороформом из растворов,. подщелоченных натрия гидроксидом, натрия карбонатом или аммиаком. При экстракции основания морфина или других оснований, содержащих в структуре фенольный гидроксил, а также теобромина, теофиллина для подщелачивания нельзя применять гидроксиды натрия или калия, так как при этом образуются соли, хорошо растворимые в воде. Не рекомендуется использовать щелочи и при извлечении оснований, имеющих сложно-эфирную группу, так как последняя может легко гидролизоваться.

Некоторые органические основания (например, кофеин) не образуют с кислотами прочных солей и могут экстрагироваться хлороформом из подкисленных растворов.

Фенолы, хорошо растворимые в органических растворителях (резорцин, кислота салициловая и др.), в присутствии алкалоидов и их солей следует извлекать из подкисленных растворов. Например, броматометрическое определение резорцина нельзя проводить в присутствии новокаина или дикаина, поэтому необходимо резорцин предварительно извлечь эфиром (см. пропись 6, содержащую новокаина 0,05 г, резорцина 0,1 г, кислоты борной 0,2 r и воды для инъекций до 10,0 мл).

Новокаин очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, мало растворим в хлороформе, практически нерастворим в эфире.

Резорцин очень легко растворим в воде, спирте, легко растворим в эфире, очень мало растворим в хлороформе.

Кислота борная растворима в 25 частях воды, в 4 частях кипящей воды, в 25 частях спирта и медленно в 7 частях глицерина.

Резорцин из подкисленного раствора экстрагируют эфиром и после отгонки последнего определяют броматометрически:

Водный слой используют для определения новокаина и кислоты борной. Новокаин определяют нитритометрически (химизм - см. пропись 16).

Количество кислоты борной рассчитывают по разности объемов стандартных растворов натрия гидроксида и натрия нитрита, так как новокаин (как соль хлороводородной кислоты) также взаимодействует со щелочью:

Химизм реакции между кислотой борной и натрия гидроксидом в присутствии глицерина - см. пропись 25.

Способность фенолов образовывать растворимые в воде феноляты используют при разделении полиалкалоидных смесей. Так, при добавлении натрия гидроксида к водному раствору гидрохлоридов морфина и хинина основание хинина переходит в эфирный (или хлороформный) слой, а натриевая соль морфина (по фенольному гидроксилу) остается в водной фазе.

Соли карбоновых кислот, сульфациламидов, барбитуратов легко растворимы в воде и при щелочной реакции среды не извлекаются органическими растворителями. Поэтому в их присутствии можно извлекать хлороформом основания алкалоидов или другие органические основания.

Кислотные формы барбитуратов растворимы в эфире и других органических растворителях. При отделении фенобарбитала от сопутствующих веществ в порошках чаще всего используют эфир.

Солевые формы барбитуратов из микстур также экстрагируют эфиром после переведения их в кислотные формы с помощью растворов минеральных кислот.

ПРОПИСЬ 34

Микстура Равкина:

Настоя травы пустырника из 12,О - 200,О мл

Натрия бромида 3,0

Барбитал-натрия 2,0

Барбитал-натрий экстрагируют эфйром из подкисленного раствора микстуры. Отделяют эфирный слой, пропуская его через безводный натрия сульфат. Эфир отгоняют, остаток растворяют в спирте и проводят алкалиметрическое титрование кислотной формы барбитала (химизм см. пропись 27 на примере фенобарбитала).

Натрия бромид определяют по методу Фольгарда (см. пропись 21 на примере кальция хлорида и калия йодида).

Аналогичным образом можно перевести в эфир карбоновые кислоты, полученные при подкислении их солей. Так, при титровании стандартным раствором кислоты хлороводородной натрия бензоата и натрия салицилата выделяются бензойная и салициловая кислоты, для экстрагирования которых необходимо применять эфир (см. пропись 11, содержащую натрия салицилата и натрия бензоата по 2,0 г и воды очищенной до 100,0 мл).

Сумму натриевых солей ароматических карбоновых кислот титруют 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной в присутствии эфира:

Натрия салицилат (как фенол) определяют броматометрически или йодхлорметрически.

Количество натрия бензоата рассчитывают по разности между ацидиметрическим и окислительно-восстановительным титрованием с учетом различных величин молярных масс эквивалентов.

Если в порошках одновременно находятся растворимые и практически не растворимые в воде вещества, в экспресс-анализе для их разделения можно использовать воду. Так отделяют анальпщ от анестезина, кислоты ацетилсалициловой, фенацетина и ряда других лекарственных веществ.

Иногда воду, применяемую для разделения, насыщают малорастворимым компонентом ( «фенацетиновая вода»), чтобы практически исключить его растворение. Фильтр, на котором проводят разделение, должен быть плотным, чтобы не было проскока частиц малорастворимого вещества. Прием с использованием «фенацетиновой воды» применяют для разделения фенацетина и кофеина (пропись 35).

ПРОПИСЬ 35

Кофеина 0,05

Фенацетина 0,3

Кофеин медленно растворим в воде (1:60), легко растворим в горячей воде и хлороформе, трудно растворим в спирте, очень мало растворим в эфире.

Фенацетин очень мало растворим в воде, трудно растворим в кипящей воде, растворим в спирте, мало растворим в эфире, хлороформе.

Навеску смеси обрабатывают водой, насыщенной фенацетином. Насыщенную фенацетином воду следует употреблять только после 24-часового настаивания, после чего в нее добавляют определенное количество натрия бензоата для лучшего растворения кофеина (в виде кофеина-бензоата натрия). Смесь взбалтывают и фильтруют. Остаток на фильтре (фенацетин) растворяют в хлороформе, высушивают и определяют гравиметрическим методом.

Фильтрат подщелачивают раствором натрия гидроксида, экстрагируют из него кофеин хлороформом и определяют гравиметрически.

С помощью воды можно разделять и некоторые неорганические вещества (например, натрия гидрокарбонат и магния оксид). Многие из них также практически нерастворимы в органических растворителях (магния оксид, цинка сульфат, натрия тетраборат, висмута нитрат основной и др.) и при анализе с использованием эфира (хлороформа) остаются на фильтре. Примером служит пропись 36.

ПРОПИСЬ 36

Магния оксида

Натрия гидрокарбоната по 0,25

Магния оксид практически нерастворим в воде, свободной от углекислоты, и в спирте. Растворим в разведенных хлороводородной, серной, уксусной кислотах.

Натрия гидрокарбонат растворим в воде, нерастворим в спирте и эфире.

Навеску порошка взбалтывают с водой и фильтруют. Натрия гидрокарбонат количественно определяют в фильтрате ацидиметрически.

Магния оксид переносят с фильтра в колбу, растворяют в 0,1 н. растворе кислоты хлороводородной, добавляют аммиачный буферный раствор и определяют лекарственное вещество комплексонометрически.

Разделение смесей веществ, близких по растворимости, но отличающихся по кислотно-основным свойствам

Для разделения смесей лекарственных веществ, растворимых в одних и тех же растворителях, но имеющих различные кислотно-основные свойства, используют химические реакции, в результате которых один из компонентов превращается в производное, обладающее иными химическими свойствами и иной растворимостью. С этой целью чаще проводят реакции нейтрализации или гидролиза.

Известно, что органические кислоты и основания при взаимодействии с растворами щелочей или кислот переходят в соответствующие соли, вследствие чего меняется их растворимость в органических растворителях. В связи с этим для разделения лекарственных смесей, содержащих вещества I и III, I и V, Ш и V групп (см. стр. 10), используют экстракцию органическим растворителем из кислого или щелочного раствора.

Так как для анализа лекарственных веществ I и 111 групп часто используют методы кислотно-основного титрования, иногда удобно сочетать разделение смесей этих веществ с одновременным титрованием одного из компонентов. Таким образом из qмеси веществ, растворенных в органическом растворителе, экстрагируют титрованным раствором кислоты или щелочи вещества основного или кислотного характера в присутствии соответствующего ицдикатора.

Максимального разделения компонентов можно достигнуть, добавив для подавления гидролиза солей избыток тихранта после достижения точки эквивалентности. Для уменьшения ошибок при определении конкретного лекарственного вещества, остающегося в органическом растворителе, необходимо тЩательно разделять несмешивающиеся фазы растворителей и органический слой тщательно промывать водой до нейтральной реакции.

Анализ смеси кислоты ацетилсалициловой и кофеина иллюстрирует вышесказанное.

ПРОПИСЬ 37

Кислоты ацетилсалициловой 0,025

Кофеина 0,05

Для разделения ингредиентов используют извлечение кофеина хлороформом из щелочного раствора, в котором остается натриевая соль кислоты ацетилсалициловой. Предварительное разделение компонентов данной прописи необходимо, так как йодометрическому определению кофеина мешает кислота ацетилсалициловая.

Для определения кислоты ацетилсалициловой навеску смеси помещают в децительную воронку, прибавляют воду, хлороформ, 2 - З капли раствора фенолфталеина и быстро титруют, хорошо взбалтывая, 0,1 н. раствором натрия гидроксида. Быстрое титрование необходимо, чтобы предотвратить гидролиз сложно-эфирной группы, а хорошее взбалтывание - для полного перевода кислоты ацетилсалициловой в водную фазу в виде натриевой соли. После достижения точки эквивалентности добавляют несколько избыточных капель титрованного раствора щелочи для предотвращения гидролиза натриевой соли кислоты ацетилсалициловой и хлороформный слой отделяют от водного (химизм реакции кислоты ацетилсалициловой и натрия гидроксида см. пропись 27).

Для определения кофеина хлороформ отгоняют и определяют лекарственное вещество в сухом остатке йодометрически:

C₈H₁₀N₄O₂ + 2 I₂ + HI = C₈H₁₀N₄O₂ • HI • I₄

Определение кофеина (как азотистого основания) в смеси с лекарственным веществом нейтрального характера (фенацетином) можно рассмотреть на примере прописи 35 (сравните обе методики). Компоненты смеси обладают примерно одинаковой растворимостью в воде и органических растворителях. При этом кофеин является слабым основанием, а фенацетин обладает нейтральным характером. Для разделения компонентов фенацетин подвергают кислотному гидролизу, в результате которого образуется n-фенететидин. Последний, обладая основными свойствами, образует соль, растворимую в воде и нерастворимую в органических растворителях.

Для определения кофеина навеску смеси кипятят с раствором кислоты хлороводородной и кофеин извлекают хлороформом. После отгонки растворителя кофеин определяют йодометрически (химизм см. пропись 37) или ацидиметрически в неводной среде:

C₈H₁₀N₄O₂ + НСlO₄ = C₈H₁₁N₄O₂ • Сlo₄

Подкисленный водный раствор, оставшийся после извлечения кофеина содержит гидрохлорид n-фенетидина, который может быть определен нитритометрически (химизм см. пропись 16 на примере новокаина).

Разделение лекарственных веществ в мягких лекарственных формах

Для идентификации и количественного определения ингредиентов мягких лекарственных форм в экспресс-анализе используют методы, позволяющие проводить исследование в присутствии основы. В ряде случаев определяемое вещество приходится извлекать подходящим растворителем, чтобы освободиться от основы, мешающей анализу. Основа в зависимости от природы может оказывать активное действие на скорость и полноту высвобождения лекарственного вещества.

Животные жиры (ланолин), растительные масла (масло какао, подсолнечное, персиковое и другие косточковые масла), углеводороды (вазелин, вазелиновое масло) относятся к числу гидрофобных основ. Они не растворяются в воде и этаноле, но хорошо растворяются в неполярных растворителях (хлороформ, эфир, гексан, бензол).

Для достижения полноты отделения лекарственного вещества важно правильно подобрать растворитель, учитывая при этом свойства не только анализируемого вещества, но и основы. Резорцин, калия йодид, кислота борная, димедрол и другие водорастворимые вещества можно извлекать водой, тогда как анестезин, оксиды цинка, магния и другие лучше извлекать кислотой хлороводородной разведенной в виде соответствующих гидрохлоридов. Так поступают при извлечении анестезина и цинка оксида из мягкой лекарственной формы (пропись 38).

ПРОПИСЬ 38

Анестезина 5,0

Цинка окиси

Талька по 10,0

Аэросила 5,0

Масла подсолнечного до 100,0

Методика. Анестезин. 0,5 г мази помещают в коническую колбу, добавляют 5 мл кислоты хлороводородной разведенной, 10 мл воды и нагревают на кипящей водяной бане в течение 5 7 минут, охлаждают и фильтруют через вату в коническую колбу. К фильтрату добавляют 0,5 г калия бромида, 2 капли раствора тропеолина 00,1 каплю раствора метиленового синего и титруют 0,1 М раствором натрия нитрита при температуре 18-20° С, прибавляя его по 0,3 мл в начале титрования, а в конце титрования (за 0,2 мл до точки эквивалентности) по одной капле до перехода красно-фиолетового окрашивания в голубое (химизм см. пропись 16 на примере новокаина).

Параллельно проводят контрольный опыт на индикаторы.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,01652 г C₉H₁₁NO₂ (анестезина).

Цинка окись, 0,5 г мази помещают в коническую колбу, прибавляют 5 мл кислоты хлороводородной разведенной, 10 мл воды, кипятят на водяной бане в течение 10 минут, охлаждают и фильтруют через вату в коническую колбу. Фильтрат нейтрализуют раствором аммиака (индикатор метиловый красный), прибавляют 5 7 мл аммиачного буферного раствора, 0,05 г индикаторной смеси кислотного хром-черного специального и титруют 0,05 М раствором трилона Б до появления синего окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора трилона Б соответствует 0,004069 г ZnO.

При подборе какой-либо кислоты в качестве растворителя следует помнить о свойствах анализируемых веществ. Например, хлористоводородные соли висмута мало растворимы. Поэтому для извлечения ксероформа, висмута нитрата основного, дерматола необходимо использовать кислоту азотную.

Количественный анализ суппозиториев, содержащих новокаин и ксероформ иллюстрирует пропись 39.

ПРОПИСЬ 39

Экстракта белладонны 0,015

Новокаина

Ксероформа по 0,12

Масла какао 1,0

Новокаин. К 0,3 г навески суппозиториев прибавляют по 0,2 мл хлороформа и кислоты хлороводородной разведенной, 10 мл воды и перемешивают в течение 3-5 минут до растворения основы и новокаина. Затем прибавляют 0,2 г калия бромида, 2 капли раствора тропеолина 00,1 каплю раствора метиленового синего и титруют 0,1 М раствором натрия нитрита при 18-20° С, прибавляя его по 0,3 мл в минуту в начале титрования, а в конце титрования (за 0,2 мл, до точки эквивалентности) по одной капле в минуту до перехода красно-фиолетового окрашивания в голубое (химизм см. пропись 16).

Параллельно проводят контрольный опыт на индикаторы.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,02728 г C₁₃H₂₀N₂O₂ • НС1 (новокаина).

Ксероформ. 0,3 г навески суппозиториев помещают в коническую колбу, добавляют 2 мл азотной кислоты разведенной, 5 мл пергидроля и кипятят в течение 5-7 минут. Смесь охлаждают, прибавляют 10 мл воды, 2 мл хлороформа, 3-4 капли раствора ксиленолового оранжевого и титруют 0,05 М раствором трилона Б до перехода красного окрашивания водного слоя в желтое.

1 мл 0,05 М раствора трилона Б соответствует 0,01165 г Bi₂O₃, коэффициент пересчета на ксероформ 1,91.

Растворимость фурациллина повышается в присутствии натрия хлорида, поэтому для извлечения лекарственного вещества из мягкой лекарственной формы используют 0,9% раствор натрия хлорида.

Для анализа левомицетина вещество обрабатывают раствором кислоты хлороводородной с добавлением цинковой пыли. В результате нитрогруппа в молекуле лекарственного вещества восстанавливается до первичной ароматической аминогруппы и растворимость образовавшегося соединения значительно повышается в присутствии кислоты.

ПРОПИСЬ 40

Мазь левомицетиновая 0,5%

Методика. К 1,5 г мази прибавляют 5 мл кислоты хлороводородной разведенной и нагревают на водяной бане до расплавления основы. После охлаждения водное солянокислое извлечение отделяют от основы и фильтруют. Экстракцию кислотой повторяют еще два раза по 5 мл, фильтруя через тот же фильтр.

К фильтрату добавляют 2 мл кислоты хлороводородной концентрированной, 0,25 г цинковой пыли и нагревают на водяной бане 15 минут. После охлаждения жидкость фильтруют. Колбу и фильтр промывают 40 мл воды, присоединяя ее к основному фильтрату и далее проводят нитритометрическое определение аминопроизводного левомицетина.

Титрант 0,02 М раствор натрия нитрита; химизм - см. пропись 16 на примере новокаина).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02 М раствора натрия нитрита соответствует 0,006462 г C₁₁H₁₂Cl₂N₂O₅ (левомицетина).

При анализе мазей, содержащих оксиды металлов, карбонаты, анестезин и др. вещества, растворимость которых повышается в присутствии кислот, последние нужно добавлять в необходимом количестве и нагревать на водяной бане не только до расплавления основы, но несколько дольше, чтобы исследуемое вещество провзаимодействовало с кислотой.

Более длительно нагревают мягкую лекарственную форму и при извлечении веществ, мало растворимых в воде (кислота борная, кислота салициловая, левомицетин и др.).

В полученном извлечении исследуют вещества с помощью соответствующих реакций подлинности и методов количественного определения.

В мягких лекарственных формах определение чаще проводят в присутствии основы. Исследуемые вещества растворяют при нагревании на водяной бане в соответствующих растворителях (вода, кислоты и др.). После охлаждения прибавляют эфир или хлороформ для растворения основы и титруют.

Основы часто не бывают нейтральными. Поэтому при кислотно-основном титровании желательно ставить контрольный опыт или учитывать поправку, установленную на данную партию основы.

Титрование окислительно-восстановительными методами в присутствии основы не рекомендуется, так как последняя также может вступать во взаимодействие с титрантом.

Как и в экстемпоральной рецептуре, состав таблеток, имеющих несколько лекарственных веществ, весьма разнообразен. Здесь также встречаются лекарственные вещества из разных химических групп и, кроме того, содержатся вспомогательные вещества. Таким образом, таблетки, содержащие только одно лекарственное вещество, в сочетании со вспомогательными веществами можно рассматривать как лекарственную смесь.

В разделе, посвященном анализу экстемпоральной рецептуры, представлена пропись 15, содержащая 0,1 г кислоты аскорбиновой и 0,5 г глюкозы. Поскольку смесь аналогичного состава выпускается и в виде таблеток, представляется целесообразным сравнить методики их анализа.

ПРОПИСЬ 47

Таблетки кислоты аскорбиновой 0,1 г с глюкозой

Состав на одну таблетку:

Кислоты аскорбиновой 0,1 г

Глюкозы 0,877 г

Вспомогательных веществ до получения таблетки массой 1,0 г

Подлинность кислоты аскорбиновой подтверждают реакциями с раствором серебра нитрата (химизм см. пропись 15 стр. 29,54) и с 2,6-дихлорфенолиндофенолятом натрия (по исчезновению синей окраски реактива):

Глюкозу в присутствии кислоты аскорбиновой рационально определять общей для моносахаридов реакцией Селиванова. Здесь при взаимодействии глюкозы с раствором кислоты хлороводородной концентрированной происходит дегидратация молекулы глюкозы с образованием 5-гидроксиметилфурфурола, который при дальнейшем нагревании со спиртовым раствором резорцина дает окрашенный в красный цвет продукт конденсации:

Подлинность. Кислота аскорбиновая.

Глюкоза. К 0,2 г порошка растертых таблеток добавляют 0,5 мл кислоты хлороводородной концентрированной и 0,5 мл 1% спиртового раствора резорцина, нагревают на кипящей водяной бане; раствор окрашивается в красный цвет.

Количественное определение. Как указывалось ранее (стр. 54), количественное определение кислоты аскорбиновой и глюкозы проводят в одной навеске методом йодометрического титрования в нейтральной и щелочной средах. В лекарственной форме заводского изготовления для повышения точности анализа целесообразно применение раздельного определения лекарственных веществ. Глюкозу определяют йодометрически в щелочной среде (химизм см. стр. 60). В другой навеске проводят количественное определение кислоты аскорбиновой методом йодатометрии:

Методика. Кислота аскорбиновая. Около 0,5 г (точная навеска) порошка растертых таблеток растворяют в 20 мл воды, прибавляют 0,5 мл 1% раствора калия йодида, 2 мл раствора крахмала и 1 мл 2% раствора кислоты хлороводородной и титруют 0,1 н. раствором калия йодата до появления стойкого светло-синего окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора калия йодата соответствует 0,008806 г С₆Н₈O₆ (кислоты аскорбиновой).

Глюкоза. Около 0,12 г (точная навеска) порошка растертых таблеток растворяют в 10 мл воды, прибавляют 25 мл 0,1 н. раствора йода, затем медленно, по одной капле через каждые 2-3 секунды, при перемешивании прибавляют 10 мл 1% раствора натрия гидроксида и оставляют на 5 минут в темном месте. Через 5 минут прибавляют 5 мл кислоты серной разведенной и избыток йода оттитровывают 0,1 н. раствором натрия тиосульфата (индикатор крахмал).

Параллельно проводят контрольный опыт.

где V - разность в объемах 0,1 н. раствора натрия тиосульфата между контрольным опытом и основным опытом, в мл;

с - содержание кислоты аскорбиновой в таблетке, в г;

а - навеска препарата , в г;

b - средняя масса таблетки, в г;

0,008806 - фактор пересчета (титр) 0,1 н. раствора йода на кислоту аскорбиновую, г/мл;

0,009908 - фактор пересчета (титр) 0,1 н. раствора йода на (С₆Н₁₂О₆ · Н₂О) - глюкозу, г/мл.

В данной формуле выражение показывает объем 0,1н. раствора иода, пошедший на титрование кислоты аскорбиновой, содержащейся в одной таблетке.

В прописи 48 - таблетки эфедрина гидрохлорида и димедрола для детей - содержатся лекарственные вещества, относящиеся к одному классу - солям азотистых оснований, обладающих близкими химическими свойствами (см. пропись 12, также содержащую данные лекарственные вещества вместе с эуфиллином и глюкозой). Для анализа указанных таблеток оптимально сочетание химических и физикохимических методов.

ПРОПИСЬ 48

Таблетки эфедрина гидрохлорида и димедрола пo 0,01 г для детей

Состав на одну таблетку:

Эфедрина гидрохлорида 0101 г

Димедрола 0,01 г

Вспомогательных веществ до получения таблетки массой 0,05 г

Подлинность эфедрина гидрохлорида подтверждают образованием комплексного соединения с меди (II) сульфатом, экстрагируемого из щелочного раствора эфиром, а димедрола - получением окрашенной оксониевой соли (см. пропись 12).

Методика. Эфедрина гидрохлорид. 0,5 г порошка растертых таблеток взбалтывают с 5 мл воды в течение двух минут и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,1 мл раствора меди (II) сульфата и 1 мл раствора натрия гидроксида; появляется синее окрашивание, быстро переходящее в фиолетовое. При взбалтывании полученного раствора с 1 мл эфира эфирный слой окрашивается в фиолетово-красный цвет, а водный слой сохраняет синее окрашивание.

Димедрол. 0,1 г порошка растертых таблеток взбалтывают с 10 мл хлороформа в течение двух минут, хлороформное извлечение фильтруют в фарфоровую чашку и хлороформ выпаривают досуха. К остатку прибавляют 2 мл смеси, состоящей из 1 мл кислоты азотной концентрированной и 9 мл кислоты серной концентрированной; появляется красное окрашивание. Затем прибавляют по каплям при постоянном перемешивании и охлаждении 5 мл воды; окраска переходит в коричневую, а затем в оранжевую. При взбалтывании полученного раствора с 3 мл хлороформа слой органического растворителя окрашивается в фиолетовый цвет, переходящий в коричнево-красный.

Количественное определение. Оба вещества в своих молекулах имеют одинаковые хромофорные группы и, следовательно, поглощают УФ-излучение в одной области спектра. Вследствие этого их нельзя анализировать с помощью УФ-спектрофотометрии при совместном присутствии, а разделение этих лекарственных веществ крайне затруднительно из-за сходных физикохимических свойств. Однако димедрол не влияет на образование комплексного соединения эфедрина с ионом Сu²⁺ с последующей экстракцией в органический растворитель. Это позволяет провести экстракционно-фотометрическое определение эфедрина гидрохлорида в присутствии димедрола. При этом в качестве органического экстрагента, в отличие от методики определения подлинности лекарственного вещества, используют не быстро улетучивающийся эфир, а н-бутанол.

Методика. Около 0,25 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в делительную воронку вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл воды и перемешивают в течение 2 минут. К полученному раствору прибавляют 4 мл раствора натрия гидроксида, 2 мл раствора меди (II) сульфата и перемешивают в течение 1 минуты. Затем прибавляют с помощью пипетки 10,0 мл н-бутилового спирта и взбалтывают в течение 5 минут. Водный слой отбрасывают, а к спиртовому раствору в делительной воронке прибавляют 1 г прокаленного безводного натрия сульфата и взбалтывают в течение 2 минут. Затем раствор фильтруют через сухой бумажный фильтр с 1 г прокаленного безводного натрия сульфата.

Первые порции фильтрата отбрасывают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 505 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно проводят извлечение из 10 мл раствора стандартного образца эфедрина гидрохлорида.

В качестве раствора сравнения применяют н-бутиловый спирт.

Приготовление раствора стандартного обраща эфедрина гидрохлорим. 0,25 г (точная навеска) эфедрина гидрохлорида и 0,70 г (точная навеска) сахара растворяют в воде в мерной колбе емкостью 50 мл.

1 мл раствора стандартного образца содержит 0,0050 г эфедрина гидрохлорида.

Содержание эфедрина гидрохлорида в одной таблетке (в г) вычисляют по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого спиртового извлечения;

Ао - оптическая плотность спиртового извлечения из раствора стандартного образца эфедрина гидрохлорида;

0,005 - масса эфедрина гидрохлорида в 1 мл раствора стандартного образца, в г;

b - средняя масса таблетки, в г;

а - навеска порошка растертых таблеток, в г;

10 - объем спиртового извлечения, в мл.

Для определения димедрола предварительно проводят определение суммы лекарственных веществ как гидрохлоридов азотистых оснований и далее рассчитывают содержание димедрола по разности. Лучшим методом: для анализа суммы лекарстьвенных веществ в условиях контрольно-аналитической лаборатории является кислотно-основное титрование в неводной среде.

Методика. Около 0,2 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 20 мл кислоты уксусной ледяной и нагревают на кипящей водяной бане в течение 2 минут. После полного охлаждения прибавляют 5 мл предварительно нейтрализованного раствора ртути (II) ацетата и титруют О, 1 н. раствором кислоты хлорной до сине-зеленого окрашивания (индикатор - кристаллический фиолетовый).

1 мл О, 1 н. раствора кислоты хлорной соответствует 0,02918 г димедрола (C₁₇H₂₁NO ·НСд).

Содержание димедрола в одной таблетке (в r) вычисляют по формуле:

где V - объем О, 1 н. раствора кислоты хлорной, пошедшей на титрование навески, в мл;

b - средняя масса таблетки, в г;

а - масса навески порошка растертых таблеток, в г;

с - содержание эфедрйна гидрохлорида в одной таблетке, в г;

0,02017 - фактор пересчета (титр) О, 1 н. раствора кислоты на эфедрина гидрохлорид, в г/мл.

Чем больше лекарственных веществ содержится в дозированной лекарственной форме, тем более очевидными становятся преимущества применяемых для их анализа современных физико-химических методов. Примером может служить пропись 49 (таблетки «Пенталгин ICN» ).

ПРОПИСЬ 49

Таблетки «Пенталгин ICN»

Состав на одну таблетку:

Анальгина 0,3 r

Парацетамола 0,3 г

Кофеина 0,05 г

Кодеина фосфата 0,008 r

Фенобарбитала 0,01 г

Подлинность парацетамола подтверждают с помощью метода дифференциальной спектрофотометрии, потому, что остальные препараты поглощают в той же области УФ-спектра.

Методика. (см. количественное определение, метод I).

Испытание подлинности анальгина основано на выраженных восстановительных свойствах данного лекарственного вещества. Так, анальгин при взаимодействии с йодом в кислой среде, сначала обесцвечивает реактив и только при добавлении большого избытка йода, по завершении окисления, дает осадок бурого цвета.

Методика. 0,035 г порошка растертых таблеток помещают в пробирку, прибавляют 2 мл О, 1 М раствора натрия гидроксида, перемешивают З минуты, затем прибавляют 0,2 мл кислоты серной разведенной, 0,03 мл раствора крахмала, перемешивают. При добавлении к полученному раствору 0,5 мл 0,1 М раствора йода раствор после перемешивания должен быть бесцветным. Параллельно проводят контрольный опыт: в пробирку прибавляют 2 мл О, 1 М раствора натрия гидроксида, 0,2 мл кислоты серной разведенной, 0,03 мл раствора крахмала и О, 1 мл О, 1 М раствора йода. Раствор после перемешивания должен быть окрашен в интенсивный синий цвет.

Все лекарственные вещества, входящие в состав таблеток «Пенталгин ICN», можно идентифицировать с помощью хроматографии в током слое сорбента.

Методика. 0,2 г порошка растертых таблеток помещают в коническую колбу с притертой пробкой, прибавляют 0,1 мл спирта и 4 мл хлороформа и встряхивают в течение 3 минут, фильтруют через бумажный фильтр. 0,005 мл полученного раствора наносят на линию старта пластинки Kieselgel 60 F₂₅₄ «Мегск» размером 5 х 15 см. Рядом наносят 0,005 мл раствора свидетелей (~ 20 мкг парацетамола, -15 мкг анальгина, ~ 12,5 мкг кофеина, ~ 2,5 мкг фенобарбитала, ~ 2 мкг кодеина фосфата). Пластинку подсушивают на воздухе в течение 10 минут и помещают в предварительно насыщенную камеру со смесью растворителей: ацетон - толуол - диэтиламин (19,5 : 5 : 0,5). Когда фронт подвижной фазы дойдет до линии финиша, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 минут и просматривают в УФ- свете при 254 нм. Пятна на хроматограмме вытяжки из препарата по интенсивности окраски и положению должны соответствовать пятнам на хроматограмме раствора свидетелей.

Еще более надежным способом идентификации компонентов данной лекарственной смеси является высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Времена удерживания пиков основных компонентов на хроматограмме препарата должны соответствовать временам удерживания на хроматограмме раствора их рабочих стандартных образцов (см. количественное определение).

Количественное определение. Метод 1. По этой методике анальгин определяют йодометрически, парацетамол - методом УФспектрофотометрии, а кофеин, кодеина фосфат и фенобарбитал - с помощью метода ВЭЖХ.

Йодометрическому определению анальгина, обладающему выраженными восстановительными свойствами, не мешают другие компоненты таблеток.

Методика. Анальгин. Около 0,35 г (точная. навеска) порошка растертых таблеток помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 20 мл О, 1 н. раствора натрия гидроксида и перемешивают в течение 5 минут.

Непосредственно перед началом титрования в колбу приливают 2 мл кислоты серной разведенной, 0,3 мл раствора крахмала и титруют О, 1 н. раствором йода при интенсивном перемешивании до появления неисчезающего в течение 1 минуты синего окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 н. раствора йода соответствует 0,01757 r анальгина (C₁₃H₁₆N₃O₄SNa · Н₂О).

Расчет содержания анальгина (в г/ 1 таблетку) проводят по формуле:

Парацетамол. Около 0,1 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида, встряхивают в течение 10 минут, объем раствора доводят до метки 0,1 н. раствором натрия гидроксида и перемешивают. Полученный раствор фильтруют, отбрасывая первые 15 мл фильтрата.

По 1 мл фильтрата помещают в две мерные колбы вместимостью 50 мл. В первую колбу прибавляют 5 мл 1н. раствора натрия гидроксида, объем раствора доводят водой до метки, перемешивают (раствор I). Во вторую колбу прибавляют 5 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,5 и 1 мл 0,1 М раствора кислоты хлороводородной, объем раствора доводят водой до метки и перемешивают (раствор II).

Измеряют оптическую плотность раствора I испытуемого препарата относительно раствора II испытуемого препарата на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 267 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Параллельно проводят измерение оптической плотности раствора I РСО парацетамола относительно раствора II РСО парацетамола.

Массу парацетамола в одной таблетке в граммах вычисляют по формуле:

где А₁ - оптическая плотность раствора I порошка растертых таблеток;

А₀ - оптическая плотность раствора I РСО парацетамола;

a₀ - навеска РСО парацетамола, (в г);

а₁ - навеска порошка растертых таблеток, (в г);

b - средняя масса таблетки, (в г).

Приготовление растворов I и II РСО парацетамола. Около 0,075 г (точная навеска) парацетамола, отвечающего требованиям ФС, помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 0,1 н. раствора натрия гироксида, встряхивают до растворения, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и переманивают.

В две мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 1 мл полученного раствора. В первую колбу прибавляют 5 мл 1 М раствора натрия гидроксида, а во вторую - 5 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,5 и 1 мл 0,1 М раствора кислоты хлороводородной, доводят объемы растворов в обеих колбах водой до метки и перемешивают (соответственно растворы I и II РСО парацетамола).

Кофеин, кодеина фосфат, фенобарбитал. Определение проводят методом ВЭЖХ.

Условия разделения:

колонка из нержавеющей стали 25 х 0,46 см;

сорбент Nucleosil 10 С₁₈;

подвижная фаза (ПФ) - смесь 0,055 М раствора калия дигидрофосфата, спирта метилового и 0,05 М раствора натрия октансульфоната (540:280:180);

расход ПФ - 0,6 мл/мин;

УФ-детектор с рабочей длиной волны 216 нм.

Приготовление испытуемого раствора. Около 0,08 г (точная навеска) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 20 мл хлороформа, встряхивают 2 минуты, доводят объем суспензии хлороформом до метки, перемешивают и фильтруют через фильтр с диаметром пор 0,5 мкм. Первую порцию фильтрата (2 мл) отбрасывают. Точно 1 мл фильтрата выпаривают досуха. Остаток растворяют точно в 1 мл смеси спирт метиловый - вода (7 : 3). Раствор сохраняют в колбе с притертой пробкой.

Последовательно хроматографируют по 0,005 мл полученного раствора и раствора рабочих стандартных образцов кофеина, кодеина фосфата и фенобарбитала.

Содержание кофеина, фенобарбитала и кодеина фосфата в пересчете на среднюю массу одной таблетки рассчитывают по формулам:

где S_i - площадь пика определяемого компонента на хроматограмме испытуемого раствора;

S_oi - площадь пика определяемого компонента на хроматограмме рабочих стандартных образцов;

a_oi - навеска рабочего стандартного образца определяемого компонента, в г;

а - навеска порошка растертых таблеток, в г;

b - средняя масса таблетки, в г.

Приготовление исходного раствора кодеина фосфата. Около 0,04 г (точная навеска) кодеина фосфата, отвечающего требованиям ФС, предварительно высушенного до постоянной массы при температуре 100 С, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в 20 мл смеси спирта метилового и воды (7 : 3), доводят объем раствора до метки той же смесью и перемешивают.

Приготовление исходного раствора фенобарбитала. Около 0,05 г (точная навеска) фенобарбитала, отвечающего требованиям ФС, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и растворяют в 20 мл смеси спитра метилового и воды (7 : 3), доводят объем раствора до метки той же смесью и перемешивают.

Приготовление раствора рабочих стандартных образцов. Около 0,05 г (точная навеска) кофеина безводного, отвечающего требованиям ФС, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и растворяют в 20 мл смеси спирта метилового и воды (7 : 3), прибавляют по 5 мл исходных растворов кодеина фосфата и фенобарбитала, доводят объем раствора до метки той же смесью, перемешивают. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора той же смесью до метки, перемешивают.

Метод 2. Анальгин, парацетамол, кофеин, фенобарбитал и кодеина фосфат определяют методом ВЭЖХ.

Методика. Около 0,4 г (точная навеска) порошка растертых таблеток, 0,15 г натрия сульфита помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл ацетонитрила, 15 мл воды, встряхивают в течение 10 мин и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Раствор фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента», отбрасывая первые 15 мл фильтрата.

5 мкл полученного раствора и 5 мкл раствора стандартного образца попеременно хроматографируют на жидкостном хроматографе «Мили-хром» с УФ-детектром, получая не менее 3 хроматограмм каждого раствора.

Условия проведения анализа:

По окончании хроматографирования колонка и узел ввода пробы промываются подвижной фазой - смесью ацетонитрила и воды (16 : 84) в течение не менее 2 минут.

Количество анальгина, парацетамола, кофеина, фенобарбитала и кодеина фосфата в пересчете на среднюю массу одной таблетки (X) в граммах вычисляют по формулам:

(Обозначения - см. выше формулы 39,40).

Приготовление раствора стандартного образца.

Около О, 15 г натрия сульфита (точная навеска), О, 15 г (точная навеска) анальгина, О, 15 г (точная навеска) парацетамола, 0,025 г (точная навеска) кофеина безводного, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл ацетонитрила, 40 мл воды, взбалтывают до полного растворения, прибавляют 10 мл раствора фенобарбитала и кодеина фосфата. Объем раствора доводят водой до метки, перемешивают и фильтруют· через стеклянный фильтр ПОР 16. Дегазируют любым удобным способом.

Приготовление раствора фенобарбитала, кодеина фосфата.

0,05 г (точная навеска) фенобарбитала, 0,04 г (точная навеска) кодеина фосфата предварительно высушенного до постоянной массы при температуре 100° С помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл ацетонитрила, 40 мл воды, взбалтывают до полного растворения. Объем раствора доводят водой до метки, перемешивают и фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16.

Для анализа указанных лекарственных форм заводского изготовления также характерно широкое применение современных физикохимических методов. Особенно эффективно их использование для анализа катионов натрия и калия, для количественного определения которых нет методик) отвечающих требованиям экспресс-анализа. Прописъ (препарат «Квинтасоль») иллюстрирует такое применение физикохимических методов в сочетании с химическими методами.

Квинтасоль - это раствор сбалансированных по ионному составу солей для инфузий. Препарат наряду с другими ионами содержит катионы натрия и калия. Для определения подлинности этих катионов в экспресс-анализе (см. прописи 1 - 3) применяют реакции с цинк-уранил ацетатом (определение Na¹), натрия гексанитрокобадьтатом и кислотой винно каменной (определение К⁺). В условиях хорошо оснащенной контрольно-аналитической лаборатории для анализа катионов натрия и калия применяют метод пламенной фотометрии.

ПРОПИСЬ 50

Раствор для инфузий "Квинтасолы"

Состав раствора:

Натрия хлорида 5,26 г

Калия хлорида 0,37 г

Кальция хлорида гексагидрата 0,28 г (в пересчете на безводный)

Магния хлорида гексагидрата О,14 г (в пересчете на безводный)

Натрия ацетата тригидрата 4,1 г (в пересчете на безводный)

Воды для инъекций до 1 л

Ионный состав (на 1 л раствора):

Натрий-иона 140 ммоль

Калий-иона 5 ммоль

Кальций-иона 2,5 ммоль

Магний-иона 1,5 ммоль

Хлорид-иона 103 ммоль

Ацетат-иона 50 ммоль

Подлинность. Магний-ион. К 2 мл препарата прибавляют 1 мл разбавленного раствора аммиака. Образуется белый осадок, растворимый при добавлении 1 мл раствора аммония хлорида. Прибавляют 1 мл раствора натрия гидрофосфата, образуется: белый кристаллический осадок.

Mg²⁺ + NH₃ + НРО₄^2- = MgNH₄PO₄↓

Кальций-ион. Для качественного и количественного определения соединений кальция довольно часто применяют глиоксаль-бис-(2-гидроксанил), являющийся продуктом конденсации глиоксаля и ортоаминофенола. Реактив используют для идентификации иона кальция, находящегося в смеси с другими ионами металлов, при спектрофотометрическом и комплексонометрическом (в качестве индикатора) оцределении соединений кальция. Ион кальция с реактивом образует окрашенный комплекс:

Методика. К 0,2 мл препарата прибавляют 0,5 мл 0,2% раствора глиоксальгидроксанила в спирте, 0,2 мл раствора натрия гидроксида и 0,2 мл раствора натрия карбоната. Встряхивают с 1 - 2 мл хлороформа и прибавляют 1 - 2 мл воды. Слой хлороформа окрашивается в красный цвет.

Натрий-ион и калий-ион. Определяют методом пламенной фотометрии (см. количественное определение).

Хлорид-ион. К 2 мл препарата прибавляют 0,5 мл кислоты азотной разведенной и 0,5 мл раствора серебра нитрата; образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в кислоте азотной разведенной и растворимый в растворе аммиака.

Ацетат-ион. К 5 мл препарата прибавляют 2 мл кислоты серной концентрированной, 1 мл спирта и нагревают; ощущается запах этилацетата.

Количественное определение. Ионы калия и натрия в данном препарате определяют с помощью метода пламенной фотометрии. Метод основан на определении интенсивности спектральной линии анализируемых атомов, возникающей при воздействии высокотемпературного пламени (эмиссионная пламенная спектрометрия), или уменьшении интенсивности резонансной линии вследствие ее поглощения атомами анализируемого элемента (атомно-абсорбционная дламенная спектрометрия) в зависимости от концентрации определяемых атомов. Метод позволяет детектировать как следовые количества атомов, так и проводить их количественное определение.

Методика. Натрий-ион. 1 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и с помощью пламенного фотометра измеряют интенсивность спектральной линии при длине волны 5^9 нм. По калибровочной кривой определяют содержание ионов натрия в препарате (в мг/л).

Содержание ионов натрия в препарате (в миллимолях на литр) вычисляют по формуле:

где С - содержание ионов натрия в разведенном препарате, найденное по калибровочной кривой, в мг/л;

22,99 - молярная масса натрия, г/моль.

Построение калибровочной кривой.

Из раствора рабочего стандартного образца натрия хлорида, содержащего 100 мг ионов натрия в 1 л, готовят рабочие растворы с концентрацией ионов 5, 10, 15, 20, 25, 30 мг/л. Для этого в мерную колбу вместимостью 50 мл помещают соответственно 2,5, 5,0; 7,5, 10,0, 12,5 мл раствора рабочего стандартного образца натрия хлорида, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и измеряют на пламенном фотометре интенсивность спектральной линии.

Строят калибровочный график, откладывая на оси ординат показания гальванометра, а на оси абсцисс - концентрацию ионов натрия (в мг/л).

Калий-ион. 1 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и измеряют интенсивность спектральной линии при длине волны 770 нм. По калибровочному графику определяют содержание ионов калия в разведенном препарате (в мг/л). Содержание ионов калия в препарате (в миллимолях на литр) вычисляют по формуле:

где С - содержание ионов калия в разведенном препарате, найденное по калибровочной кривой, (в мг/л);

39,098 - молярная масса калия, г/моль

Построение калибровочной кривой.

Из раствора рабочего стандартного образца калия хлорида, содержащего 100 мг ионов калия в 1 л, готовят рабочие растворы с концентрацией 1, 2,-3, 4, 5 мг/л ионов калия. Для этого в мерную колбу вместимостью 250 мл помещают соответственно 2,5, 5,0, 7,5, 10,0, 12,5 мл раствора рабочего стандартного образца калия хлорида, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и измеряют интенсивность спектральной линии. Строят калибровочный график, откладывая на оси ординат показания гальванометра, а на оси абсцисс - концентрацию ионов калия (в мг/л).

Кальций-ион. В препарате "Квинтасоль" совместно присутствуют ионы кальция и магния. Однако в щелочной среде с индикатором му-рексидом можно трилонометрически определить только кальций-ион.

Методика. 10 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25 мл воды, 2 мл раствора натрия гидроксида, 0,03 г индикаторной смеси мурексида и титруют 0,005 М раствором трилона Б до перехода окраски раствора из розовой в фиолетовую.

1 мл 0,005 М трилона Б соответствует 0,0005550 г СаСl₂

Расчет кальций-иона (в миллимолях на литр) проводят по формуле:

где V - объем 0,005 М раствора трилона Б, пошедшего на титрование испытуемой пробы, в"мл;

k - коэффициент поправки на титрованный раствор;

10 - объем препарата, взятый для анализа, в мл;

1000, 1000 - коэффициенты пересчета;

111,0 - молярная масса кальция хлорида, г/моль.

Магний-ион. Для анализа иона магния определяют комплексоно-метрически сумму ионов магния и кальция в среде аммиачного буферного раствора. Расчет содержания магний-иона проводят по разности объемов титранта между вторым титрованием (определение суммы ионов) и первым (определение кальций-иона).

Методика. 10 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25 мл воды, 2 мл аммиачного буферного раствора, 0,05 г индикаторной смеси эриохрома черного Т и титруют 0,005 М раствором трилона Б до перехода окраски из фиолетово-красной в голубую.

1 мл 0,005 М раствора трилона Б соответствует 0,0004759 г MgCl₂

Расчет магний-иона (в миллимолях на литр) проводят по формуле:

где V₂ - объем 0,005 М раствора трилона Б, пошедшего на титрование испытуемой пробы, в мл;

V₁ - объем 0,005 М раствора трилона Б, пошедшего на титрование кальция хлорида, в мл;

k - коэффициент поправки на титрованный раствор;

10 - объем препарата, взятый для анализа, в мл;

1000, 1000 - коэффициенты пересчета;

95,21 - молярная масса магния хлорида, г/моль.

Хлорид-ион. В данной лекарственной смеси сумму хлоридов можно беспрепятственно определять прямым аргентометрическим титрованием по методу Мора.

Методика. 5 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 25 мл воды и титруют ОД н. раствором серебра нитрата до красновато-коричневого окрашивания (индикатор -калия хромат).

1 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,003545 г хлорид-иона.

Содержание хлорид-иона в препарате (в миллимолях на литр) рассчитывают по формуле:

где V - объем 0,1 н. раствора серебра нитрата, пошедшего на титрование испытуемой пробы, в мл;

k - коэффициент поправки на титрованный раствор;

5 - объем препарата, взятый для анализа, в мл;

1000, 1000 - коэффициенты пересчета;

35,45 - молярная масса хлорид-иона, г/моль.

Ацетат-ион. Содержащиеся в препарате хлориды не мешают количественному определению ацетат-иона.

Методика. 20 мл препарата помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 4 капли индикатора бромфенолового синего и титруют 1 н. раствором кислоты хлороводородной до желтой окраски.

1 мл 1 н. раствора кислоты хлороводородной соответствует 0,05902 г ацетат-иона.

Содержание ацетат-иона в препарате (в миллимолях на литр) рассчитывают по формуле:

где V - объем 1 н. раствора кислоты хлороводородной, пошедшей на титрование испытуемой пробы, в мл;

k - коэффициент поправки на титрованный раствор;

20 - объем препарата, взятый для анализа, в мл;

1000, 1000 - коэффициенты пересчета;

59,04 - молярная масса ацетатиона, г/моль.

Лекарственное средство баралгин (пропись 51) выпускают в виде таблеток и раствора для инъекций. В состав препарата, наряду с анальгином, входят питофенона гидрохлорид - 4 -(пиперидиноэтокси)-карбметоксибензофенона гидрохлорид и фенпивериния бромид - 2,2-дифенил-4-пиперидилбутирамида бромметилат.

ПРОПИСЬ 51

Баралгин, раствор для инъекций

Состав раствора одной ампулы на 5 мл:

Метамизола натрия (анальгина) 2,5 г (0,5 г/мл)

Питофенона гидрохлорида 0,01 г (0,002 г/мл)

Фенпивериния бромида 0,0001 г (0,00002 г/мл)

Содержание анальгина в лекарственном средстве на несколько порядков превышает содержание фенпивериния бромида и питофенона. Это позволяет определять анальгин в присутствии других ингредиентов с помощью метода ультрафиолетовой спектрофотометрии (фенпивериния бромид и питофенон из-за малого содержания не влияют на результат определения).

Методика. 5 мл раствора для инъекций разводят водой до 100 мл. 10 мл полученного раствора разводят водой до 250 мл.

К 5 мл полученного раствора прибавляют 20 мл 1н. раствора кислоты хлороводородной и доводят объем водой до 200 мл (испытуемый раствор).

0,250 г анальгина моногидрата (стандартный образец) растворяют в 250 мл воды. К 5 мл полученного раствора добавляют 20 мл 1н. раствора кислоты хлороводородной и доводят объем водой до 200 мл (раствор стандартного образца).

Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов при длине волны 258 ± 2 нм, используя в качестве раствора сравнения 0,1 н. раствор кислоты хлороводородной.

Содержание анальгина моногидрата (в г/мл) рассчитывают по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;

А₀ - оптическая плотность раствора стандартного образца;

0,000025 - содержание стандартного образца анальгина моногидрата в 1 мл раствора стандартного образца, в г.

Питофенона гидрохлорид. Лекарственное вещество определяют спектрофотометрически после экстракции гексаном из подщелоченного раствора.

Методика. 5 мл препарата помещают в Делительную воронку, добавляют 10 мл 30% раствора натрия карбоцата и экстрагируют 20 мл гексана. Затем экстрагирование с 10 мл гексана повторяют дважды.

Гексановые экстракты объединяют и промывают смесью, содержащей 40 мл воды и 2 мл 1 н. раствора натрия гидроксида.

Промытую гексановую фракцию экстрагируют трижды по 20 мл 0.01 н. раствора кислоты хлороводородной и доводят объем кислого же факта водой до 1000 мл (испытуемый раствор).

Параллельно готовят раствор стандартного образца питофенона гидрохлорида. 0,100 г стандартного образца питофенона гидрохлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл воды и доводят объем тем же растворителем до метки. 10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем водой до метки.

10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 6 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной и доводят объем раствора до метки водой (раствор стандартного образца).

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца на спектрофотометре при длине волны 290 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание питофенона гидрохлорида (в г/мл) рассчитывают по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;

А₀ - оптическая плотность раствора стандартного образца;

0,00001 - содержание стандартного образца питофенона гидрохлорида в 1 мл раствора стандартного образца, в г.

Фенпивериния бромид определяют с помощью метода экстракционной фотометрии.

Методика. Водную фазу, полученную после экстракции питофенона, охлаждают на ледяной бане и переносят в охлаждаемую льдом делительную воронку, в которой находится 10 мл смешанного реактива (см. ниже) и 10 мл насыщенного раствора натрия сульфата. Экстрагируют 20 мл охлажденного на льду хлороформа и хлороформный слой красно-коричневого цвета фильтруют через безводный натрия сульфат после чего экстракцию повторяют с 5 мл охлажденного хлороформа.

Хлороформные экстракты объединяют и промывают смесью, состоящей из 35 мл воды и 5 мл 1 н. раствора кислоты хлороводородной. Полученный хлороформный раствор зеленовато-синего цвета фильтруют через безводный натрия сульфат в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем хлороформом до метки (испытуемый раствор).

Параллельно готовят раствор стандартного образца. 0,02 г стандартного образца фенпивериния бромида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в небольшом количестве воды и доводят объем водой до метки. 10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем водой до метки.

С 5 мл полученного раствора проводят операции, описанные выше для испытуемого раствора.

Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов на спектрофотометре при длине волны 605 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения хлороформ.

Приготовление смешанного реактива. 5 г калия цианида и 11 г натрия гидроксида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в небольшом количестве воды и доводят объем водой до метки (раствор 1).

5 г этилендиаминтетраацетата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в небольшом количестве воды и доводят объем водой до метки (раствор 2).

0,06 г дитизона помещают в мерную колбу вместимость 50 мл, растворяют в небольшом количестве хлороформа и доводят объем до метки хлороформом (раствор 3).

В делительную воронку помещают 30 мл раствора 1, 8 мл раствора 2 и 8 мл раствора 3. Содержимое смешивают и экстрагируют дважды с 25 мл хлороформа. Хлороформные вытяжки отбросить. Водная фаза является смешанным реактивом. Раствор хранить в прохладном месте.

Содержание фенпивериния бромида рассчитывают по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;

А₀ - оптическая плотность раствора стандартного образца;

0,000002 - содержание стандартного образца фенпивериния бромида в 1 мл раствора стандартного образца, в г.

Сульфокамфокаин (пропись 52) является комплексным лекарственным средством, содержащим кислоту сульфокамфорную и новокаин-основание. Лекарственная форма препарата - раствор 10% для инъекций. Ингредиенты сульфокамфокаина образуют в растворе соль по донорно-акцепторному механизму.

ПРОПИСЬ 52

Сульфокамфокаин 10% для инъекций

Состав:

Кислоты сульфокамфорной 49,6 г (в пересчете на безводную)

Новокаинаоснования 50,4 г

Воды для инъекций - до 1 л

Подлинность. Идентичность новокаина-основания определяют с помощью групповой реакции на первичные ароматические амины. Для проведения реакции новокаин-основание предварительно отделяют от кислоты сульфокамфорной.

Методика. К 4 мл препарата прибавляют 2 мл 1 н. раствора натрия гидроксида; выделяется бесцветный маслянистый осадок. Полученную смесь переносят в делительную воронку и извлекают 10 мл хлороформа. После расслоения хлороформ фильтруют через сухой фильтр, содержащий безводный натрия сульфат. Хлороформ отгоняют, остаток растворяют в 10 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной.

К 2,5 мл полученного раствора прибавляют 2 мл 1% раствора натрия нитрита и образовавшийся раствор вливают в пробирку, содержащую 1 мл щелочного раствора Р-нафтола и 0,5 г натрия ацетата; образуется осадок оранжево-красного цвета.

Кислоту сульфокамфорную индентифицируют по содержащейся в молекуле лекарственного вещества кето-группе.

Методика. К 1 мл препарата прибавляют 3 мл раствора 2,4-динитрофенилгидразина в кислоте хлороводородной и нагревают до кипения. Через 5 минут образуется оранжево-желтый осадок.

Остаток кислоты серной определяют после минерализации по образующемуся сульфат-иону.

Методика. 5 мл препарата помещают в тигель, прибавляют 0,05 г натрия нитрата и 2 г натрия карбоната. Смесь выпаривают на водяной бане досуха, сжигают и прокаливают при красном калении. После охлаждения к остатку осторожно прибавляют кислоту хлороводородную концентрированную до конца вспенивания и выпаривают досуха. К остатку прибавляют 50 мл воды и отфильтровывают нерастворившуюся часть.

К фильтрату прибавляют воды до 100 мл, добавляют 5 мл кислоты хлороводородной концентрированной и нагревают до кипения. К кипящему раствору при перемешивании прибавляют 5 мл 5% кипящего раствора бария хлорида; образуется белый мелкокристаллический осадок.

Количественное определение. Ингредиенты смеси можно количественно определять в разных навесках без предварительного разделения. Новокаиноснование определяют нитритометрически, а кислоту сульфокамфорную - алкалиметрически.

Методика. Новокаин-основание. К 5 мл препарата прибавляют 10 мл кислоты хлороводородной разведенной, воды до общего объема 80 мл, 1 г калия бромида и титруют при постоянном перемешивании 0,1 М раствором натрия нитрита (индикатор - 0,2 мл раствора тропеолина 00 и 0,1 мл метиленового голубого) до перехода окраски от красно-фиолетовой к голубой.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 0,02364 г С₁₃H₂₀N₂O₂ (новокаина-основания).

Расчет содержания новокаина-основания (в г/мл) проводят по формуле:

где V_{o о} и V_K.O - объемы титранта в основном и контрольном опытах, в мл;

k - коэффициент поправки на титрованный раствор;

0,02364 - титриметрический фактор пересчета;

5 - объем препарата, взятого на анализ, в мл.

Кислота сульфокамфорная. К 5 мл препарата прибавляют 5 мл волы и смесь, состоящую из 20 мл спирта 95% и 10 мл хлороформа, предварительно нейтрализованную по фенолфталеину, и титруют с тем же индикатором при слабом взбалтывании 0,1 н. раствором натрия гидроксида до слабого розового окрашивания водного слоя. В конце титрования, после расслоения смеси, прибавляют еще 0,05 мл индикатора.

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,02323 г C₁₀H₁₆O₄S (кислоты сульфокамфорной).

Расчет содержания кислоты сульфокамфорной (в г/мл) проводят по формуле:

где 0,02323 - титриметрический фактор пересчета;

V - объем титранта, в мл;

остальные обозначения - см. формулу (52)

Подходы к разработке методик анализа капсул аналогичны таковым при анализе таблеток, растворов для инъекций и других дозированных лекарственных форм. Однако здесь методики значительно облегчаются тем, что при анализе лекарственные вещества высыпают из капсул и их не всегда сопровождают сопутствующие вещества (как при анализе таблеток, мазей или суппозиториев).

Капсулы «Эффект» содержат два лекарственных вещества, относящихся к группе арилалкиламинов: фенилпропаноламина гидрохлорид и хлорфенирамина малеат (см. пропись 53)

ПРОПИСЬ 53

«Эффект»

Состав (на одну капсулу):

Фенилпропаноламина гидрохлорида 0,045 - 0,055 г

Хлорфенирамина малеата 0,0072 - 0,0088 г

Вспомогательных веществ до 0,44 г ± 7 ,5%

Подлинность. Подлинность фенилпропаноламина гидрохлорида, являющегося солью первичного алифатического амина, определяют с помощью нингидриновой пробы.

Методика Точную навеску порошка содержимого капсул, эквивалентную 0,025 г фенилпропаноламина гидрохлорида, помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, добавляют 80 - 100 мл воды, нагревают до растворения содержимого и доводят объем раствора водой до метки.

2 мл полученного раствора переносят в колбу вместимостью 50 мл, добавляют 1 мл 0,05% водного раствора кислоты аскорбиновой и 2 мл 1,5% раствора нингидрина в смеси пиридина и метанола (1:1) и нагревают; возникает красное окрашивание.

Хлорфенирамина малеат идентифицируют реакцией Цинке за счет содержащегося в молекуле лекарственного вещества пиридинового фрагмента.

Методика. Точную навеску содержимого капсул, эквивалентную 0,01 г хлорфенирамина малеата, помещают в мерную колбу емкостью 250 мл, растворяют в воде и доводят объем до метки тем же растворителем. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр.

5 мл фильтрата переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 10 мл фосфатного буферного раствора, 2 мл 4% раствора анилина в спирте этиловом, перемешивают и добавляют 5 мл раствора бромциана. Перемешивают и доводят объем водой до метки; возникает желтое окрашивание.

Количественное определение. Нингидриновую пробу и реакцию Цинке можно использовать и для количественного определения соответственно фенилпропаноламина гидрохлорида и хлорфенирамина малеата методом спектрофотометрии.

Как и при анализе подлинности данного лекарственного средства, ингредиенты смеси не влияют друг на друга при их количественном определении.

Методика. Фенилпропаноламина гидрохлорид. Точную навеску растертого содержимого капсул, эквивалентную 0,05 г лекарственного вещества, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в небольшом количестве воды и доводят объём тем же растворителем до метки.

2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем водой до метки (испытуемый раствор).

0,05 г (точная навеска) стандартного образца фенилпропаноламина гидрохлорида помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в небольшом количестве воды и доводят объем тем же растворителем до метки.

2 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят водой до метки (раствор стандартного образца).

В одну колбу с притертой пробкой вместимостью 50 мл добавляют 2 мл раствора стандартного образца, а в другую - 2 мл испытуемого раствора. В каждую колбу добавляют по 1 мл 0,05% водного раствора кислоты аскорбиновой и по 2 мл 1,5% раствора нингидрина в смеси пиридина и метанола (1:1). Обе колбы нагревают на кипящей водяной бане в течение 25 минут.

Оптическую плотность каждого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 570 нм.

Содержание фенилпропаноламина гидрохлорида (в г/1 капсулу) рассчитывают по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора фенилпропаноламина гидрохлорида;

А₀ - оптическая плотность раствора стандартного образца;

m - навеска, в г;

0,00001 - содержание фенилпропаноламина в 1 мл раствора стандартного образца;

b - средняя масса содержимого капсулы, в г.

Хлорфенирамина малеат. В мерную колбу вместимостью 200 мл вносят точную навеску содержимого капсул, эквивалентную 0,008 г хлорфенирамина малеата, добавляют некоторое количество воды при встряхивании для растворения препарат, доводят объем водой до метки и фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор).

В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят около 0,08 г (точная навеска) стандартного образца хлорфенирамина малеата, растворяют в небольшом количестве воды и доводят объем до метки тем же растворителем. 10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объем водой до метки (раствор стандартного образца).

В одну мерную колбу вместимостью 25 мл переносят 5 мл испытуемого раствора, в другую - 5 мл раствора стандартного образца. В каждую колбу добавляют по 10 мл фосфатного буферного раствора и 2 мл 4% раствора анилина в спирте этиловом, перемешивают и добавляют по 5 мл раствора бромциана. Перемешивают, доводят объем до метки водой и через 5 минут измеряют оптическую плотность полученных растворов при длине волны 480 нм.

Содержание хлорфенирамина малеата (в г/1 капсулу) рассчитывают по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора хлорфенирамина малеата;

А₀ - оптическая плотность раствора стандартного образца;

m - навеска, в г;

0,00004 - содержание хлорфенирамина малеата в 1 мл раствора стандартного образца;

b - средняя масса содержимого капсулы, в г.

Препарат «Антигриппокапс» (пропись 54) содержит лекарственные вещества из разных химических групп в дозировках, на порядок отличающихся друг от друга. Анализ данной лекарственной смеси проводят с применением как химических, так и физико-химических методов.

ПРОПИСЬ 54

«Антигриппокапс»

Состав на одну капсулу:

Кислоты аскорбиновой 0,05 г

Кислоты ацетилсалициловой 0,15 г

Димедрола 0,01 г

Рутина 0,01 г

Кальция лактата 0,1 г

Вспомогательных веществ 0,003 г

Подлинность. Кислота ацетилсалициловая является единственным фенолом в данной смеси, поэтому данное лекарственное вещество идентифицируют с реактивом Марки.

Методика. К 0,05 г содержимого капсул прибавляют 3 - 4 капли реактива Марки и слегка нагревают; появляется красное окрашивание.

Кислота аскорбиновая обладает выраженными восстановительными свойствами. Другие компоненты смеси не мешают идентификации кислоты аскорбиновой с серебра нитратом.

Методика. 0,05 г содержимого капсул растворяют в 2 мл воды, прибавляют 1 - 2 капли раствора серебра нитрата; появляется темный осадок.

Димедрол определяют по образованию оксониевой соли (см. также пропись 12).

Методика. К содержимому одной капсулы прибавляют 5 - 6 капель кислоты серной концентрированной. Появляется ярко-желтое окрашивание, переходящее в кирпично-красное, исчезающее при добавлении нескольких капель воды.

Ион кальция определяют характерными аналитическими реакциями.

Методика. 0,1 г содержимого капсул диспергируют в 2 мл горячей воды, фильтруют и прибавляют 1 мл раствора аммония оксалата; образуется белый осадок, нерастворимый в кислоте уксусной разведенной и растворе аммиака, растворимый в разведенных минеральных кислотах.

Крупинка порошка содержимого капсул, смоченная кислотой хлороводородной и внесенная в бесцветное пламя, окрашивает его в кирпичнокрасный цвет.

Лактат-ион также открывают с помощью характерной аналитической реакции, при которой образуется ацетальдегид.

Методика. К 0,03 - 0,05 г содержимого капсул прибавляют 1 - 2 мл воды, 3 - 4 капли кислоты серной разведенной, по каплям раствор калия перманганата до фиолетового окрашивания и нагревают; образуется ацетальдегид, обнаруживаемый по запаху или по почернению поднесенной к парам полоски фильтровальной бумаги, смоченной реактивом Несслера.

Подлинность рутина устанавливают при количественном определении.

Количественное определение. Вначале определяют сумму кислот ацетилсалициловой и аскорбиновой и димедрола (как гидрохлорида) алкалиметрически.

Методика. Около 0,1 г (точная навеска) смеси содержимого капсул взбалтывают с 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину этанола и титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида с индикатором фенолфталеином.

Кислоту аскорбиновую количественно определяют йодометрически (химизм - см.пропись 15.

К оттитрованному при определении суммы кислот раствору прибавляют 1 мл раствора крахмала и титруют 0,1 н. раствором йода до синего окрашивания.

1 мл 0,1 н. раствора йода соответствует 0,008806 г С₆Н₈O₆ (кислоты аскорбиновой).

Содержание кислоты аскорбиновой (в г/1 капсулу) рассчитывают по формуле:

Димедрол - соль хлороводородной кислоты - количественно определяют методом прямой аргентометрии.

Методика. Около 1,28 г (точная навеска) содержимого капсул взбалтывают с 10 мл воды, прибавляют 2 - 3 капли раствора бромфенолового синего и по каплям кислоту уксусную разведенную до получения зеленовато-желтоватого окрашивания, после чего титруют 0,01 н. раствором серебра нитрата до сине-фиолетового окрашивания осадка.

1 мл 0,01 н. раствора серебра нитрата соответствует 0,002918 г C₁₇H₂₁NO · HCl (димедрола).

Содержание димедрола ( в г/1 капсулу) рассчитывают по формуле:

Расчет содержания кислоты ацетилсалициловой проводят по разности результатов трех титрований, с учетом отличий величин молярной массы эквивалента кислоты аскорбиновой при кислотно-основном (алкалиметрия) и окислительно-восстановительном (йодометрия) титровании, а также с учетом разницы в эквивалентной концентрации между стандартными растворами натрия гидроксида и серебра нитрата.

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,01802 г С₉Н₈O₄ (кислоты ацетилсалициловой).

где а - масса навески препарата, взятой для титрования суммы компонентов, в г;

a₁ - масса навески препарата, взятой для титрования димедрола, в г.

Кальция лактат количественно определяют комплексонометрически. Содержащиеся в лекарственной смеси в качестве вспомогательных веществ стеараты кальция и магния не растворяются в воде и, поэтому, не мешают определению кальция лактата.

Методика. Около 0,64 г (точная навеска) содержимого капсул взбалтывают с 1 О мл воды, прибавляют 4 - 5 мл аммиачного буферного раствора, 5 - 7 капель раствора кислотного хром темно-синего или кислотного хром черного и титруют 0,05 М раствором трилона Б до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора трилона Б соответствует 0,01542 г кальция лактата - C₆H₁₀CaO₆-5H₂O.

Расчет содержания кальция лактата проводят по формуле:

Содержащийся в препарате в малой дозе рутин определяют с помощью метода спектрофотометрии.

Методика. Около 0,65 г (точная навеска) содержимого капсул помещают в колбу с 10 мл горячего абсолютного спирта и фильтруют через стеклянный фильтр № 4 при слабом разрежении. Фильтр промывают горячим абсолютным спиртом (2 раза по 10 мл). Объединенные фильтраты количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, охлаждают и доводят объем раствора абсолютным спиртом до метки.

5 мл спиртового раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора абсолютным спирте до метки.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длинах волн 375 нм (Ai) и 362,5 нм (А2) в кювете с толщиной слоя 1 см.

Если отношение (А₁/А₂) находится в пределах 0,875 ± 0,004, то содержание рутина (в г/1 капсулу) вычисляют по формуле:

где 325,5 - удельный показатель поглощения (E^1%_1см) чистого (безводного) рутина в абсолютном спирте при длине волны 362,5 нм;

b - средняя масса содержимого капсулы, в г;

а - масса навески препарата, в г.

Если отношение (А /А ) превышает 0,879, что указывает на содержание в препарате кверцитина, то содержание рутина (в г/1 капсулу) вычисляют по формуле:

Комплексный препарат «Эссенциале» (пропись 55) наряду с витаминами группы В содержит эссенциальные фосфолипиды, являющиеся смесью диглицериновых эфиров холинфосфорной кислоты с высшими непредельными жирными кислотами - линолевой, линоленовой и др. Как и при анализе других лекарственных смесей заводского изготовления, здесь применяют и химические, и физико-химические методы исследования.

ПРОПИСЬ 55

«Эссенциале»

Состав на одну капсулу форте:

«Эссенциальных» фосфолипидов 300 мг

Тиамина мононитрата 6 мг

Рибофлавина 6 мг

Пиридоксина гидрохлорида 6 мг

Цианокобаламина 6 мкг

Никотинамида 3 О мг

Токоферола ацетата 6 мг.

Подлинность. Подлинность фракции эссенциальных фосфолипидов определяют с помощью метода хроматографии в тонком слое сорбента.

Методика. Содержимое одной капсулы растворяют в 30 мл смеси хлороформ - метанол (2 : 1).

Параллельно готовят раствор свидетеля растворением 100 мг фракции эссенциальных фосфолипидов в 10 мл хлороформа.

На линию старта хроматографической пластинки Кieselgel 60, Merck наносят по 0,01 мл раствора препарата и раствора свидетеля; в качестве подвижной фазы используют систему растворителей (хлороформ - метанол - вода (65 : 25 : 4).

После хроматографирования восходящим способом пластинку опрыскивают раствором смеси кислоты перхлорной, 0,1 н. кислоты хлороводородной, молибдата аммония и нагревают при 110^oC около 10 минут.

Фракция эссенциальных фосфолипидов проявляется в виде голубых пятен на светлом фоне.

Приготовление детектирующего реактива: 5 мл 60% раствора кислоты перхлорной смешивают с 10 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной и 25 мл 4% раствора аммония молибдата.

Никотинамид также идентифицируют с помощью метода хроматографии в тонком слое сорбента.

Методика. Содержимое одной капсулы взбалтывают в колбе со смесью хлороформ - вода (20 : 15). После разделения фаз верхний водный слой отделяют (испытуемый раствор).

Параллельно готовят раствор сравнения из 20 мг никотинамида в 10 мл воды.

На линию старта хроматографической пластинки Kieselgel 60 F₂₅₄, Merck наносят по 0,01 мл испытуемого раствора и раствора сравнения. Пластинку помещают в хроматографическую камеру с системой растворителей пропанол-1 - 10% раствор аммиака (95 : 5) и хроматографируют восходящим способом. Детектирование никотинамида осуществляют облучением хроматограммы УФ-светом при длине волны 254 нм. Никотинамид проявляется в виде синих пятен.

Подлинность пиридоксина гидрохлорида подтверждают реакцией образования индофенольного красителя с 2,6-дихлорхинонхлоримидом.

Методика. Содержимое одной капсулы взбалтывают с 10 мл 50% водного раствора этанола и фильтруют. К 5 мл фильтрата добавляют 1 мл 0,1% раствора 2,6-дихлорхинонхдоримида в диоксане и 5 - 6 капель 25% раствора аммиака; появляется синее окрашивание.

Рибофлавин идентифицируют по характерной для данного лекарственного вещества флуоресценции в УФ-свете.

Методика. Содержимое одной капсулы взбалтывают с 20 мл 50% водного раствора этанола и фильтруют. Фильтрат имеет интенсивную зеленую флюоресценцию при просматривании в ультрафиолетовом свете.

Подлинность тиамина нитрата подтверждают реакцией образования тиохрома.

Сущность испытания заключается в постепенном окислении тиамина в щелочной среде с образованием трициклического производного тиамина (тиохрома), способного давать синюю флуоресценцию в среде бутанола или изоамилового спирта при УФ - освещении.

Методика. Содержимое одной капсулы взбалтывают с 10 мл 50% раствора этанола и фильтруют. К 5 мл фильтрата приливают 1 мл раствора калия гексацианоферрата (IП), 1 мл раствора натрия гидроксида, 5 мл спирта бутилового или изоамилового, хорошо встряхивают и дают отстояться. В верхнем слое возникает наблюдаемая в ультрафиолетовом свете синяя флуоресценция, исчезающая при подкислении и вновь возникающая при подщелачивании раствора.

Подлинность токоферола ацетата подтверждают с помощью хроматографии в тонком слое сорбента.

Методика. Содержимое двух капсул экстрагируют тремя порциями по 10 мл 80% раствора метанола. Объединенный метанольный раствор помещают в делительную воронку и экстрагируют тремя порциями по 20 мл петролейного эфира. Слой петролейного эфира отделяют, фильтруют через безводный натрия сульфат в круглодонную колбу. Полученный раствор упаривают при пониженном давлении досуха и остаток растворяют в 25 мл хлороформа. 0,05 мл полученного раствора помещают на линию старта хроматографической пластики Kieselgel G. В качестве свидетеля на хроматографическую пластинку наносят 20 мкг токоферола ацетата рядом с пятном испытуемого раствора. В качестве подвижной фазы используют бензол. После хроматографирования восходящим способом пластинку помещают на 5 минут в сушильный шкаф при 100° С и опрыскивают 10% спиртовым раствором кислоты фосфорно-молибденовой.

Токоферола ацетат проявляется в виде пятна голубого цвета.

Количественное определение. Фотометрическое определение никотинамида основано на реакции расщепления пиридинового цикла хлорцианом (реакция Цинке) с последующим сочетанием производного глутаконового альдегида с барбитуровой кислотой с образованием окрашенного в фиолетовый цвет продукта с максимумом поглощения при 570 нм (см. также определение хлорфенирамина малеата, пропись 53).

Методика. Одну капсулу с содержимым помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, добавляют 30 мл воды и помещают в кипящую водяную баню до тех пор, пока порошок полностью не растворится. Раствор охлаждают, доводят объем водой до метки и фильтруют.

10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл прибавляют 0,5% раствор калия дигидрофосфата и доводят объем тем же раствором до метки (испытуемый раствор).

Параллельно готовят раствор стандартного образца. 50 мг никотинамида (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, добавляют необходимое для растворения лекарственного вещества количество 20% раствора метанола и доводят объем тем же растворителем до метки.

1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем до метки 0,5% раствором калия дигидрофосфата (раствор стандартного образца).

В четырех мерных колбах вместимостью 25 мл каждая готовят испытуемые растворы (ИР₁ и ИР₂ - раствор сравнения) и растворы стандартного образца (РС₁ и РС₂ - раствор сравнения) согласно приведенной в таблице схеме:

Колбы закрывают, встряхивают, оставляют на 25 минут и затем добавляют в каждую насыщенный раствор кислоты барбитуровой и доводят объем тем же раствором до метки.

Ровно через 4 минуты определяют оптическую плотность каждого раствора при 570 нм против растворов сравнения.

Реактивы:

Содержание никотинамида (в мг/1 капсулу) вычисляют по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора никотинамида;

А_о - оптическая плотность раствора стандартного образца;

0,05 - содержание никотинамида в 5 мл раствора стандартного образца, в мг;

250, 100, 10, 5-разведения.

Фотометрический анализ пиридоксина гидрохлорида основан на способности данного лекарственного вещества образовывать индофенольный краситель синего цвета с 2,6-дихлорхинонхлоримидом (см. определение подлинности пиридоксина гидрохлорида).

Методика. Две капсулы с содержимым кипятят с обратным холодильником в течение часа в смеси из 30 мл спирта и 5 мл кислоты хлороводородной. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл, доводят объем водой до метки и фильтруют (испытуемый раствор).

Параллельно готовят раствор стандартного образца: 25,00 мг пиридоксина гидрохлорида (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной до метки.

Для фотометрического определения готовят следующие растворы:

Оптическую плотность образовавшегося раствора измеряют через 20 минут после добавления раствора 2,6-дихлорхинонхлоримида в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 630 нм, используя в качестве раствора сравнения диоксан.

Реактивы:

Содержание пиридоксина гидрохлорида (в мг/1 капсулу) вычисляют по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора пиридоксина гидрохлорида;

А_о - оптическая плотность раствора стандартного образца;

0,05 - содержание пиридоксина гидрохлорида в 5 мл раствора стандартного образца;

500, 2, 2 - разведения.

Количественное определение рибофлавина основано на способности растворов препарата флуоресцировать при облучении УФ-светом.

Методика. Две капсулы с содержимым кипятят в течение часа с обратным холодильником в смеси 30 мл спирта, 10 мл воды и 5 мл 25% раствора кислоты хлороводородной. Охлажденную смесь с помощью воды количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл, доводят объем водой до метки и фильтруют (испьгrуемый раствор).

Параллельно готовят раствор стандартного образца: 5,00 мг рибофлавина (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, добавляют небольшое количество воды, 2 капли кислоты уксусной и растворяют при легком нагревании. После охлаждения объем раствора доводят водой до метки.

Берут две мерные колбы вместимостью 100 мл. В одну из них помещают 4 мл испытуемого раствора, в другую - 1 мл раствора стандартного образца, рибофлавина и объем в каждой колбе доводят спиртом до метки.

Измеряют интенсивность флуоресценции испытуемого раствора и раствора стандартного образца на флуориметре.

Содержание рибофлавина (в мг/1 капсулу) определяют по формуле:

где l - показание флуориметра для испытуемого раствора рибофлавина;

l₀ - показание флуориметра для раствора стандартного образца рибофлавина;

0,1 - содержание рибофлавина (в мг) в 1 мл раствора стандартного образца;

500, 4, 2 - разведения.

Количественный анализ тиамина мононитрата в эссенциале, как и определение рибофлавина, проводят с помощью метода флуориметрии. Определение основано на окислении тиамина в щелочной среде с образованием тиохрома, обладающего интенсивной флюоресценцией.

Методика. Две капсулы с содержимым кипятят в течение часа с обратным холодильником в смеси 30 мл этанола, 10 мл воды и 5 мл кислоты хлороводородной. Охлажденный раствор переносят количественно водой в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объем раствора воДой до метки и фильтруют (испытуемый раствор).

В одну делительную воронку переносят 4 мл испытуемого раствора, в другую - 1 мл раствора стандартного образца. В каждую делительную воронку добавляют по 40 мn раствора калия хлорида и 30 мл щелочного раствора калия гексацианоферрата (III). Оба раствора энергично встряхивают и дают постоять одну минуту. Затем в обе делительные воронки добавляют по 100 мл изобутанола и интенсивно встряхивают в течение двух минут. Смесям дают отстояться, после чего водный слой удаляют, а изобутанольный - фильтруют через безводный натрия сульфат. Флюоресценцию изобутанольного слоя испытуемого раствора и раствора стандартного образца измеряют на флуориметре.

Реактивы:

Содержание тиамина мононитрата (в мг/1 капсулу) вычисляют по формуле:

где l - показание флуориметра для испытуемого раствора тиамина мононитрата;

l_o - показание флуориметра для раствора стандартного образца тиамина мононитрата;

0,1 - содержание тиамина мононитрата (в мг) в 1 мл раствора стандартного образца;

500, 4, 2 - разведения.

Спектрофотометричекое определение токоферола ацетата основано на окислении лекарственного вещества (после предварительного гидролиза) азотной кислотой до о-токоферилхинона (токоферолового красного).

Методика. Две капсулы с содержимым помещают в колбу со смесью из 30 мл спирта этилового 95%, 5 мл 0,5% спиртового раствора пирогаллола, 4 мл 50% раствора калия гидроксида и кипятят с обратным холодильником в течение часа на водяной бане. Смесь охлаждают и количественно переносят с помощью воды в делительную воронку. Раствор встряхивают последовательно с тремя порциями эфира по 30 мл. Эфирные экстракты объединяют и многократно отмывают водой до нейтральной реакции.

Отмытый эфирный экстракт фильтруют через безводный натрия сульфат и упаривают досуха. Остаток растворяют в спирте этиловом, количественно с помощью спирта этилового переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем тем же растворителем до метки.

10 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 1 мл кислоты азотной, нагревают на водяной бане в течение 10 минут, охлаждают и доводят объем охлажденного раствора до метки спиртом этиловым (испытуемый раствор).

Параллельно готовят раствор стандартного образца: около 100 мг (точная навеска) D,L-α.-токоферола помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем спиртом этиловым до метки. 3 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляют 7 мл спирта этилового, 1 мл кислоты азотной и нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 минут. После охлаждения объем раствора стандартного образца доводят до метки спиртом этиловым.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца токоферола ацетата при длине волны 470 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание токоферола ацетата (в мг/ 1 капсулу) рассчитывают по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора токоферола;

А_о - оптическая плотность раствора стандартного образца;

З - содержание токоферола в 3 мл раствора стандартного образца;

50, 10, 2 - разведения;

1,1 - коэффициент пересчета с токоферола на токоферола ацетат.

Количественный анализ фракции эссенциальных фосфолипидов основан на определении фосфора после минерализации.

Методика. Разрезают две капсулы и их содержимое количественно переносят хлороформом в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем хлороформом до метки:. 5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем хлороформом до ьетки.

1 мл полученного раствора вносят в кварцевый химический стаканчик размером 18 х 100 мм, добавляют 0,5 мл обугливающей смеси и прокаливают на небольшом пламени до тех пор, пока колечко серной кислоты не поднимется по стенке стаканчика на половину высоты. После охлаждения добавляют 2 - 3 капли кислоты перхлорной и прокаливают на небольшом пламени до тех пор, пока жидкость не станет бесцветной.

К остывшей жидкости добавляют 1 О мл раствора аммония молибдата и энергично встряхивают. Через минуту добавляют 0,5 мл восстанавливающего реагента и вновь энергично встряхивают.

Полученный растаор помещают в темное место на 20 минут после чего измеряют его оптическую плотность при 578 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве контроля используют раствор, полученный из 0,5 мл обугливающей смеси, кислоты перхлорной, раствора аммония молибдата и восстанавливающего реагента в условиях, аналогичных приготовлению испытуемого раствора.

Реактивы:

Содержание фосфора в фракции эссенциальных фосфолипидов определяют по формуле:

где: F - расчетный фактор, вычисляемый по формуле: m (Р)/А в данном случае масса внесенного фосфора равна 0,03654 мг);

А - оптическая плотность испытуемого раствора.

При пересчете фосфора на фракцию эссенциалъных фосфолипидов пользуются коэффициентом пересчета, равным 100/3,3. Тогда формула расчета содержания фракции эссенциальных фосфолипидов принимает вид:

Содержащийся в очень малом количестве в препарате «Эссенциале» цианокобаламин качественно и количественно определяют микробиологическим методом. Описание методики микробиологического определения цианокобаламина не входит в задачу настоящего пособия.

Особенность сиропов как лекарственной формы заключается в том, что их изготавливают на основе концентрированного раствора сахарозы с добавлением лекарственных веществ, а также экстрактов, настоек фруктовых пищевых экстрактов, консервантов и др.

При анализе сиропов, как и других лекарственных смесей заводского изготовления, очевидны преимущества физико-химических методов анализа.

ПРОПИСЬ 56

Колдрекс Найт (сироп)

Состав на 20 мл сиропа:

Парацетамола 1 г

Прометазина гидрохлорида 0,02 г

Декстрометорфана гидробромида 0,015 г

Содержание парацетамола значительно превышает содержание других лекарственных веществ. Определение лекарственного вещества, как качественное, так и количественное, возможно с применением УФспектрофотометрии (см. также пропись 49).

Методика. Около 1 г сиропа (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют небольшое количество воды, перемешивают и доводят объем водой до метки.

2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 10 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида и доводят объем водой до метки (испытуемый раствор).

Приготовление раствора стандартного образца: около 0,1 г стандартного образца парацетамола (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, добавляют воду, энергично встряхивают до растворения лекарственного вещества и доводят объем водой до метки.

2 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 10 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида и доводят объем водой до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца на спектрофотометре при длине волны 257 нм, используя в качестве раствора сравнения 0,01 н. раствор натрия гидроксида.

Содержание парацетамола (в г/1 мл сиропа) вычисляют по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;

А_о - оптическая плотность раствора стандартного образца парацетамола;

0,00001 - содержание парацетамола в 1 мл раствора стандартного образца, (в г).

Прометазина гидрохлорид (дипразин) и декстрометорфана гидробромид качественно и количественно определяют методом ВЭЖХ.

Условия разделения:

колонка типа Spherisorb с внутренним диаметром 4,6 мм, длиной 15 см;

скорость потока - 2 мл/мин;

объем вводимой пробы - 20 мкл;

УФ-детектор с рабочей длиной волны 220 нм;

подвижная фаза - 2 г натрия дигидрофосфата помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в 800 мл воды и доводят объем до метки ацетонитрилом;

растворитель - 5 г натрия дигидрофосфата и 4 г кислоты аскорбиновой растворяют в 3 л воды, добавляют 2 л ацетонитрила и хорошо перемешивают.

Приготовление испытуемого раствора. 6 г сиропа (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объем растворителем до метки и хорошо перемешивают.

Приготовление раствора стандартного образца. 01075 г стандартного образца декстрометорфана гидробромида и 0,10 г стандартного образца прометазина гидрохлорида (точные навески) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в небольшом объеме растворителя и доводят объем им же до метки.

5 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем растворителем до метки.

Содержание декстрометорфана гидробромида и прометазина гидрохлорида (в г/20 мл сиропа) рассчитывают по формуле:

где S_l - площадь пика определяемого компонента на хроматограмме испытуемого раствора;

S_ol - площадь пика определяемого компонента на хроматограмме рабочих стандартных образцов;

а_ol- навеска рабочего стандартного образца определяемого компонента, г;

а - навеска сиропа, г;

b - содержание стандартного образца препарата в 1 мл раствора стандартного образца, г.

В сиропах, как правило, наряду с определением основных лекарственных средств, проводят определение консервантов и некоторых других вспомогательных веществ. Примером служит анализ сиропа «Бронхоптил» (пропись 57).

ПРОПИСЬ 57

Бронхоптил (сироп)

Состав:

Бромгексина 0,08 г

Вспомогательных веществ до 100 мл (пропиленгликоль, сорбит пищевой, кислота янтарная, масло эвкалиптовое, эссенция ароматическая, натрия бензоат, спирт 96%, вода).

Подлинность бромгексина подтверждают реакциями окисления и образования азокрасителя по содержащейся в молекуле препараrrа первичной ароматической аминогруппе.

Методика. 5 мл сиропа помещают в пробирку с притертой пробкой, прибавляют 2 мл спирта бутилового и 0,5 мл 5% раствора хлорамина, встряхивают 2 минуты и оставляют на 5 минут. Верхний слой окрашивается в желто-оранжевый цвет.

0,5 мл сиропа помещают в пробирку с притертой пробкой, прибавляют 5 мл кислоты хлороводородной разведенной, 1 мл 2% раствора натрия нитрита, встряхивают 2 минуты. Прибавляют 1 мл 5% раствора кислоты сульфаминовой и встряхивают 10 минут. Добавляют 2 мл 0,2% раствора 1-нафтиламина гидрохлорида и оставляют на 5 минут. Появляется розово-оранжевое окрашивание.

Подлинность бромгексина и натрия бензоата подтверждают также при их количественном анализе методом ВЭЖХ.

Количественное определение

Условия разделения:

колонка из нержавеющей стали с внутренним диаметром 4,6 мм и длиной 15 см;

сорбент типа Hypersil MOS С-8;

скорость потока 1,3 мл/мин;

УФ-детектор с рабочей длиной волны 240 нм;

объем вводимой пробы 10 мкл;

подвижная фаза - 2 г натрия гептансулъфоната помещают в колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 200 мл воды, растворяют, прибавляют 800 мл спирта метилового, 4 мл кислоты муравьиной, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Приготовление испытуемого раствора. 5 мл сиропа помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл подвижной фазы, перемешивают, доводят объем раствора до метки подвижной фазой и перемешивают.

Приготовление раствора стандартного образца 0,025 г натрия бензоата (точная навеска) и 0,04 г бромгексина (точная навеска) помещают в мерную колбу вместимолстью 50 мл, прибавляют 30 мл подвижной фазы, растворяют, доводят объем раствора до метки подвижной фазой, перемешивают.

5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора до метки подвижной фазой, перемешивают.

Содержание бромгексина и натрия бензоата (в мг/мл) рассчитывают по формуле:

где S_l - площадь пика определяемого компонента на хроматограмме испытуемого раствора;

S_ol - площадь пика определяемого компонента на хроматограмме рабочих стандартных образцов;

а - содержание определяемого вещества в растворе стандартного образца, мг.

В сиропах, содержащих спирт, определяют его содержание. В данном сиропе определение спирта проводят с помощью метода ГЖХ.

Условия разделения:

газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором;

колонка из нержавеющей стали с внутренцим диаметром 3 мм и длиной 3 м;

сорбент типа 5% Реоплекс 400 на Инертон Супер или аналоге;

температура термостата колонки 65° С, испарителя и детектора 130° С;

расход газа-носителя (азота) 30 мл/мин, воздуха - 500 мл/мин; объем вводимой пробы 2 мкл.

Приготовление испытуемого раствора. 5 мл сиропа помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 0,5 мл пропанола-1,20 мл воды, перемешивают, доводят объем водой до метки и вновь перемешивают.

Приготовление раствора стандартного образца. 0,5 мл спирта этилового 95% и 0,5 мл пропанола-1 помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем водой до метки и перемешивают.

Содержание спирта этилового в сиропе (в % об.) рассчитывают по формуле:

где S_l - площадь пика спирта этилового на хроматограмме испытуемого раствора;

S_ol - площадь пика пропанола-1 на хроматограмме испытуемого раствора;

V_l - объем сиропа взятого для анализа, мл;

V _ol - объем пропанола-1, мл;

k - поправочный коэффициент, определяемый по формуле:

где S_p - площадь пика пропанола-1 на хроматограмме раствора стандартного образца;

S_x - площадь пика спирта этилового на хроматограмме раствора стандартного образца;

V_x - объем спирта этилового в растворе стандартного образца, мл;

V_p - объем пропанола-1 в растворе стандартного образца, мл;

с - концентрация спирта этилового в ректификате, (в объемных долях).

Сироп «Стоптуссию» (пропись 58) не содертит индивидуальных лекарственных веществ. В этом случае проводят определение одного или нескольких фармакологически активных веществ, содержащихся в экстрактах из растений.

ПРОПИСЬ 58

Стоптуссин (сироп)

Состав на 100 мл сиропа:

Экстракта тимьяна жидкого 4, 1666 г

Экстракта чабреца жидкого 4, 1666 г

Экстракта подорожника жидкий 4, 1666 г

Меда 22,5000 г

Кислоты сорбиновой 0,0800 г

Натрия бензоата О, 1250 г

Метилпарабена 0,0560 г

Пропилпарабена 0,0240 г

Сахарозы 65,0000 г

Воды очищенной до 100,0000 мл

Биологически активными компонентами стоптуссина являются, главным образом, фенолы: тимол и его изомер карвакрол.

Подлинность тимола и карвакрола подтверждают с помощью метода ГЖХ. Одновременно с биологически активными веществами тем же методом идентифицируют консерванты: кислоту бензойную, кислоту сорбиновую, метилпарабен и прошщпарабен.

Условия разделения:

газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором;

колонка типа DB 17,3 м x 0,25 мм x 0,25 мм;

программированный режим термостата колонок от 50 до 210° С со скоростью 1° С/мин, далее со скоростью 5° С/мин;

температура инжектора 200° С;

линейная скорость 30 см/сек;

объем вводимой пробы 1 мкл.

Приготовление испытуемого раствора. 2 мл сиропа смешивают с 2 мл хлороформа и встряхивают в течение 5 минут. После разделения фаз анализируют хлороформный слой.

Приготовление раствора стандартного образца. По 0,03 г тимола, карвакрола, кислоты бензойной, кислоты сорбиновой, метилпарабена и пропилпарабена помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в небольшом количестве хлороформа и доводят объем тем же растворителем до метки.

Количественное определение тимола проводят методом ВЭЖХ.

Условия разделения:

колонка из нержавеющей стали с внутренним диаметром 4,6 мм и длиной 25 см;

сорбент типа LiChrosorb RP-18, 5 мкм;

скорость потока 1 мл/мин;

УФ-детектор с рабочей длиной волны 276 нм;

объем вводимой пробы 20 мкл;

подвижная фаза - смесь ацетонитрил - вода ( 400 : 600).

Приготовление испытуемого раствора. 10 г сиропа помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, смешивают при встряхивании с метанолом и доводят объем тем же растворителем до метки. Перед анализом полученный раствор фильтруют.

Приготовление раствора стандартного образца. 30 мг стандартного образца тимола и 10 мг стандартного образца карвакрола помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в метаноле и доводят объем тем же растворителем до метки.

1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем метанолом до метки.

Содержание тимола в сиропе рассчитывают по формуле:

где S_l - площадь пика определяемого вещества на хроматограмме испытуемого раствора;

S_ol - площадь пика определяемого вещества на хроматограмме раствора стандартного образца;

а_ol - навеска определяемого вещества (в г/л) в растворе стандартного образца;

а - навеска сиропа, г /л;

С - содержание стандартного вещества, %;

р - плотность анализируемой пробы при 20° С, г/см³.

Методический подход к анализу мазей заводского изготовления (а также паст, линиментов, гелей, кремов, суппозиториев) аналогичен таковому при анализе мягких лекарственных форм экстемпорального изготовления. Однако здесь, как и при анализе других лекарственных форм заводского изготовления, чаще применяют физико-химические методы анализа.

ПРОПИСЬ 59

Диоксиколь мазь

Состав:

Диоксидина 1 г

Тримекаина 4 г

Метилурацила 4 г

Полиэтиленоксида 1500 18,2 г

Полиэтилен оксида 400 до 100 г

Подлинность. Идентификацию диоксидина - 1,4-ди-N-оксид-2,3-бис-(оксиметил) хиноксалина - проводят с nомощью УФ-спектрофотометрии и реакцией с раствором щелочи. При действии растворов щелочей на диоксидин происходит ионизация вещества и, вследствие этого, углубление окрашивания от зелецовато-желтого до красно-бурого.

Методика. Ультрафиолетовый спектр раствора препарата, приготовленного для количественного определения, имеет максимум поглощения при длине волны 375 ± 2 нм.

2 г препарата помещают в пробирку и нагревают с 2 мл 10% раствора натрия гидроксида; появляется красно-бурое окрашивание.

Подлинность тримекаина подтверждают при определении посторонних примесей методом тонкослойной хроматографии, а также по образованию экстрагируемого в хлороформ комплексного соединения с кислотно-основным индикатором (данная реакция характерна для многих веществ из класса азотистых оснований).

Методика. 1,25 г мази растворяют в 5 мл спирта 96% и фильтруют. На линию старта хроматографической пластинки Силуфол УФ₂₅₄ наносят 0,02 мл (раствор 1, соответствует 200 мкг тримекаина), 0,005 мл (раствор 2, соответствует 50 мкг тримекаина) полученного фильтрата и 0,015 мл спиртового раствора стандартного образца тримекаина, содержащего 15 мкг тримекаина. Рядом с раствором 2 в качестве свидетеля наносят 0,01 мл 0,5% спиртового раствора (50 мкг) стандартного образца тримекаина.

Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе в течение 2 минут, помещают в насыщенную в течение часа камеру с подвижной фазой этилацетат - гептан - раствор диэтиламина 25% (40 : 40 : 10) и хроматографируют восходящим способом. Зоны разделенных веществ идентифицируют в УФ-свете при 254 нм.

На хроматограмме раствора 1 должно появиться только одно пятно (отсутствие посторонних примесей).

На хроматограмме раствора 2 пятно испытуемого образца должно находится на уровне пятна стандартного образца тримекаина.

1 г препарата растворяют в 10 мл воды, прибавляют 1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида, образующийся осадок отфильтровывают, фильтрат отбрасывают; осадок на фильтре растворяют в 10 мл 0,1 М раствора кислоты хлороводородной, прибавляют 1 мл раствора тропеолина 00, 0,5 мл хлороформа и встряхивают; хлороформный слой окрашивается в желтый цвет.

Подлинность метилурацила подтверждают обесцвечиванием бромной воды.

Методика. 0,5 г мази растворяют в 4 мл воды, прибавляют 1 мл бромной воды и встряхивают; раствор обесцвечивается.

Количественное определение диоксидина проводят с помощью метода УФ-спектрофотометрии.

Методика. Около 2 г мази (точная навеска) растворяют в 50 мл воды в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. 3 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 375 нм в :кювете с толщиной слоя 10 мм) используя в качестве раствора сравнения воду.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца диоксидина.

Содержание диоксидина (в г/1 г мази) вычисляют по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;

А_о - оптическая плотность раствора стандартного образца диоксидина;

а - навеска мази, г;

b - навеска стандартного образца диоксидина, г.

Тримекаин количественно определяют методом кислотно-основного титрования в среде протогенного растворителя. Остальные ингредиенты мази не мешают определению тримекаина данным методом.

Методика. Около 3 г (точная навеска) мази растворяют в 25 мл кислоты уксусной ледяной, прибавляют 5 мл ангидрида уксусного, 5 мл раствора ртути (II) хлорида и титруют 0,1 н. раствором кислоты хлорной из микробюретки потенциометрически до первого скачка потенциала, применяя в качестве индикаторного электрода - стеклянный, а в качестве электрода сравнения - насыщенный каломельный или хлорсеребряный электроды. Объем титранта рассчитывают no первому перегибу кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлорной соответствует 0,02938 г С₁₅H₂₄N₂O · HCI · 0,5 H₂O (тримекаина).

Содержание тримекаина (в г/1 г мази) вычисляют по формуле:

где V_{o o} - объем 0,1 н. раствора кислоты хлорной, пошедший на титрование навески мази;

V_{к o} - объем 0,1 н. раствора кислоты хлорной, пошедший на титрование контрольного опыта;

Т - титр тримекаина по 0,1 н. раствору кислоты хлорной, равный 0,02938 г/мл;

k - поправочный коэффициент к 0,1 н. раствору кислоты хлорной.

Количественное определение метилурацила проводят методом кислотно-основного титрования в среде протофильного растворителя. При этом вместе с метилурацилом оттитровывается и тримекаин (как гидрохлорид). Это обстоятельство отражается в формуле расчета метилурацила в мази.

Методика. Около З г (точная навеска) препарата растворяют в 20 мл предварительно нейтрализованного по тимолфталеину диметилформамида и титруют 0,1 н. раствором калия гидроксида спиртовым до синего окрашивания (индикатор - тимолфталеин).

1 мл 0,1 н. раствора калия гидроксида спиртового соответствует 0,012612 г C₅H₆N₂O₂ (метилурацила).

Содержание метилурацила (в г/1 г мази) вычисляют по формуле:

где V - объем 0,1 н. раствора калия rидроксида спиртового, пошедшего на титрование навески мази, мл;

k - поправочный коэффициент к 0,1 н. раствору калия гидроксида спиртового;

а - навеска мази, г;

Х - содержание тримекаина в 1 г мази, г;

0,02938 - масса тримекаина, г, соответствующая 1 мл 0,1 н. раствора калия гидроксида спиртового.

Мазь «Эфкамон» (пропись 60) содержит как индивидуальные лекарртвенные вещества (камфора, ментол, метилсалицилат, тимол, лоралгидрат), так и растительные масла, парафин и другие компоненты природного происхождения. При анализе этого препарата метод ГЖХ позволяет качественно и количественно определить большинство ингредиентов.

ПРОПИСЬ 60

Мазь «Эфкамон»

Состав:

Камфоры 10 г

Масла гвоздичного

Масла эфирного горчичного по 3 г

Масла эвкалиптового 7 г

Ментола 14 г

Метилсалицилата 8 г

Настойки перца стручкового 4 г

Тимола

Хлоралгидрата по 3 г

Спирта коричного 1 г

Парафина нефтяного твердого,

Моноглицеридов дистиллированных,

Вазелина до 100 г

Подлинность. Идентификацию хлоралгидрата, масла горчичного, масла эвкалиптового, ментола, метилсалицилата, масла гвоздичного и тимола проводят с помощью метода ГЖХ одновременно с количественным определением.

Содержащийся в настойке перца стручкового капсаицин идентифицируют по реакции с ванадатом аммония.

Методика. 2 г препарата помещают в колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл 95% спирта, нагревают на водяной бане до расплавления, взбалтывают 3 мин, охлаждают на льду и фильтруют. 5 мл фильтрата помещают в фарфоровую чашку и нагревают на водяной бане до удаления растворителя. К остатку прибавляют 2 мл ацетона, 5 мл кислоты хлороводородной и 0,1 г аммония ваналата; появляется зеленое окрашивание.

Количественное определение. Около 1 г (точная навеска) препарата растворяют в 8 мл эфира в мерной колбе вместимостью 10 мл и доводят объем раствора в колбе тем же растворителем до метки. 1 мкл полученного раствора вводят микрошприцем в испаритель газожидкостного хроматографа с пламенноионизационным детектором. Анализ проводят на двух колонках:

I - стеклянная колонка размером 200 х 0,3 см, заполненная сорбентом 5% S_l - 30 на хроматоне N-AW-DMCS, зернение 0,16 - 0,20 мм, используется для определения масла эвкалиптового;

II - стеклянная колонка размером 200 х 0,3 см, заполненная сорбентом - 3% НПГС (неопентилгликольсукцинат) на хроматоне N-AW-DMCS, зернение 0,16 — 0,20 мм, используется для определения камфоры, ментола, метилсалицилата, масла гвоздичного и тимола.

Приготовление модельной смеси 1. Около 0,175 г (точная навеска) масла эвкалиптового, 0,075 г (точная навеска) хлоралгидрата, 0,075 г (точная навеска) масла горчичного эфирного растворяют в мерной колбе вместимостью 25 мл и доводят объем до метки тем же растворителем.

В модельной смеси 1 масло эвкалиптовое используется для количественного и качественного определений, хлоралгидрат и масло горчичное используются только для определения подлинности.

Приготовление модельной смеси 2. Около 0,25 г (точная навеска) камфоры, 0,35 г (точная навеска) ментола, 0,20 г (точная навеска) метилсалицилата. 0,075 г (точная навеска) масла гвоздичного, 0,075 г (точная навеска) тимола синтетического растворяют в эфире в мерной колбе вместимостью 25 мл и доводят объем тем же растворителем до метки.

В модельной смеси 2 камфора, ментол, метилсалицилат, масло гвоздичное, тимол используются для количественного и качественного определений.

Условия разделения:

программированный режим термостата колонок от 60 до 130° С со скоростью 2°С/мин, после завершения программы режим изотермический (130° С) в течение 10 минут;

температура испарителей 180° С;

скорость газа-носителя: гелия и водорода 30 см³/мин, воздуха - 300 см³/мин; скорость диаграммной ленты 240 мм/час.

Параллельно проводят анализ модельной смеси 1 при определении масла эвкалиптового и модельной смеси 2 при определении камфоры, ментола, метилсалицилата, масла гвоздичного и тимола.

Количественное определение анализируемых компонентов мази проводят методом абсолютной градуировки.

Содержание определяемого компонента (масло эвкалиптовое, камфора, ментол, метилсалицилат, масло гвоздичное, тимол) в процентах в препарате вычисляют по формуле:

где S_l - площадь пика определяемого компонента;

S_cml - площадь пика стандартного образца;

a_cml - навеска определяемого компонента в модельной смеси, г;

a_пр - навеска препарата, г.

В суппозиториях «Релиф» с помощью метода ВЭЖХ проводят идентификацию лекарственных веществ, биологически активного вещества (витамина А) масла печени акулы, консервантов. Количественное определение также проводят указанным методом.

ПРОПИСЬ-61

Релиф (суппозитории)

Состав на один суппозиторий:

Масла печени акулы 3% (75 мг)

Масла какао 85,5% (2137 мг)

Фенилэфрина гидрохлорида 0,25% (6,25 мг)

Метилпарабена 2,5 мг

Пропилпарабена 5,0 мг

Крахмала 273,5 мг

Подлинность. Идентификацию ретинола пальмитата и фенилэфрина гидрохлорида проводят при количественном определении.

Метилпарабен и пропилпарабен.

Условия разделения:

колонка типа Nucleosil С 185 мк размером 150 х 4,6 мм;

подвижная фаза - вода-муравьиная кислота-ацетонитрил-метанол (470: 2,3 : 265: 265);

скорость потока 1,2 мл/мин;

УФ-детектор с рабочей длиной волны 254 нм;

объем вводимой пробы 10 мкл;

растворитель - 96% этанол.

Приготовление испытуемого раствора. 1 суппозиторий измельчают, помещают в колбу вместимостью 100 мл, добавляют растворитель, гомогенизируют, фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем растворителем до метки.

1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 1 О мл, добавляют 1,0 мл основного раствора внутреннего стандарта и доводят объем растворителем до метки.

Приготовление основного раствора внутреннего стандарта. 70 мг стандартного образца п-гидроксиэтилбензоата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в растворителе и доводят объем раствора до метки.

Приготовление растворов сравнительных стандартных образцов.

Измеряют времена удерживания анализируемых веществ и внутреннего стандарта.

Количественное определение Масло печени акулы. Количественно определяют содержащийся в масле печени акулы ретинол в виде пальмитата с помощью метода ВЭЖХ.

Условия разделения

колонка из нержавеющей стали с внутренним диаметром 4,6 мм и длиной 15 см;

сорбент типа Zorbax с диаметром сферических частиц 5 мкм;

скорость потока 0,6 мл/мин;

УФ-детектор с переменной длиной волны, рабочая длина волны 235 нм;

фильтры вакуумные для подвижной фазы с размером пор 0,45 мкм, устойчивые к тетрагидрофурану и фильтры для очистки qбразца с размером пор 0,45 мкм типа Найлон 66;

объем вводимой пробы 5 мкл;

буферный раствор: 4 мл кислоты фосфорной 85% и 8 мл триэтиламина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки;

подвижная фаза: смешивают 670 мл тетрагидрофурана, 320 мл воды и 9,5 мл буферного раствора.

Приготовление испытуемого раствора. Точную навеску измельченных суппозиториев, эквивалентную массе одного суппозитория, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 95% тетрагидрофуран и доводят объем до метки тем же растворителем. 10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем до метки 95% тетрагидрофураном.

Приготовление раствора стандартного образuа. Точную навеску стандартного образца витамина А пальмитата, эквивалентную 80 МЕ, помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл растворяют в 95% тетрагидрофуране и доводят объем раствора до метки тем же растворителем. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостыо 100 мл и доводят объем до метки 95% тетрагидрофураном.

Содержание ретинола пальмитата (в МЕ/1 г суппозиториев) вычисляют по формуле:

где S_l - площадь пика ретинола пальмитата на хроматограмме испытуемого раствора;

S_ol - площадь пика ретинола пальмитата на хроматограмме раствора стандартного образца;

а_оl - навеска стандартного образца ретинола пальмитата, мг;

Р - содержание стандартного образца ретинола пальмитата, МЕ/мг.

Фенилэфрина гидрохлорид количественно определяют методом вэжх.

Условия разделения:

колонка из нержавеющей стали с внутренним диаметром 4,6 мм и длиной 15 см;

сорбент типа Zorbax с размером частиц 4 мкм;

скорость потока 1,5 мл/мин;

УФ-детектор с переменной длиной волны, рабочая длина волны 289 нм;

фильтры вакуумные для подвижной фазы с размером пор 0,45 мкм, устойчивые к метанолу и фильтры для очистки образца с размером пор 0,45 мкм типа Ватман;

объем вводимой пробы 20 мкл;

подвижная фаза: в большой лабораторный стакан помещают 3 ,2 г калия дигидрофосфата, 2,5 г натрия лаурилсульфата, 1,5 г триэтиламина гидрохлорида и 1,0 мл 85% кислоты фосфорной, добавляют воды до растворения и доводят объем водой до метки. Перемешивают, добавляют 600 мл метанола и вновь перемешивают. Перед использованием раствор фильтруют.

Приготовление испытуемого раствора. 5 суппозиториев точно взвешивают и помещают в центрифужную пробирку вместимостью 250 мл с завинчивающейся крышкой, добавляют 100 мл гексана, плотно закручивают колпачок и перемешивают на приборе для встряхивания в течение 30 минут. Добавляют 100 мл подвижной фазы и снова встряхивают в течение 15 минут. Полученный образец центрифугируют в течение 10 минут при 1500 об/мин.

Для анализа образца используют одноразовый шприц с канюлей на конце. Втягивают небольшое количество воздуха в кончик шприца и помещают канюлю под границу раздела фаз, отделяющую слой гексана от нижнего слоя подвижной фазы. Воздух из шприца удаляют, втягивают жидкость в шприц и переносят во флакон.

Приготовление раствора стандартного образца. Точно взвешивают 150 мг фенилэфрина гидрохлорида, помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в небольшом количестве подвижной фазы и доводят объем тем же растворителем до метки.

5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем подвижной фазой до метки.

Содержание фенилэфрина гидрохлорида в суппозиториях (в %) вычисляют по формуле:

где S_l - площадь пика фенилэфрина гидрохлорида на хроматограмме испытуемого раствора;

S_ol - площадь пика фенилэфрина гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца;

a_ol - навеска стандартного образца фенилэфрина гидрохлорида, мг;

Р - содержание стандартного образца фенилэфрина гидрохлорида в 1 мл раствора стандартного образца.

Суппозитории «Бетиол» (пропись 62) не содержат индивидуальных лекарственных веществ. Содержащиеся в экстракте красавки алкалоиды и сумма солей аммония сланцевых кислот в ихтиоле анализируют с помощью химических и физико-химических методов.

ПРОПИСЬ 62

Бетиол (суппозитории)

Состав:

Экстракта красавки густого 0,015 г

Ихтиола 0,2 г

Основы для суппозитриев

достаточное количество до получения

суппозитория массой от 1,05 до 1,35 г

Подлинность. Ихтиол идентифицируют по содержащемуся в препарате иону аммония и органолептически.

Методика. Один суппозиторий помещают в колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 мл воды, нагревают на водяной бане до расплавления, сильно взбалтывают, охлаждают до застывания основы и фильтруют через вату.

Фильтрат должен быть темно-бурого цвета с запахом ихтиола. При нагревании его с 3 мл раствора натрия гидроксида выделяется аммиак, который обнаруживают по посинению влажной красной лакмусовой бумаги.

Алкалоиды группы тропана, содержащиеся в экстракте красавки густом открывают характерной для этой группы алкалоидов реакцией Витали-Морена. Суть испытания заключается в том, что при нитровании в жестких условиях с последующим добавлением спиртового раствора калия гидроксида и ацетона образуется мезомерно стабилизированный краситель азаоксонолового типа.

Методика. 5 суппозиториев помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной в насыщенном растворе натрия хлорида, нагревают на водяной бане до расплавления, взбалтывают в течение 10 минут при перйодическом нагревании, охлаждают до застывания основы и фильтруют через фильтр, смоченный водой, в делительную воронку.

К фильтрату прибавляют около 1 мл раствора аммиака (до щелочной реакции по фенолфталеину), 30 мл хлороформа и взбалтывают в течение 3 минут. Хлороформный слой промывают 50 мл воды и фильтруют в фарфоровую чашку через фильтр с 2 г алюминия оксида «для хроматографии» II степени активности. Хлороформ отгоняют на водяной бане. К остатку прибавляют 0,5 мл кислоты азотной концентрированной и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток охлаждают и смачивают 4 каплями 0,5 М спиртового раствора калия гидроксида и 8 каплями ацетона; появляется фиолетовое быстро исчезающее окрашивание.

Количествецное определение. Ихтиол, являющийся суммой аммониевых солей сланцевых кислот, количественно определяют по аммиаку. В основном опыте ион аммония связывают формальдегидом, а сланцевые кислоты титруют стандартным раствором натрия гидроксида. В контрольном опыте формальдегид не используют.

5 суппозиториев помещают в колбу вместимостью 250 мл, прибавляют пипеткой 100 мл насыщенного раствора натрия хлорида и нагревают на водяной бане до расплавления. Колбу закрывают пробкой и содержимое энергично взбалтывают в течение 5 минут при периодическом нагревании. Затем пробу охлаждают до застывания основы и фильтруют через сухой складчатый фильтр в сухую колбу.

К 50 мл фильтрата прибавляют 10 мл раствора формальдегида, предварительно нейтрализованного 0,1 н. раствором натрия гидроксида по фенолфталеину, и титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида до розового окрашивания (индикатор - 10 капель раствора фенолфталеина).

Параллельно проводят контрольный опыт. 25 мл того же фильтрата титруют 0,1 н. раствором натрия гидроксида до перехода желтой окраски жидкости в оранжевую (индикатор - 2 капли раствора фенолового красного).

1 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида соответствует 0,001703 г NH₃ (аммиака).

Содержание ихтиола в одном суппозитории (в г) вычисляют по формуле:

где а - объем О, 1 н. раствора натрия гидроксида, израсходованного на титрование испытуемого раствора, мл;

b - объем О, 1 н. раствора натрия гидроксида 2 израсходованного на титрование контрольного опыта, мл;

42,37 - коэффициент пересчета аммиака на ихтиол (при содержании влаги в ихтиоле 46% );

2 - разведение;

5 - количество суппозиториев, взятых для определения.

Алкалоиды красавки Один суппозиторий помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 15 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной, нагревают на водяной бане до расплавления, взбалтывают в течение 5 минут при перйодическом нагревании, затем охлаждают на льду и фильтруют через вату, стараясь не переносить основу на фильтр. Извлечение таким же образом повторяют еще раз 10 мл 0,1 п раствора кислоты хлороводородной, взбалтывая пробу 3 минуты.

К объединенным извлечениям прибавляют 4 мл 30% раствора бария хлорида, содержимое перемешивают и через 2 минуты фильтруют через небольшой смоченный О01 н. раствором кислоты хлороводородной бумажный фильтр в делительную воронку вместимостью 250 мл. Колбу и фильтр промывают 0,1 н. раствором кислоты хлороводородной два раза по 5 мл и промывные воды фильтруют в ту же делительную воронку.

В делительную воронку прибавляют 3 мл раствора аммиака концентрированного и извлекают два раза эфиром (80 и 60 мл), взбалтывая пробу по 5 минут. Объединенные эфирные извлечения помещают в колбу, прибавляют 5 г натрия сульфата безводного и оставляют на 5 минут при периодическом взбалтывании. После этого эфирное извлечение фильтруют через вату в колбу вместимостью 250 мл, промывают колбу и натрия сульфат эфиром (2 раза по 5 мл), который присоединяют к основному раствору.

Эфир выпаривают на водяной бане досуха, удаляя остатки продуванием воздуха. Остаток растворяют в 20 мл хлороформа. Раствор переносят в делительную воронку, прибавляют 5 мл гидрофталатного буферного раствора с рН 4,5, 1 мл 1 % раствора кислоты пикриновой и встряхивают 2 минуты. Хлороформный слой фильтруют через небольшой смоченный хлороформом бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 25 мл.

Колбу с остатком промывают 5 мл хлороформа, который переносят в тy же делительную воронку, и содержимое встряхивают в течение одной минуты. Раствор в мерной колбе доводят хлороформом до метки. Оптическую плотность полученного раствора измеряют на фотоэлектроколориметре при длине волны около 364 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 1 см.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца атропина сульфата. В качестве раствора сравнения используют хлороформ.

Содержание суммы алкалоидов красавки в одном суппозитории в пepecчетe на гиосциамин в граммах вычисляют по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;

А_о - оптическая плотность раствора стандартного образца;

b - содержание атропина сульфата в 1 мл раствора стандартного образца в пересчете на гиосциамин, г.

Аэрозоли - лекарственная форма, в которой лекарственные и вспомогательные вещества находятся под давлением газа-вытеснителя в аэрозольном баллоне, герметически закрытом клапаном.

ПРОПИСЬ 63

«Каметон» (аэрозоль)

Состав на один баллон:

Хлорбутанолгидрата 0,1 г или 0,15 г

Камфоры 0,1 г или 0,15 г

Ментола 0,1 г или 0,15 г

Масла эвкалиптового 0,1 гили 0,15 г

Масла вазелинового 9,6 гили 14,4 г

Дифтордихлорметана (Хладона-12) 20 гили 30 г

Отбор средней пробы для испытания подлинности и количественного определения. С 6 аэрозольных баллонов снимают насадки с предохранительными колпачками. Металлическую капсулу клапана прокалывают металлическим бойком на расстоянии примерно 5 мм от центра. В полученное отверстие для лучшего выхода хладона-12 вставляют иглу для инъекций (игла не должна касаться поверхности раствора) и оставляют баллон в вертикальном положении доля выхода хладона-12. После прекращения шипения выходящего газа осторожно встряхивают баллон и дают ему около 3 минут постоять; при этом происходит удаление дополнительного количества хладона-12. Эту операцию повторяют несколько раз до полного прекращения шипения выходящего газа.

Затем баллон вскрывают, отгибая края металлической капсулы в месте завальцовки. Содержимое баллонов после взбалтывания сливают в колбу вместимостью 100 мл, откуда после тщательного перемешивания отбирают пробы для испытания подлинности и количественного определения.

Подлинность. Ментол. К 2 мл препарата прибавляют 1 мл кислоты серной концентрированной и 1 мл свежеприготовленного 1 % раствора ванилина в кислоте серной концентрированной; появляется желтое окрашивание, переходящее в фиолетовое при добавлении 1 мл воды.

Цинеол, камфора, хлорбутанолrидрат, ментол. Определяют время удерживания указанных веществ на хроматограмме анализируемого раствора при количественном определении.

Количественное определение. Содержание камфоры, хлорбутанолгидрата и ментола в препарате определяют методом газовой хроматографии с использованием нафталина в качестве внутреннего стандарта.

Условия разделения:

хроматограф газовый с пламенно-ионизационным детектором;

колонка стеклянная или из нержавеющей стали размером 300 х 0,3 см, заполненная сорбентом - 15% полиэтиленгликолем (М.м. - 20000, карбовакс 20 М) на хроматоне N-AW-DMCS зернения 0,16 - 0,20 мм или 0,315 - 0,430 мм;

температура термостата колонки 150° С, испарителя - 200° С;

скорость газа-носителя (азота), гелия и водорода - 25 мл/мин, воздуха - 300 мл/мин;

скорость диаграммной ленты - 240 мм/час.

Методика. Около 5,0 г препарата, охлажденного от хладона-12 (точная навеска средней пробы из шести баллонов), помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл прибавляют около 0,05 г (точная навеска) нафталина для хроматографии, 10 мл хлороформа, перемешивают до полного растворения нафталина и доводят объем раствора хлороформом до метки. Около 1 мкл приготовленного ораствора вводят микрошприцем в испаритель хроматографа.

Содержание камфоры, хлорбутанолгидрата и ментола в одном баллоне в граммах (Х) вычисляют по формуле:

где S_l - площадь пика определяемого вещества на хроматограмме испытуемого раствора;

S_ol - площадь пика нафталина;

k - поправочный коэффициент для определяемого вещества;

а_ol - навеска нафталина, г;

а - навеска препарата, г;

m - масса содержимого, указанная на баллоне, без учета хладона-12, г.

Определение поправочного коэффициента. Готовят три модельные смеси, состоящие из масла эвкалиптового, камфоры, хлорбутанолгидрата, ментола и нафталина, взятых в массе около 0,05 г (точная навеска) каждого вещества, помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 5 г масла вазелинового, 10 мл хлоррформа, перемешивают до полного растворения компонентов и доводят объем раствора хлороформом до метки.

Каждую смесь вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз в объеме около 1 мкл и вычисляют пqправочные коэффициенты по формуле:

где k - поправочный коэффициент для определяемого вещества;

S_l - площадь пика определяемого вещества;

S_ol - площадь пика нафталина;

а_оl - навеска нафталина, г;

а - навеска камфоры, хлорбутанолгидрата или ментола, г.

В препарате «Ингалипт» (пропись 64) два лекарственных вещества, принадлежащих к одной химической группе, количественно определяют в одной навеске с помощью дифференциальной спектрофотометрии.

ПРОПИСЬ 64

Ингалипт (аэрозоль)

Состав на один баллон:

Стрептоцида растворимого О, 75 г

Норсульфазола-натрия 0,75 г

Тимола 0,015 г

Масла эвкалиптового 0,015 г

Масла мяты перечной 0,015 г

Спирта этилового 95% 1,8 г

Сахара-рафинада 1,5 г

Глицерина 2, 1 г

Твина-80 0,9 г

Воды очищенной до 30 мл

Азота от 0,3 до 0,4 г

Подлинность. Стрептоцид растворимый. К 0,5 мл препарата прибавляют 1 О мл воды, затем последовательно прибавляют 1 мл 3% раствора пероксида водорода и 1 мл раствора железа (III) хлорида; появляется бурое окрашивание, переходящее в темно-красное.

Норсульфазол-натрий. 1 мл препарата взбалтывают с 3 мл 0,1 н. раствора натрия гидроксида в течение 2 минут, затем прибавляют 1 мл раствора меди сульфата; образуется осадок грязно-фиолетового цвета.

Тимол. 20 мл препарата помещают в делительную воронку, прибавляют 50 мл эфира и взбалтывают в течение 5 минут. Эфир отгоняют. Остаток переносят в фарфоровую чашку, растворяют в 1 мл кислоты уксусной ледяной, прибавляют 0,2 мл кислоты серной концентрированной; появляется красное окрашивание (тимол).

Количественное определение. Стрептоцид-растворимый и норсульфазол-натрий. 2 мл раствора препарата и 2 мл раствора стандартных образцов норсульфазола и стрептоцида растворимого помещают в черные колбы вместимостью соответственно 200 и 100 мл, доводят объем растворов водой до метки и перемешивают.

По 2 мл каждого из полученных растворов переносят в мерные колбы вместимостью 100 мл, прибавляют по 1 мл 0,1 н. раствора кислоты хлороводородной, доводят объемы растворов водой до метки и перемешивают.

Измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре при длинах волн 268 и 291 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

В качестве раствора сравнения используют воду.

Содержание норсульфазола-натрия и стрептоцида растворимого в баллоне в граммах вычисляют по формулам:

где A₁ - оптическая плотность испытуемого раствора при соответствующих длинах волн;

А_о - оптическая плотность раствора стандартного образца при соответствующих длинах волн;

(-1,1270), 1,8770, 1,6935, (-0,9435) - расчетные коэффициенты.

Приготовление раствора стандартных образцов. 0,4140 г норсульфазола (точная навеска), высушенного до постоянной массы при температуре 100° С, количественно переносят 20 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида в мерную колбу вместимостью 50 мл и взбалтывают до растворения.

0,6250 г (точная навеска) стрептоцида растворимого, высушенного до постоянной массы при температуре 100° С, количественно переносят 20 мл воды в ту же мерную колбу вместимостью 50 мл взбалтывают до растворения, доводят объем водой до метки и перемешивают.

Если луч света пересекает границу раздела двух прозрачных однородных сред, то направление луча изменяется - происходит его преломление или рефракция. Согласно закону преломления света, отношение синусов углов падения (α) и преломления (β) - величина постоянная:

Коэффициент n называется показателем преломления. Это безразмерная величина, которая указывает, во сколько раз скорость света в «среде 1» больше скорости света в «среде 2»:

Если «среда 1» является вакуумом, то v₁ - скорость света в вакууме (≈3x10⁸ м/с), а коэффициент n - абсолютный показатель преломления (обычно его определяют для газов). Для жидкостей и твердых тел наиболее часто определяют показатель преломления относительно воздуха. В этом случае n - относительный показатель преломления вещества. Связь между абсолютным п_абс и относительным n_отн показателями преломления имеет вид:

где n_возд - абсолютный показатель преломления воздуха (≈1,00027).

Проводить подобный расчет, однако, обычно нет необходимости, так как в рефрактометрических таблицах для жидких и твердых веществ (и для растворов лекарственных веществ) также приводят значения n_отн.

Показатель преломления зависит от следующих факторов:

Наиболее часто (но не всегда) определяют показатель преломления для D-линии спектра натрия (589,3 нм - среднее значение для дублета) при 20°С - . При этом поддерживают температуру исследуемой пробы с помощью встроенного в рефрактометр термостата (зависимость показателя преломления от температуры рассмотрена ниже).

Из вышесказанного следует, что при прочих равных условиях показатель преломления раствора зависит от концентрации растворенного вещества (или веществ).

Прибором для измерения показателя преломления является рефрактометр. Мы не будем останавливаться на его устройстве и принципе работы, поскольку данная тема подробно рассматривается в курсе физики, и больше внимания уделим использованию рефрактометрии в фармацевтическом анализе.

Измеряют показатель преломления для различных целей:

В фармацевтическом анализе наибольшее значение приобрел количественный анализ растворов лекарственных веществ. С этой целью применяются рефрактометры, позволяющие определять показатель преломления с относительно высокой точностью: n ± 0,0001.

!Примечание.

Рефрактометр - не единственный прибор, исполиуемый для измерения показателя преломления. В некоторых случаях требуется более высокая точность и чувствительность анализа. Например, показатели преломления газов при обычных условиях близки к единице, отличаясь на несколько десятитысячных долей. Поэтому в газовом анализе используют интерферометры, принцип действия которых основан на интерференции света. Эти приборы позволяют измерять разности показателей преломления с точностью до 10^-7 - 10^-8 , что используется, например, для определения содержания метана в рудничном воздухе (переносные «шахтные» интерферометры) и для исследования обмена веществ при дыхании.

В данном разделе рассматривается рефрактометрический анализ двухкомпонентных систем, состоящих из растворителя и растворенного лекарственного вещества.

График зависимости показателя преломления от концентрации раствора может иметь различный вид. Если рассматривать весь диапазон возможных концентраций, то данная зависимость редко бывает линейной. Напротив, график часто имеет большую или меньшую кривизну, а иногда - максимумы или минимумы. Последнее означает, что одному значению показателя преломления могут соответствовать две различные концентрации раствора. Вместе с тем, на участках с большой кривизной при значительных изменениях концентрации раствора показатель преломления может меняться не столь существенно, что снижает точность рефрактометрических определений. Вышесказанное можно продемонстрировать на примере водных растворов этилового спирта (рис. 2). Из рисунка видно, что при концентрациях спирта от 0% до примерно 35% зависимость близка к линейной. При концентрациях более 60% показатель преломления изменяется очень незначительно, а при содержании этанола около 80% наблюдается точка максимума, и при дальнейшем увеличении концентрации показатель преломления уменьшается. Важно отметить, что при содержании спирта 58% и выше (кроме точки максимума) одному показателю преломления соответствуют дре различные концентрации спирта.

Поэтому рефрактометрический анализ водно-спиртовых растворов с целью определения концентрации спирта проводят при содержании этанола до 50%, а более концентрированные растворы перед измерением показателя преломления разбавляют или анализируют по плотности (см. раздел 4 «Рефрактометрический анализ спиртовых растворов»).

На примере водно-спиртовых смесей видно, что наиболее точный рефрактометрический анализ возможен только в определенном диапазоне концентраций. Для большинства лекарственных веществ верхний предел этого диапазона находится в области 20-30%.

При этом важно отметить, что регламентируется и нижний предел концентрации: в общем случае он составляет 3%. Это связано с тем, что при низком содержании вещества в растворе недопустимо возрастает относительная погрешность рефрактометрического анализа. Продемонстрируем это на примере растворов натрия хлорида с концентрациями 10% и 0,9% в герметически укупоренных флаконах по 400 мл. В обоих случаях колебаниям показателя преломления ±0,0001 (максимальная точность измерения) соответствуют колебания концентрации примерно ±0,06%. Но совершенно очевидно, что такие колебания имеют разное значение для 10% и 0,9%. В первом случае относительная погрешность определения концентрации (или массы, что то же самое) составляет 0,6%, во втором - 6,7%. Допустимое отклонение от прописанной массы для 400 мл 0,9% раствора (3,6 г) составляет 4%. Следовательно, относительная погрешность количественного определения 6,7% в данном случае неприемлема. Для 400 мл 10% раствора натрия хлорида относительная погрешность определения (0,6%) намного меньше допустимого отклонения от прописанной массы(± 3%).

Конечно, можно было бы возразить, что для 0,9% раствора натрия хлорида в ампулах по 5 мл и 10 мл допустимое отклонение от прописанной массы (0,045 г и 0,09 г) составляет 15%, а поэтому кажется, что относительная погрешность количественного определения 6,7% вполне приемлема. Но ведь и точность определения показателя преломления в реальных условиях ниже, чем ±0,0001 (согласно ГФ она должна быть не ниже ±0,0002). Следовательно, относительная погрешность определения концентрации (массы) может оказаться в два раза выше - примерно 13,4%, что близко к допустимому отклонению 15% и чего при количественном анализе следует избегать.

Из вышесказанного следует один частный, но очень важный вывод: изотонический раствор натрия хлорида не анализируют методом рефрактометрии.

Для определения концентрации раствора по показателю преломления существуют два подхода.

Первый подход заключается в использовании рефрактометрических таблиц, в которых приводятся значения показателей преломления и соответствующих им концентраций (или наоборот). В том случае, если в таблице отсутствует найденная экспериментально величина, для нахождения промежуточных значений используют метод интерполяции.

ПРОПИСЬ 65

Раствора магния сульфата 25% - 10 мл.

Измеренный показатель преломления составил 1,3551. Находим в рефрактометрической таблице ближайшие значения - 1,3550 и 1,3560. Им соответствуют концентрации 24,70% и 25,92%. Рассчитываем, на сколько изменяется концентрация при изменении показателя преломления на 0,0001: (25,92% - 24,70%) /10 = 0,122%. Отсюда, показателю преломления 1,3551 соответствуеr концентрация:

24,70% + 0,122% ≈ 24,82%.

Сущность второго подхода состоит в нахождении эмпирического уравнения, описывающего зависимость показателя преломления раствора от концентрации растворенного вещества (и наоборот). Согласно правилу аддитивности показателей преломления:

n = n₀ + n_x, (86)

где:

n - показатель преломления раствора вещества Х;

n₀ - показатель преломления растворителя (для дистиллированной воды

n_x - показатель преломления растворенного вещества Х (точнее - приращение показателя преломления раствора, приходящееся на растворенное вещество).

То есть показатель преломления раствора складывается из показателей преломления растворителя и растворенного вещества. При этом n_x (а соответственно и n раствора в целом) зависит от концентрации. Если эта зависимость линейна, то искомое уравнение в общем случае имеет вид:

n = n₀ + F_x x C_x, (87)

где:

F_х - фактор показателя преломления вещества Х - коэффициент линейного уравнения, физический смысл которого заключается в том, что он равен величине прироста показателя преломления при увеличении концентрации на 1 %; его размерность - % - 1;

С_х - концентрация раствора вещества Х, %.

Отсюда, для нахождения концентрации раствора вещества Х в процентах по показателю преломления, определенному с помощью рефрактометра, расчет ведут по формуле:

Если содержание определяемого компонента в препарате необходимо получить в граммах (mx), расчет ведут по формуле:

где:

F_х - фактор показателя преломления для массообъемной концентрации;

100 - коэффициент, служащий для перевода концентрации из % (г/100 мл) в г/мл;

V_{ПРЕПАРАТА} - общий объем препарата, мл.

Значение F находят для каждого конкретного вещества на основании экспериментальных данных (в случае линейной зависимости показателя преломления от концентрации строят калибровочные прямые и находят коэффициенты линейного уравнения: по методу наименьших квадратов). Примером линейной зависимости показателя преломления раствора от массообъемной концентрации растворенного вещества могут служить водные растворы глюкозы (рис. 3). Для этого лекарственного вещества фактор показателя преломления для массообъемной концентрации F=0,00142 %^-1 и линейное уравнение имеет вид:

Правило аддитивности, выраженное формулой (86) и практически являющееся основой расчетной рефрактометрии, работает только в ограниченных пределах концентраций - обычно до 10 - 20%. Соответственно, для большинства лекарственных веществ во всем диапазоне концентраций: зависимость n от С не линейна. Для описания такой зависимости можно использовать полиномы (многочлены), то есть уравнения общего вида:

где k - порядок полинома [полином первого порядка - это линейное уравнение (37)]. Примером нелинейной зависимости показателя преломления раствора от массообъемной концентрации растворенного вещества являются водные растворы магния сульфата (MgSO₄•7H₂O) - рис. 4. В данном случае эта зависимость описывается уравнением:

n = 1,3330 + 0,00096хС - 2,8х10^-6хС²

При большом значении k, то есть при достаточно большом числе членов, полиномы (40) могут хорошо описывать экспериментальные данные, однако их неудобно использовать для расчета концентрации. Поэтому было найдено следующее решение.

Очевидно, что при нелинейной функциональной зависимости фактор показателя преломления F меняется вместе с концентрацией. Учитывая это, на основании экспериментальных данных по формуле (91) были рассчитаны значения F для конкретных концентраций и составлены соответствующие таблицы зависимости фактора показателя преломления F от концентрации для ряда веществ (см приложение).

Можно также найти уравнение зависимости фактора показателя преломления от концентрации раствора. Например, для водных растворов магния сульфата уравнение зависимости показателя преломления от массообъемной концентрации (см. выше) можно записать в таком виде:

n = 1,3330 + (0,00096 - 2,8 х 10⁶ х С)хС

Из такой записи ясно, что зависимость фактора показателя преломления от массообъемной концентрации водных растиоров магния сульфата имеет вид:

F = 0,00096 - 2,8 х 10⁶ х С

В любом случае для расчета С_х в формулу (88) подставляют то значение F, которое соответствует предполагаемой концентрации вещества Х.

Рассчитаем концентрацию с использованием фактора F на примере прописи 65: раствор магния сульфата 25%. Фактор показателя преломления F для этой концентрации, найденный по рефрактометрической таблице, равен 0,00089. Измеренный с помощью рефрактометра показатель преломления n= 1,3 551. По формуле ( 88) рассчитываем концентрацию анализируемого раствора:

C = (1,3551-1,3330)/0,00089 = 24,83%.

!Примечание.

Форма графика, описывающего зависимость показателя преломления от концентрации растворенного вещества в значительной степени определяется способом выражения состава раствора. Если в одной системе координат эта зависимость, например, линейна, то в другой могут наблюдаться значительные отклонения от аддитивности. Например, на рис. 5 изобрюкены два графика, описывающие зависимость показателя преломления растворов сахарозы от концентрации. Сплошной линией показан график для концентрации, выраженной в виде массовой доли, пунктирной - для массообъемной концентрации. В первом случае график имеет относительно большую кривизну, во втором случае зависимость практически линейна. Поэтому в рефрактометрических таблицах всегда указывается, какому способу выражения концентрации соответствуют приводимые показатели преломления и факторы показателей преломления.

Учет температуры.

Для жидкостей и газов при повышении температуры (t) величина показателя преломления уменьшается, при понижении - увеличивается. Эта зависимость в узком температурном интервале (20°С ± 5°С) для разбавленных водных растворов приближенно описывается уравнением (92):

n^t ≈ n²⁰ + (20 - t) х 0,0001, (92)

где 0,0001 - температурный коэффициент dn/dt, °С^-1 .

Выражение (92) означает, что при изменении температуры на 1°С показатель преломления разбавленного водного раствора изменяется приблизительно на 0,0001.

Отсюда:

n²⁰ ≈ n^t - (20 - t) х 0,0001 (93).

Формулу (93) можно использовать вместо термостатирования исследуемой пробы.

На практике чаще применяют другой подход. Поскольку показатель преломления раствора складывается из показателей преломления растворителя и растворенного вещества [см. формулу (86)], то и температурный коэффициент раствора в целом (dn/dt) складывается из температурных коэффициентов растворителя (dn₀/dt) и растворенного вещества (dn_x/dt):

dn/dt = dn₀/dt + dn_x/dt (94)

Однако температурный коэффициент показателя преломления твердых тел в десятки раз меньше, чем у жидкостей. Поэтому для растворов твердых лекарственных веществ величиной можно dn_x/dt пренебречь:

dn/dt ≈ dn₀/dt (95)

Из выражения (95) следует правило: при колебаниях температуры (в пределах 20°С ± 5°С) показатели преломления растворителя и разбавленного раствора твердого лекарственного вещества изменяются практически на одну и ту жe величину. Это позволяет не термостатировать растворы, а определять показатель преломления растворителя и исследуемого раствора при одной температуре и использовать полученные значения в формуле (88) для расчета концентрации растворенного вещества. Поскольку это правило не распространяется на смеси жидкостей, то оно не может быть применено, например, к спирта-водным растворам при определении концентрации этанола (но может - при определении концентрации твердых веществ в спирте).

ПРОПИСЬ 66

Раствор глюкозы 10% - 100 мл.

Измерение показателя преломления раствора при 18°С дало результат 1,3475. Требуется найти концентрацию глюкозы.

Первый подход. По формуле (93) рассчитываем, что при 20°С показатель преломления должен быть равен 1,3473. По рефрактометрической таблице находим (с привлечением метода интерполяции), что такому значению n соответствует концентрация глюкозы 10,07%. Можно также по рефрактометрической таблице найти, что фактор показателя преломления F для растворов глюкозы равен 0,00142, и, используя формулу (38), рассчитать концентрацию глюкозы:

С = (1,3473 - 1,3330) / 0,00142 = 10,07%.

Второй подход. Используя вышеуказанное правило для водных растворов твердых веществ, измеряем при той же температуре показатель преломления воды очищенной - 1,3332. По рефрактометрической таблице находим, что фактор показателя преломления F для растворов глюкозы равен 0,00142. Подставляем найденные значения в формулу (88):

С = (1,3475 - 1,3332) / 0,00142 = 10,07%.

!Примечания.

Рефрактометрический анализ спиртовых растворов имеет ряд особенностей, требующих специального рассмотрения.

При исследовании спиртовых растворов ва призму рефрактометра рекомендуется наносить не менее 4 - 5 капель смеси. Вследствие летучести спирта анализ следует проводить быстро, а освещение призмы включать лишь в момент снятия показателя преломления.

Если исследование проводится не при 20°С, следует вносить поправку на температуру. Соответствующие величины температурных коэффициентов спирто-водных растворов на 1°С приведены в приложении. Температурная поправка равна произведению температурного коэффициента на величину отклонения от 20°С. Если определение проводится при температуре выше 20 °С, то поправку прибавляют к измеренной величине показателя преломления, если ниже 20 °С - поправку вычитают. (Примеры использования поправки - см. ниже.)

Анализ спирто-водных растворов может осуществляться в двух вариантах:

Факторы показателей преломления водных растворов лекарственных веществ с массообъемной концентрацией

*Коэффицент пересчета на безводную глюкозу - 1.11