
Самылина, И. А. Фармакогнозия. Атлас : в 3 т. Т. 1. Общая часть. Термины и техника микроскопического анализа в фармакогнозии : учебное пособие / И. А. Самылина, О. Г. Потанина. - 2-е изд. , перераб. - Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2022. - 192 с. - ISBN 978-5-9704-6727-5. |
Аннотация
Первый том атласа содержит классификацию терминов, необходимых при составлении описаний анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья, их расшифровку и иллюстрации к ним. Том включает технику микроскопического анализа лекарственного растительного сырья с учетом степени его измельченности и морфологических групп. Приведены алгоритмы составления микроскопических описаний листьев, цветков, трав, плодов, семян, кор и подземных органов, руководствуясь которыми легко составить любое микроскопическое описание. В работе представлено 305 иллюстраций, наглядно характеризующих анатомо-диагностические признаки лекарственного растительного сырья.
Атлас может представлять интерес для студентов фармацевтических факультетов, работников контрольно-аналитической службы по сертификации растительного сырья, заготовителей сырья, разработчиков нормативной документации на лекарственное растительное сырье, исследователей-фармакогностов, а также для работников научно-исследовательских институтов, производящих идентификацию растительных объектов.
Предисловие
В основу атласа «Фармакогнозия» положены результаты диссертационной работы на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук О.Г. Аносовой (О.Г. Потаниной), выполненной на кафедре фармакогнозии Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова - в настоящее время Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова (заведующий кафедрой - член-корреспондент Российской академии медицинских наук (в настоящее время - почетный заведующий кафедрой, член-корреспондент Российской академии наук), профессор И.А. Самылина), в отделе тибетской медицины Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук (г. Улан-Удэ).
В настоящей работе представлены наиболее часто используемые анатомо-диагностические признаки лекарственного растительного сырья, проиллюстрированные рисунками и фотографиями. Анатомо-диагностические признаки, вызывающие разногласия в литературе, охарактеризованы дополнительными рисунками. Техника микроскопического анализа цельного, измельченного, резаного, дробленого, порош-кованного сырья различных морфологических групп оптимизирована, описаны методики определения количественных характеристик анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья с учетом морфологических групп. Изложены алгоритмы описаний различных морфологических групп лекарственного растительного сырья при микроскопическом исследовании.
Предлагаемый труд является первой попыткой систематизации терминологии по микроскопии в фармакогнозии. При этом мы постарались максимально проиллюстрировать рассматриваемые анатомо-диагностические признаки и соответствующие им термины авторскими рисунками и фотографиями. Всего в книге приведено 305 иллюстраций. Кроме того, в работе представлено краткое руководство по технике микроскопического анализа лекарственного растительного сырья разных морфологических групп и различной степени измельченности с учетом уже накопленного опыта в фармакогнозии. Будем благодарны за все критические замечания и пожелания, которые возникнут при ознакомлении с работой и будут способствовать ее дальнейшему совершенствованию.
Выражаем признательность главному научному сотруднику Научно-исследовательского института фармации Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (в настоящее время - Институт фармации и трансляционной медицины Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. Сеченова), доктору фармацевтических наук, профессору Д.М. Попову за ценные советы и поддержку в ходе выполнения работы. Благодарим заслуженного деятеля науки РФ и Республики Бурятия, главного научного сотрудника лаборатории экспериментальной фармакологии Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, доктора медицинских наук, профессора С.М. Николаева и заслуженного деятеля науки Республики Бурятия, заведующего лабораторией медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, доктора фармацевтических наук, профессора Т.А. Асееву за помощь в работе и предоставление возможности использовать образцы тибетского лекарственного растительного сырья.
Введение
В одно мгновенье видеть вечность, Огромный мир - в зерне песка, В единой горсти бесконечность. И небо - в чашечке цветка.
У. Блейк. Прорицания невинности (пер. С. Маршака)
Лекарственные препараты растительного происхождения в настоящее время представлены различными формами. Лекарственное растительное сырье может быть цельным, измельченным, порошкованным, причем размер частиц порошка широко варьирует. Ассортимент лекарственных форм из лекарственного растительного сырья включает само сырье различной степени измельченности для приготовления настоев и отваров, а также брикеты, фильтр-пакеты, сборы, таблетки.
Стандартизация и контроль качества лекарственного растительного сырья и препаратов из него проводятся в соответствии с требованиями общих и частных статей ГФ XIV [16]. При этом наиболее важным является микроскопический анализ, поскольку с его помощью определяют подлинность лекарственного растительного сырья, то есть устанавливают его соответствие своему названию и, кроме того, выявляют наличие примесей. В действующей фармакопее предусмотрены общая и частные статьи, рассматривающие принципы использования микроскопии. В общих статьях изложены методика и техника применения этого метода, а также указаны основные подходы к анализу различных морфологических групп лекарственного растительного сырья, где обобщены наиболее важные анатомо-диагностические признаки, характерные для листьев, трав, цветков, корней, плодов и т.д. В частных статьях рассматривается конкретное лекарственное растительное сырье, где обычно перечислены основные анатомо-диагностические признаки для цельного, резаного сырья и для порошка. Имеется общая фармакопейная статья на сборы, где также в разделе подлинности приведены диагностические признаки при микроскопическом исследовании, но уже для смеси лекарственного растительного сырья.
Использование микроскопического анализа в указанном объеме позволяет дать объективную оценку подлинности лекарственного растительного сырья. Однако возникают трудности при анализе измельченного лекарственного растительного сырья и сборов, для которых труднее приготовить микропрепараты и ввиду того, что при измельчении часто волоски обламываются, кристаллы высыпаются и присоединяются к другим частицам (в сборах к частицам других растений), что не всегда дает возможность адекватно установить подлинность. Помимо этого, известно, что некоторые близкие растения имеют сходные анатомо-диагностические признаки, отличающиеся частотой встречаемости и размерами. В современных зарубежных фармакопеях, где также широко используется микроскопический анализ для определения подлинности лекарственного растительного сырья, помимо простого перечисления анатомо-диагностических признаков дополнительно нормируются их размеры, в частности в Фармакопее Германии [78], однако и здесь количественная характеристика представлена нормированием размеров 1-2 признаков или отсутствует совсем. Большинство зарубежных фармакопей содержит информацию о микроскопии примерно в том же объеме, что и отечественная фармакопея.
В соответствии с существующей нормативной документацией анализ лекарственного растительного сырья проводят, изучая подлинность и доброкачественность лекарственного растительного сырья, на основе которого приготовлены лекарственные формы.
Подлинность устанавливают путем осмотра внешних признаков лекарственного растительного сырья, с помощью качественных реакций и микроскопического анализа. Ценность осмотра внешних признаков может иметь место при анализе цельного и измельченного сырья. Определение подлинности по морфологическим признакам брикетов, фильтр-пакетов, порошков практически невозможно. Для этой категории лекарственных форм можно установить только цвет, запах, вкус (не всегда), что дает незначительную информацию о подлинности лекарственного растительного сырья.
Использование качественных реакций при определении подлинности допустимо для всех перечисленных видов лекарственного растительного сырья и лекарственных форм из него. Однако лекарственное растительное сырье содержит комплекс биологически активных веществ. Это требует разработки более тщательных методов очистки и выделения биологически активных веществ, и без должных методик подготовки проб снижается уровень достоверности результатов определения подлинности.
Наиболее достоверные результаты определения подлинности дает микроскопический метод. Значительный вклад в развитие этого метода в фармакогнозии был сделан А.Ф. Гам-мерман [13-15], Е.Я. Ладыгиной [20, 36, 71], А.А. Долговой [19, 20], Н.И. Терпило [70], И.А. Самылиной [37], В.А. Ермаковой [24]. Ими подготовлены учебные пособия, атласы определителей по анатомическим признакам, руководства к практическим занятиям по фармакогнозии.
В 1964 г. были представлены интересные предложения с целью улучшения диагностики лекарственных растений. Н.А. Анели [2] предложила ввести в число существующих анатомических признаков архитектурные особенности строения проводящей системы черешка листа и узла однолетнего стебля, так называемые текстуры. Она показала (в том числе привела рисунки), что многие растения в средней части черешка листа и узла имеют характерное типовое размещение проводящей системы (текстуры), которое является стойким признаком критерийного типа.
В.Е. Москалева [44] представила методы микроскопического исследования, исключая известные общеупотребимые, для анализа лекарственного растительного сырья. Ею описаны метод падающего света, фазово-кон-трастная микроскопия, микроскопия в поляризованном свете, гистохимический анализ, люминесцентная микроскопия, микрофотография. Эти методы позволяли работать с грубыми срезами, улучшали изучение некоторых деталей, друз оксалата кальция, локализацию действующих веществ. В.Е. Москалева дала также рекомендации по использованию в перспективе цветной микрофотографии и киносъемки. При этом значение рисунков не отрицается, их использование рекомендуется в совокупности с микрофотографией.
Однако существовавший объем знаний по микроскопии мог удовлетворить запросы по выявлению подлинности до определенного времени, когда лекарственное растительное сырье было представлено в основном в виде цельного и измельченного, а ассортимент лекарственных форм из него был небольшим.
Внедрение порошкованного лекарственного растительного сырья требует новых методических подходов к пробоподготовке и проведению самих исследований. Теме развития микроскопического анализа в применении к порошкованному и измельченному лекарственному растительному сырью в последние годы посвящен ряд работ И.А. Самылиной, В.А. Ермаковой, Н.В. Бобковой [7, 24-26, 30, 42, 43, 68]. Авторы рассматривали влияние из-мельченности лекарственного растительного сырья различных морфологических групп на проявляемость анатомо-диагностических признаков с целью совершенствования методов определения подлинности растительных порошков; влияние условий измельчения на диагностику растительных порошков; влияние условий измельчения и вспомогательных средств при таблетировании на диагностику растительных порошков при микроскопическом исследовании; разрабатывали критерии подлинности таблеток из лекарственного растительного сырья; рассматривали возможность идентификации растительных порошков в различных комплексных таблетках на основе лекарственного растительного сырья; разрабатывали критерии подлинности растительных порошков с целью совершенствования анализа брикетов; рассматривали возможности достоверной микроскопической диагностики сборов. Результаты исследования были внесены в разработанную нормативную документацию на растительные порошки и лекарственные средства на их основе.
Микроскопический анализ некоторых видов брикетированного растительного сырья проведен А.А. Долговой и Н.С. Игнатьевой [19].
Широкое внедрение порошкованного лекарственного растительного сырья показывает, что в настоящее время диагностические признаки трав уже не могут быть ограничены анатомо-диагностическими признаками листа и стебля, - необходимо рассматривать также анатомо-диагностические признаки цветков и плодов, учитывать микроскопию черешка в случае изучения листа. Цветки и травы в своем порошке содержат пыльцу - очень ценный анатомо-диагностический признак, который ранее не изучался.
Микроскопическое описание лекарственного растительного сырья, представленное в существующей литературе [13, 14, 20, 28, 36, 37, 48, 70, 71] и ГФ IV [16], не всегда дает точное представление о его анатомических особенностях. Часто опущены некоторые элементы (простые и головчатые волоски и др.), неточно описана их структура, неясно указан характер клеток эпидермиса, складчатости кутикулы. Достаточно подробные описания анатомо-диагностических признаков с цветными иллюстрациями новых видов лекарственного растительного сырья, используемого в народной и традиционной медицине, имеются в недавно вышедшем атласе [45], однако фармакопейные виды в нем практически отсутствуют.
Проведение анализа ряда видов лекарственного растительного сырья затруднено существующими родственными видами растений, не являющимися лекарственными, но имеющими те же анатомо-диагностические признаки, которые можно исключить путем введения нормирования размеров этих элементов, что предпринято в некоторых странах [78, 79].
ГФ РФ IV издания значительно переработана в сравнении с предыдущими изданиями, включая требования к микроскопическому анализу лекарственного растительного сырья. Данное издание предусматривает требования по расширению перечня анатомо-диагностических признаков трав, имеется требование по представлению нормы размеров анатомо-диагностических признаков, представлены методики их определения. С целью реализации перечисленных требований в настоящем атласе предложены методики определения количественных характеристик анатомо-диагностических признаков, уточнена терминология анатомо-диагностических признаков, представлены фотоиллюстрации.
ГЛАВА 1. Общая характеристика терминов анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья
ГФ IV, т. 2 в разделе «Методы анализа лекарственного растительного сырья» содержит описание анатомо-диагностических признаков различных морфологических групп сырья, используемых с лечебной целью [16]. Анализ описания анатомо-диагностических признаков общих и частных статей ГФ IV, т. 2, т. 4, а также Нормативной документации на лекарственное растительное сырье свидетельствует об отсутствии единых требований к используемым терминам, которые описывают анатомо-диагностические признаки, и к выбору самих этих признаков. Разнообразие характеристик одного и того же признака одного вида растительного сырья наблюдается и у разных авторов анатомических атласов и научных публикаций. Так, использование термина «извилистые стенки клеток» не всегда точно характеризует реальную картину рисунка эпидермиса [1] . Слабо и сильно выраженная извилистость до сих пор была субъективной характеристикой исследователя-микроскописта. «Извилистость» может быть представлена самым различным образом, что будет показано ниже, достаточно отметить, что синусоиды, составляющие извилистость стенок клеток, могут иметь равный или неравный шаг. Кроме того, листья одного растения в разных местах своего расположения на стебле и на всей листовой пластинке не всегда ограничиваются только одним видом извилистости стенок клеток, поэтому следовало бы перечислять все имеющиеся виды извилистости для предотвращения недоразумений у аналитиков-фармакогностов при проведении анализа подлинности. Аналогично можно рассмотреть термин «морщинистость кутикулы», вместо него используется термин «складчатость кутикулы». Так, примерно одинаковый характер кутикулы одного вида растения у разных авторов может быть охарактеризован как «продольно-бороздчатая кутикула», «продольно-складчатая кутикула», «продольно-морщинистая кутикула», а для описания одного и того же характера кутикулы могут быть использованы термины «гладкая» или «ровная»; «морщинистая», «складчатая» или «волнистая». Такое разнообразие в описании одних и тех же признаков объясняется отсутствием какого-либо руководства, где были бы собраны эти признаки и термины с объяснением последних. Необходимо дать единую систему и классификацию признаков с приведением соответствующих рисунков, с помощью которых разработчикам фармакопейных статей будет легко составить микроскопическое описание лекарственного растительного сырья, а аналитикам удобно находить необходимые анатомо-диагностические признаки.
Выполнению этой задачи и посвящена настоящая работа.
Следует отметить, что в литературе имеются некоторые попытки классификации некоторых анатомо-диагностических признаков растений. Методике описания листа посвящены работы С.Ф. Захаревича (1954) [29], Н.А. Анели (1964, 1975) [1, 2], Б.Р. Васильева (1988) [10]. Атлас по анатомии растений Н.С. Киселевой и Н.В. Шелухина (1969) [34] интересен приводимыми рисунками к используемым терминам. В работах В.А. Ермаковой (1999) [24], Н.В. Бобковой (1998) [7] рассматриваются анатомо-диагностические признаки порошков лекарственного растительного сырья, что практически отсутствует в ГФ ХI. В учебном пособии Л.И. Лотовой (2000) [38] по морфологии и анатомии растений, предназначенном для биологических факультетов университетов, приводятся современные представления об анатомии и морфологии растений. Все это в совокупности с собственным опытом использовано нами в дальнейшем для построения единой терминологической классификации анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья. Кроме того, в работе учтен накопленный опыт в области анатомии растений, изложенный В.Ф. Раздорским (1949) [67], А.А. Яценко-Хмелевским (1961) [77], В.Л. Комаровым (1941) [35], Е.А. Дубянской и Н.Т. Радциг (1950) [22], Е.А. Дубянской (1956) [23], Е.Я. Ладыгиной (1966) [36], В.Н. Карпович и Е.И. Беспаловой (1976) [33], В.К. Медведевой (1980) [39], Н.И. Гриневич и Е.Я. Ладыгиной (1989) [18], И.А. Самылиной и В.А. Северцевым (1999) [37], Г.П. Яковлевым и В.А. Челомбитько (1990) [76], А.А. Никитиным и И.А. Панковой (1982) [48], Н.И. Терпило (1961) [70], К. Эсау (1969, 1980) [74, 75] и др.
Ранее говорилось о важности знания размеров некоторых анатомо-диагностических признаков, имеющих диагностическое значение и способствующих дифференцированию лекарственного растительного сырья от близких видов растений и других примесей. Не меньшую важность имеют замеры частоты встречаемости ряда анатомо-диагностических признаков, поэтому далее в работе при перечислении ряда анатомо-диагностических признаков будут сделаны ссылки с рекомендацией снятия размеров и частоты их встречаемости.
Необходимо также пояснить, что описание анатомического строения растения просто характеризует микроскопическую структуру, что обычно встречается в ботанических исследованиях, и, поскольку преследует иные цели, чем описание микроскопии в фармакогнозии, имеет и иные подходы и иные требования к своему составлению.
Описание анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья представляет собой выборку анатомических признаков, отличающих данное сырье от других видов лекарственного растительного сырья, с указанием этих отличий на усредненном уровне, чтобы эти признаки мог найти любой аналитик лаборатории, не имеющий специального образования, а не научный работник, специализирующийся в области микроскопии растений.
При изложении материала в дальнейшем будут использованы следующие термины.
Анатомо-диагностические признаки - совокупность признаков анатомического строения лекарственного растительного сырья, отличающих данное лекарственное растительное сырье от других видов при диагностике его подлинности.
Диагностически значимые признаки - ана-томо-диагностические признаки, четко отличающие данное лекарственное растительное сырье от других видов, представленные в достаточном количестве в анализируемом объекте и сохраняющиеся при измельчении лекарственного растительного сырья до порошка с размером частиц 0,5 мм.
Диагностически значимые частицы - частицы (обрывки) порошка, несущие один или несколько диагностически значимых признаков.
1.1. Характер кутикулы
В ГФ IV в частных статьях на лекарственное растительное сырье приводятся описания кутикулы с использованием терминов «морщинистая кутикула» и «складчатая кутикула» [16]. В ряде частных статей отсутствуют сведения о характере кутикулы, чаще там, где она ровная, хотя это тоже анатомо-диагностический признак. В литературе характер кутикулы дифференцируется на бугорчатую, морщинистую, сетчатую, гребневидную, ячеистую и др. [38, 77]. Не все существующие виды характера кутикулы встречаются в лекарственном растительном сырье.
Чаще всего лекарственное растительное сырье имеет кутикулу:
1.1.1. Ровная кутикула - поверхность эпидермиса гладкая (рис. 1, а). Такую кутикулу имеют, например, листья сенны. Данный тип кутикулы широко представлен в растительном мире. В микроскопических описаниях рекомендуем для упрощения при наличии ровной кутикулы не упоминать о характере кутикулы, что будет подразумевать данный тип кутикулы.
1.1.2. Морщинистая кутикула - на поверхности эпидермиса имеются выступы в виде прямых или волнистых ребер (складки, морщины). Кутикула этого типа также широко распространена, однако расположение складок может быть различным. Поэтому данный тип кутикулы имеет следующие подтипы. А. Продольно-морщинистая - выступы в виде прямых или волнистых ребер направлены по длине клеток (рис. 1, б, д; рис. 2, 3). Чаще встречается именно этот подтип. Продольно-морщинистую кутикулу имеют листья подорожника, листья золототысячника, цветки календулы, цветки ромашки, цветки бузины. Б. Поперечно-морщинистая - выступы в виде прямых или волнистых ребер направлены по ширине клеток (поперек клеток) (рис. 1, в; рис. 4). Самый редкий подтип морщинистости, более характерен для лепестков и чашелистиков, а также наблюдается у некоторых листьев в местах прикрепления их к черешку. Данный подтип встречается у чашелистиков и лепестков золототысячника, листьев леспедецы даурской. В. Лучисто-морщинистая - выступы в виде прямых или волнистых ребер, которые расходятся в виде лучей от устьиц, волосков, желёзок, их мест прикрепления и др. (рис. 1, г; 4, слева; рис. 5). Чаще этот подтип морщинистости сопутствует продольно-морщинистому подтипу, но может быть и самостоятельным. Этот подтип кутикулы можно наблюдать в листьях вахты трехлистной, листьях золототысячника. Интересно проявляется данный подтип в листьях мать-и-мачехи, где центрами, рождающими лучистость, являются центры клеток.





1.1.3. Бородавчатая кутикула - эпидермис образует выступы в виде бугорков (бородавок) (рис. 1, е, ж; рис. 6, 7). В литературе, подразумевая данный характер кутикулы, используется еще термин «бугорчатая кутикула». Чаще бородавчатую кутикулу имеют волоски, например, в траве фиалки, в траве чабреца, в траве пустырника, в листьях мяты, в листьях сенны и др.


1.1.4. Штриховатая кутикула - эпидермис образует короткие выступы в виде штрихов (бугорков, бородавок) (рис. 1, з; рис. 8, 9). Данный характер кутикулы очень близок предыдущему - «бородавчатая кутикула». Однако данным термином традиционно принято обозначать характер кутикулы ровных поверхностей (листьев, лепестков и т.д.), а с помощью вышеописанного термина - характер кутикулы волосков. Возможно, в этом заложен следующий смысл: на более протяженных поверхностях бородавки и бугорки имеют тенденцию растягиваться по длине органа под действием соответствующих сил и образовывать более длинные штрихи. Тем не менее нарушать сложившиеся традиции мы не сочли нужным. Штриховатая кутикула характерна, например, для чашелистиков и волосков бузины, лепестков липы.


1.1.5. Гребневидная (или бороздчатая) кутикула - эпидермис образует грубые выступы в виде прямых линий (гребни или борозды) (рис. 1, и; рис. 10). Гребневидная кутикула отмечается, например, в черешках листьев мяты.
Кроме описываемых, в ботанической литературе имеются и другие виды характера кутикулы (сетчатая, ячеистая и др.). Однако они не встречаются среди используемого ассортимента лекарственных растений и поэтому нами не описываются.

Помимо этого, необходимо отметить, что характер кутикулы рассматриваемого объекта может быть представлен одним, двумя или несколькими типами, то есть комбинацией нескольких (чаще двух-трех) типов характера кутикулы, что необходимо отражать в микроскопическом описании лекарственного растительного сырья. При этом можно указывать преобладание того или иного типа характера кутикулы, а при необходимости - степень выраженности всех имеющихся типов по следующей шкале:
-
очень слабо выраженная - интенсивность складчатости, затрагивающая менее 25% всех имеющихся в поле зрения клеток;
-
слабо выраженная - интенсивность складчатости, затрагивающая менее 50% всех имеющихся в поле зрения клеток;
-
выраженная - интенсивность складчатости, затрагивающая примерно 50% всех имеющихся в поле зрения клеток;
-
сильно выраженная - интенсивность складчатости, затрагивающая более 50% всех имеющихся в поле зрения клеток;
-
очень сильно выраженная - интенсивность складчатости, затрагивающая более 75% всех имеющихся в поле зрения клеток.
Следует также обратить внимание при описании кутикулы на возможность отложения на ней воска в виде сплошного слоя или отдельных зернышек, палочек и т.д.
1.2. Форма клеток эпидермиса
Для описания формы клеток лекарственного растительного сырья всех морфологических групп можно выделить следующие их виды.
1.2.1. Изодиаметрические - длинная ось клетки приблизительно равна поперечной. А. Квадратная форма клеток (рис. 11, б; рис. 14, 15). Эпидермис, состоящий из клеток квадратной формы, имеется, например, на завязи череды, бессмертника и некоторых других видов семейства Asteraceae.
Б. Округлая форма клеток (рис. 11, а; рис. 12, 13). Данная форма клеток не характерна для эпидермиса [2].


В. Многоугольная форма клеток (рис. 11, в; рис. 16, 17). Изодиаметрические клетки многоугольной формы характерны для эпидермиса листьев мать-и-мачехи, листьев подорожника, листьев сенны и др.





1.2.2. Полигональные - длинная ось клетки длиннее поперечной в 1,5 раза и более. А. Овальная форма клеток (рис. 11, е; рис. 18). Редко встречающаяся форма клеток, присущая эпидермису; например, ее можно наблюдать в листьях ландыша.

Б. Прямоугольная форма клеток (рис. 111 г; рис. 19, 20). Характерна для стеблей, цветоножек, плодоножек, например стеблей череды, стеблей тысячелистника, стеблей ландыша, цветоножек боярышника и др.


В. Ромбовидная форма клеток (рис. 11, д). Эпидермис с такой формой клеток встречается у цветков календулы, листьев ландыша.
Г. Веретеновидная форма клеток (рис. 11, ж; рис. 21, 22). Эпидермис, состоящий из клеток веретеновидной формы, имеется у лепестков календулы, черешка подорожника, цветоножки ромашки.


Д. Комбинированная форма клеток (рис. 11, з; рис. 23, 24). Представляет собой сочетание нескольких (двух и более) видов форм клеток, например, листья ландыша имеют эпидермис, состоящий из клеток ромбовидно-веретеновидной, ромбовидно-овальной, веретеновидно-овальной формы. Кроме того, для более точной характеристики полигональных клеток можно указывать ширину их просвета в поперечном направлении:


1.3. Извилистость стенок клеток эпидермиса
Для характеристики извилистости стенок клеток предлагаем использовать следующую классификацию (рис. 25).

1.3.1. Прямые стенки клеток (рис. 25, а; рис. 26, 27) - линия оболочки клетки каждой стороны прямая. Широко распространенный вид извилистости стенок клеток. Клетки с прямыми стенками имеются в структуре эпидермиса листьев сенны, листьев мать-и-мачехи, стеблей череды, стеблей тысячелистника, цветков календулы и др.


1.3.2. Извилистые стенки клеток (рис. 25, б, в; рис. 28 - 33) - линия оболочки каждой стороны клеток представляет сочетание различных по длине и кривизне дуг. Наиболее распространенный вид извилистости стенок клеток эпидермиса. Наблюдается в листьях шалфея, в траве чабреца, траве зверобоя, траве пустырника, листьях мяты, цветках фиалки и др.






1.3.3. Волнистые стенки клеток (рис. 25, г; рис. 34 - 36) - линия оболочки каждой стороны клеток представляет собой сочетание более или менее одинаковых по длине и кривизне дуг.
Более характерен для цветков. Наблюдается в цветках ромашки, цветках василька, цветках золототысячника, цветках зверобоя.



1.3.4. Зигзагообразные стенки клеток (рис. 25, д; рис. 7) - линия оболочки каждой стороны клеток ломаная, состоящая из нескольких прямых разной длины, сходящихся под разными тупыми или острыми углами. Встречается в цветках бузины.
1.3.5. Зубчатые стенки клеток (рис. 25, е) - линия оболочки каждой стороны клеток ломаная, состоящая из многих более или менее одинаковых по длине прямых, сходящихся под одинаковыми тупыми или острыми углами.
При описании извилистости стенок клеток нужно иметь в виду, что могут встречаться клетки с сочетанием указанных типов извилистости их стенок, что также следует отражать в характеристике: извилисто-волнистые, зубчато-зигзагообразные и др.
При характеристике формы клеток и извилистости стенок клеток не принимается во внимание отрезок стороны, непосредственно прилегающий к устьицам, так как этот отрезок во всех случаях одинаково отражает формы замыкающих клеток устьица.
Для более точного определения извилистости стенок клеток необходимо отражать степень извилистости стенок клеток:
-
слабо (волнистые, извилистые, зубчатые и т.д.) (рис. 25, в, г; рис. 28, 29, 35) - если волны, извилины, зубцы и т.д. не доходят приблизительно до 1/2 расстояния от края до средней линии клетки (в чашелистике золототысячника, трубчатых цветках календулы, цветках ромашки, листьях шалфея и др.);
-
сильно (волнистые, извилистые, зубчатые и т.д.) (рис. 25, б, д; 31 - 33) - если волны, извилины, зубцы и т.д. заходят за более 1/2 расстояния от края до средней линии клетки (в листьях пустырника, в листьях мать-и-мачехи - нижний эпидермис; в листьях фиалки, цветках ромашки, листьях золототысячника и др.);
-
без указания степени выраженности извилистости (волнистые, извилистые, зубчатые и т.д.) (рис. 25, е; рис. 30, 34, 36) - если волны, извилины, зубцы и т.д. доходят приблизительно до 1/2 расстояния от края до средней линии клетки (в листьях чабреца, в листьях зверобоя, в прицветном листе липы и др.).

1.4. Утолщенность стенок клеток эпидермиса
Утолщенность стенок клеток эпидермиса можно характеризовать следующим образом (рис. 38).
1.4.1. Равномерная - стенки клеток в виде сплошных линий одинаковой толщины (рис. 38, а). Характерна для большинства видов лекарственного растительного сырья.
1.4.2. Четковидная - стенки клеток в виде как бы пунктирных линий из-за образованных пор в клеточных стенках (рис. 38, б; рис. 39 - 41). Встречается в листьях мать-и-мачехи, траве золототысячника, траве зверобоя, траве душицы и др.
Равномерная утолщенность характерна для большинства растений, поэтому в описаниях обычно не приводится. Четковидная утолщен-ность стенок клеток как более редкий признак при его наличии обращает на себя внимание и включается в описание.
1.4.3. Окончатая - эпидермис состоит из групп клеток, граничащих друг с другом утолщенными стенками, тогда как внутри группы стенки клеток тонкие (рис. 38, в; рис. 42). Характерна для плодов, например шиповника, боярышника, яблони Палласова.





1.5. Наличие устьиц и их форма
При описании эпидермиса необходимо отмечать наличие или отсутствие устьиц. При рассмотрении листьев отмечают наличие или отсутствие устьиц с обеих сторон листа.
Устьица могут отсутствовать либо располагаться только с одной (обычно с нижней) или с обеих сторон листа (встречается чаще всего).
Форма устьиц может быть следующая.



Кроме устьиц, иногда могут обнаруживаться чечевички, что также необходимо отмечать (рис. 46 - 48). Чечевички характерны обычно для стеблей, коры и корней, однако нередко они образуются на поверхности плодов и крайне редко - на поверхности листьев. Обычно такие чечевички появляются под устьицами и выглядят как разрушенные устьица. В качестве примера можно привести чечевички коры крушины, плодов яблони Палласова, листьев сенны. Помимо этого, в листьях эвкалипта на поверхности отмечаются пробковые пятна (рис. 49 - 52), которые ошибочно при беглом рассмотрении можно принять за чечевички или вместилища.







1.6. Тип устьичного аппарата
1.6.1. Аномоцитный тип (беспорядочно-клеточный) характеризуется наличием вокруг замыкающих клеток нескольких околоустьичных клеток, не отличающихся от остальных клеток эпидермиса; в их расположении нет четко выраженной закономерности. Данный тип наиболее часто встречается в растительном мире (рис. 53, 54).
1.6.2. Диацитный тип (двуклеточный) характеризуется двумя околоустьичными клетками, общая стенка которых ориентирована перпендикулярно устьичной щели. Характерен для семейств губоцветных и гвоздичных (рис. 55, 56).




1.6.3. Парацитный тип (параллельно-клеточный) - побочные клетки располагаются параллельно замыкающим и устьичной щели.
Найден у папоротников, хвощей и ряда цветковых растений, например в семействе бобовых (рис. 57 - 59).



1.6.4. Анизоцитный тип (неравноклеточный) имеет три околоустьичные клетки разных размеров. Встречается редко, у цветковых растений, например у золототысячника, очитка (рис. 60).

1.6.5. Тетрацитный (тетраперигенный) тип - устьице окружено четырьмя симметрично расположенными околоустьичными клетками: две клетки параллельны устьичной щели, а две другие примыкают к полюсам замыкающих клеток. Характерен для однодольных, например ландыша майского (рис. 61, 62).
1.6.6. Гексацитный тип - устьице окружено шестью околоустьичными клетками: две пары расположены симметрично вдоль замыкающих клеток, а две клетки занимают полярные положения. Характерен для однодольных.
1.6.7. Энциклоцитный тип - побочные клетки образуют узкое кольцо вокруг замыкающих клеток. Найден у папоротников, голосеменных и ряда цветковых.
1.6.8. Актиноцитный тип - характеризуется несколькими побочными клетками, радиально расходящимися от замыкающих клеток. Характерен только для цветковых.
Следует отметить, что иногда встречаются случаи, когда эпидермис листа, стебля или другого органа может быть представлен двумя типами устьичного аппарата, например в некоторых видах леспедецы.

1.7. Погруженность устьиц в эпидермис
Типы устьиц по уровню расположения относительно поверхности эпидермиса можно подразделить следующим образом.
1.7.1. Устьица, расположенные в одной плоскости с эпидермисом. Наиболее распространенный тип и обычно в описании микроскопии лекарственного растительного сырья не указывается, то есть данный пункт опускается. Диагностическими признаками будут либо выступающие, либо погруженные устьица.
1.7.2. Выступающие устьица - устьица, расположенные над эпидермисом. Обычно при вращении микровинта микроскопа (при опускании объектива) сначала обнаруживаются такие устьица, а уже затем появляются клетки эпидермиса, поэтому на фотографии запечатлеть их с поверхности листа практически невозможно, равно как и изобразить на рисунке. В одной плоскости с эпидермисом такие устьица можно увидеть на поперечных срезах, но для этого срез должен пройти через устьице, что трудно получить при их редком расположении на листе. Такие устьица характерны, например, для листьев толокнянки.
1.7.3. Погруженные устьица - устьица, погруженные в эпидермис. При наблюдении под микроскопом при вращении микровинта (при опускании объектива) сначала четко обнаруживаются клетки эпидермиса, затем становится возможным более четко увидеть контуры устьиц. На фотографиях и рисунках препаратов с поверхности их также трудно отобразить. Встречаются в листьях ландыша, листьях вахты, листьях эвкалипта. Иногда углубления, в которых располагаются устьица, выстланы или прикрыты волосками и называются устьичными криптами.

1.8. Типы устьичных клеток
В литературе описывается 19 типов [1], нами выбраны только те, которые используются в анализе лекарственного растительного сырья (рис. 63) [3].
1.8.1. Чечевицевидные - две одинаковые клетки полулунной формы расположены симметрично. На фронтальной плоскости утолщение оболочки почти равномерное. Щель веретеновидная (рис. 63, а; рис. 64). Тип устьичных клеток характерен для большинства растений.


1.8.2. Сферовидные - две одинаковые, сильно кругообразноизогнутые клетки расположены симметрично. На фронтальной плоскости утолщение оболочки почти равномерное. Щель круглая (рис. 63, б; рис. 65).
1.8.3. Колпачковидные - две одинаковые клетки полулунной формы в полярных частях имеют утолщения в виде колпачка. Щель веретеновидная (рис. 63, в). Встречаются у наперстянок [4].
1.8.4. Ладьевидные - внутренние стенки устьичных клеток утолщены. Щель веретено-видная (рис. 63, г; рис. 66, 67). Наблюдается в траве золототысячника, в листьях вахты.



1.9. Волоски
Анатомо-диагностические признаки, имеющие наибольшее значение и высокую вариабельность при определении лекарственного сырья. Волоски могут быть простые и головчатые, которые, в свою очередь, могут быть одноклеточными и многоклеточными. Многоклеточные волоски могут быть однорядными, двухрядными и ветвистыми.
1.9.1. Простые волоски.
А. Простые одноклеточные волоски (рис. 68).
-
Сосочковидные (рис. 68, а; рис. 69 - 74) - невысокие, но широкие выросты эпидермальных клеток. Чаще образуются на лепестках. Могут быть туповерхушечными и островерхушечными. Встречаются на листьях чабреца, цветках ландыша, цветках фиалки трехцветной, по краю листьев золототысячника, в траве горечавки бородатой и др.
-
Конусовидные (рис. 68, з, и; рис. 75 - 79) - прямые и наклоненные под углом к поверхности волоски, оканчивающиеся тупым (тупоконусовидные) или острым (остроконусовидные) концом. Наиболее широко распространенные волоски. Обычно бывают прямые. Наклоненные к поверхности волоски наблюдаются на листьях чабреца. Остроконусовидные волоски встречаются на листьях сенны, листьях брусники, в траве фиалки трехцветной (на листьях), в траве чабреца и др. Тупоконусовидные волоски имеются на эпидермисе плодов аниса, на лепестках цветков фиалки трехцветной.
-
Нитевидные (рис. 68, б, ж; рис. 80, 81) - тонкие и длинные волоски. Могут быть прямые и гофрированные. Прямые нитевидные волоски обнаруживаются на эпидермисе плодов боярышника и малины. Гофрированные тупонитевидные волоски наблюдаются на эпидермисе лепестков фиалки (рис. 82).
-
Ретортовидные (рис. 68, е; рис. 83) - волоски с расширенным основанием и узким изогнутым или прямым окончанием. Встречаются в соплодиях хмеля, траве зубчатки.
















-
Пузыревидные (рис. 68, в; рис. 84) - волоски в виде небольших пузырей. Их можно обнаружить, например, в цветках бессмертника.
-
Крючковидные (рис. 68, д; рис. 85 - 87) - волоски, заостренные на верхушке и изогнутые в виде крючка. Эти волоски можно встретить у основания листьев толокнянки, на поверхности листьев брусники, сенны, плодов аниса.








-
Двухконечные (рис. 68, к) - волоски, разветвленные на два конца. Наблюдаются в траве пастушьей сумки.
-
Трехконечные (многоконечные) (рис. 68, л-о) - волоски, разветвленные на три (и более) конца. Наблюдаются в траве пастушьей сумки.
-
Бугристые (рис. 68, п) - конусовидные волоски, имеющие выступы (бугры) на своей поверхности.
Б. Простые многоклеточные однорядные волоски.
Контур многоклеточного волоска может совпадать с таковым одноклеточного волоска, но содержать две и более клеток и соответственно называться как аналогичный одноклеточный волосок с указанием количества клеток, например 2-клеточный ретортовидный волосок, 11-клеточный нитевидный волосок, 10-15-клеточный конусовидный волосок.
Наиболее широко встречающиеся волоски.
Бывают прямые и наклоненные к поверхности, последние встречаются редко (например, в траве тимьяна). Конусовидные волоски могут быть остро- и тупоконусовидные. Более распространены остроконусовидные волоски (в траве душицы, в листьях мяты, шалфея и др.). Тупоконусовидные встречаются в цветках календулы.
-
Ретортовидные - волоски с расширенным основанием и узким изогнутым или прямым окончанием.
-
Пузыревидные (рис. 92, б; рис. 97) - волоски в виде небольших пузырей. Имеются на поверхности завязи бессмертника.
-
Крючковидные - волоски, заостренные на верхушке и изогнутые в виде крючка.
-
Гусеницевидные (рис. 98, 99) - волоски практически одинаковой толщины на всем своем протяжении, состоящие из почти одинаковых коротких клеток, с тупым концом и напоминающие гусеницу. Наблюдаются в траве фиалки трехцветной, в траве череды.








-
Бахромчатые (рис. 100) - длинные многоклеточные выросты эпидермальных клеток, расположенные по краю листа, лепестка или чашелистика. Встречаются в траве череды.
-
Бичевидные (рис. 92, г; рис. 101 - 104) - волоски, имеющие многоклеточное основание, состоящее из цепи коротких клеток, и длинную нитевидную извилистую конечную клетку. В литературе такие волоски описывают как кнутовидные, шнуровидные, нитевидные, войлочные. Тип волосков, характерный для семейства Asteraceae. Встречается в траве тысячелистника, цветках бессмертника, листьях мать-и-мачехи, цветках пижмы и др.







В. Простые многоклеточные ветвистые волоски.




-
Звездчатые (рис. 111) - волоски, состоящие из трех и более длинных извилистых клеток (волосков), сросшихся основаниями. Обнаруживаются в цветках липы.
-
Чешуйчатые (рис. 92, з) - волоски, состоящие из многоклеточной пластинки (в виде розетки) и короткой ножки (ножка может отсутствовать). Такие волоски имеются в облепихе. (Данное название волосков приведено в соответствии с современной ботанической терминологией [38]; по другим данным, эти волоски называют звездчатыми [39] или щитковидными чешуйчатыми [67].)
-
Т-образные (рис. 92, е) - двухконечный волосок, имеющий одно-, многоклеточную ножку. В литературе описываются также как рогообразные, коромыслообразные.
-
Перистые (рис. 92, д) - многоклеточные волоски, напоминающие ветвящееся дерево. Обнаруживаются, например, в коровяке.
Г. Простые многоклеточные многорядные волоски.
-
Двухрядные (рис. 92, ж; рис. 112, 113) - волоски, клетки которых расположены в два ряда. Их можно наблюдать в цветках календулы, в траве сушеницы.
-
Пучковые (рис. 92, и) - волоски, состоящие из двух и более клеток, плотно сросшихся друг с другом, образуя пучок.
-
Щетинистые (рис. 92, к; рис. 114) - многоклеточные волоски, состоящие из сросшихся друг с другом волосков разной длины и имеющие свободные заостренные концы. Такие волоски обычно являются волосками летучки (семейство Asteraceae). В литературе их еще называют зазубренными сложными, шилообразными.
1.9.2. Головчатые волоски. Головчатые волоски называют также желёзистыми. Они могут быть одноклеточными и многоклеточными (рис. 115).
А. Одноклеточные головчатые волоски.
Представители этого типа волосков могут быть конусовидными или ретортовидными, но всегда имеют на конце головку. Такие волоски есть, например, на листьях крапивы.
Б. Многоклеточные головчатые (железистые) волоски.













-
Волоски, имеющие одноклеточную головку и многоклеточную ножку (рис. 115, д; рис. 124). Встречаются в траве пустырника, листьях шалфея, цветках календулы и цветоножках ромашки.
-
Волоски, имеющие многоклеточную головку и многоклеточную ножку (рис. 115, ж; рис. 125). Встречаются в траве пустырника, листьях толокнянки, цветках липы, цветках календулы, траве фиалки.
-
Волоски, имеющие одноклеточную головку и двухрядную ножку (рис. 115, б; рис. 126). Встречаются в цветках календулы и бессмертника.



Встречаются в цветках календулы и бессмертника, в траве сушеницы топяной.








1.10. Характер утолщенности клеточных стенок и покрывающей кутикулы волосков
А. Характер утолщенности клеточных стенок.
1.10.1. Тонкостенные (рис. 135 - 137). Большинство волосков тонкостенные. Стенки клеток многоклеточных длинных тонкостенных волосков иногда спадаются, нарушая ровный контур волоска. Такие волоски, например, встречаются на нижнем эпидермисе листа какалии.
1.10.2. Толстостенные (рис. 138, 139). Встречаются в плодах шиповника, траве череды, траве лепедецы даурской и др.








1.10.3. Неравномерно утолщенные. Можно наблюдать в траве пустырника (рис. 140). К этой же категории относятся волоски шиповника с косопоперечными порами (рис. 141, 142).
Б. Характер покрывающей кутикулы волосков.
1.10.4. Гладкая поверхность (рис. 143). Волоски с такой поверхностью наблюдаются, например, в листьях подорожника, траве чистотела и др.
1.10.5. Бородавчатая поверхность (см. рис. 1, ж; рис. 144, 145) - эпидермис образует выступы в виде бугорков (бородавок). Имеются волоски, например, в траве фиалки, в траве чабреца, в траве пустырника, в листьях мяты, в листьях сенны и др. При этом поверхность волоска может быть слабобородавчатой, когда образуются небольшие выступы кутикулы, и грубобородавчатой, когда выступы образуются значительные. В первом случае в качестве примера можно привести волоски в траве фиалки, во втором - волоски листьев сенны и травы чабреца.
1.10.6. Крупнобугристая поверхность (см. рис. 68, п) - кутикула образует очень большие выступы, например волоски травы термопсиса ланцетного.
1.10.7. Морщинистая поверхность - складки или волны кутикулы волоска от основания к его вершине (рис. 146). Наблюдается чаще у сосочков, например, в траве золототысячника, цветках бузины. Однако морщинистая поверхность может быть и у обычных волосков, например в траве череды. У основания морщинистую поверхность имеют волоски листьев мяты (рис. 147).
1.10.8. Штриховатая поверхность - эпидермис образует короткие выступы в виде штрихов (бугорков, бородавок). Редко встречается и является промежуточным вариантом между бородавчатой и морщинистой поверхностью. Наблюдается, например, на волосках цветков бузины (рис. 148).






1.11. Особенности мест присоединения волосков
1.11.1. Обычные места прикрепления (рис. 149, 150) - волоски присоединяются к клетке или между клеток эпидермиса. Наиболее распространенный тип встречается, например, в листьях мать-и-мачехи, листьях мяты, листьях шалфея, траве пустырника, траве фиалки и др.


1.11.2. Выросты из клеток эпидермиса (см. рис. 68, а; рис. 69 - 74). Наблюдаются в цветках бузины, в траве золототысячника, лепестках пустырника, в траве горечавки бородатой, эпидермисе плодов аниса и др.
1.11.3. У основания волоска образуется розетка из клеток эпидермиса (рис. 151, 152). Имеется в листьях сенны, листьях подорожника, в траве душицы и др.


1.11.4. Расширенное основание волоска (рис. 153). Встречается в листьях подорожника.
1.11.5. Расширенная часть основания волоска погружена в цоколь из субэпидермальных тканей - эмергенцы (см. рис. 115, з). Можно наблюдать, например, в листьях крапивы.

1.11.6. Многоклеточное основание волосков (рис. 154). Можно наблюдать, например, в траве череды.

Нередко волоски обламываются, оставляя на эпидермисе местá своего прикрепления, что также необходимо отмечать как анатомо-диагностический признак лекарственного растительного сырья.
1.12. Гидатоды
Относятся к экзогенным секреторным структурам, нередко напоминают волоски. Гидатоды - структурно модифицированные проводящие и основные ткани, обычно встречающиеся в листе; такая модификация способствует выделению водно-солевых растворов через пору в эпидермисе (особые устьица) из подходящего к ним небольшого проводящего пучка; гидатода может обладать секреторной функцией. Обычно располагаются по краю листа или на его верхушке. Могут иметь различное строение, в простейших случаях представляют собой одноклеточные или многоклеточные волоски, внешне сходные с обычными кроющими волосками. Гидатода наблюдается, например, на кончике листа брусники.
1.13. Желёзки
В литературе, в том числе ботанической, четкого разделения между желёзистыми волосками и желёзками не проводится.
1.13.1. Тип яснотковые. При рассмотрении сверху желёзки круглые, с различным количеством клеток, обычно 4-8-клеточные (рис. 155, а, б; рис. 156 - 159). Характерны для семейства Lamiaceae.





1.13.2. Тип астровые. При рассмотрении сверху желёзки овальные, с ярусным расположением клеток (рис. 155, в, г; рис. 160 - 162). Характерны для семейства Asteraceae.

1.13.3. Щитковидные желёзки состоят из крупной округлоприплюснутой многоклеточной головки, образованной клетками двух типов: мелкими округлыми клетками, расположенными у основания желёзки; крупными, почти плоскими клетками, образующими купол над первыми, и короткой одно-, многоклеточной ножкой. Такие желёзки имеются в побегах багульника болотного, побегах рододендрона Адамса. В литературе описываются еще как желёзистые волоски.


1.13.4. Булавовидные желёзки имеют контур с расширенной конечной частью, напоминающей булаву (см. рис. 155, д), описываются еще как желёзистые волоски. Их можно наблюдать, например, в листьях брусники, траве фиалки.
Желёзки и желёзистые волоски относятся к экзогенным секреторным структурам. Диагностическими признаками являются также эндогенные структуры (канальцы, вместилища и др.).
Около желёзки может быть образована розетка из клеток эпидермиса (рис. 163), что также необходимо отмечать.

1.14. Эндогенные секреторные структуры
1.14.1. Клетки, содержащие масло, - клетки (идиобласты), содержащие эфирное масло (рис. 164, 165). Наблюдаются в корневище имбиря.
1.14.2. Клетки со слизью - клетки (идиобласты), содержащие слизи (рис. 166, 167). Наблюдаются в корне алтея, цветках липы.
1.14.3. Пигментсодержащие клетки - клетки (идиобласты), содержащие каротиноиды (например, в цветках календулы, пижмы), танины, алкалоиды, антоцианы и др. (рис. 168 - 170).
1.14.4. Кристаллоносные клетки - клетки (идиобласты), содержащие кристаллы (в корнях солодки, софоры, в листьях сенны), друзы (в корнях алтея, кровохлебки, в листьях сенны), рафиды (в траве ландыша), кристаллический песок (в листьях красавки), цистолиты (в листьях крапивы).
Кристаллы оксалата кальция бывают изо-диаметрической, палочковидной (рис. 171), ромбоэдрической, призматической формы. Чаще встречаются призматические кристаллы (рис. 172 - 184).





















Стиллоиды - это крупные игольчатые кристаллы (рис. 185).









Рафиды - это игольчатые кристаллы, собранные в плотные пачки и окруженные слизистым чехлом (рис. 194 - 196). Кристаллический песок - это собранные в одной клетке очень мелкие кристаллы оксалата кальция различной формы. Цистолит - кристалл углекислого кальция гроздевидной формы.



1.14.5. Эфиромасличные вместилища - округлые или овальные образования или тяжи, содержащие эфирное масло (рис. 197 - 203).







Могут быть схизогенные, лизигенные, схизолизигенные в зависимости от способа образования. Имеются, например, в листьях эвкалипта, в корнях девясила, плодах можжевельника, в растениях семейства цитрусовых, сельдерейных. Вместилища могут не содержать эфирное масло, а иметь иную природу, например, вместилища зверобоя и золототысячника (рис. 204 - 212).









Млечники (рис. 213 - 216), смоляные ходы, секреторные каналы (рис. 217 - 223). Такие структуры встречаются в корнях одуванчика, листьях мака (млечники), цветках василька, цветках ромашки, траве тысячелистника (секреторные каналы), почках сосны (смоляные ходы).











Часто для обозначения перечисленных структур пользуются понятием «идиобласты».
Идиобласт - клетка ткани, которая заметно отличается по форме, размеру или содержимому от других клеток той же ткани.
Идиобласты, лишенные секреторного содержимого, но отличающиеся по форме и размеру от других клеток, нередко встречаются в плодах (обычно среди клеток паренхимы мезокарпия) (рис. 224, 225).


1.15. Запасающие вещества
1.15.1. Инулин (рис. 226 - 228). Данный полисахарид характерен для запасающих тканей подземных органов растений семейства Asteraceae, например корней одуванчика, девясила.


1.15.2. Алейроновые зерна - запасной белок, который может накапливаться в клетках запасающих тканей семян. Иногда в них встречаются разные включения: кристаллы и друзы оксалата кальция (рис. 230, 231) (у некоторых сельдерейных - кориандра, аниса), глобоиды (рис. 229) (кальциевые и магниевые соли инозитфосфорной кислоты), кристаллы белка глобулина.








A. По сложению крахмал подразделяется на:
-
Простые крахмальные зерна - имеют один образовательный центр, обычно это одиночные зерна крахмала. Более распространенный вид крахмала среди лекарственных растений - это крахмал солодки, софоры, кровохлебки, валерианы, алтея.
-
Сложные крахмальные зерна - имеют два и более образовательных центра, представляют собой как бы сросшиеся отдельные крахмальные зерна. Сложные крахмальные зерна бывают 2-3-сложные, 2-5-сложные и др. Такую структуру имеет крахмал кровохлебки (редко), валерианы, алтея.
-
Полусложные крахмальные зерна - образуются путем наложения общих слоев на несколько крахмальных зерен. Растение может содержать один вид крахмальных зерен или совокупность двух или трех видов. Например, валериана, алтей и кровохлебка содержат одновременно простые и сложные крахмальные зерна.
Б. По форме крахмал бывает:
-
Округлой формы (в виде пластинок или шарообразной формы). Часто встречающаяся форма, в виде пластинок имеется в корневищах имбиря, в виде шарообразной формы - в корнях солодки, софоры, алтея.
-
Овальной формы (в виде пластинок или объемной шарообразной формы). Часто встречающаяся форма в виде пластинок содержится в корневищах имбиря, в картофеле, шарообразной формы - в корнях солодки, софоры, алтея.
-
Яйцевидной формы (в виде пластинок или яйца). Пластинки крахмала яйцевидной формы содержатся в корневищах имбиря.
B. По характеру слоистости:
Обычно крахмал накапливается в корнях, корневищах, корах, реже в плодах и семенах, чаще всего отсутствует в листьях и цветках.
1.15.4. Жирное масло. Обычно накапливается в виде капель в клетках запасающих тканей семян. Обильно капли жирного масла представлены в семени льна (см. рис. 229).
Клетки запасающих тканей могут быть хранилищами не одного, а нескольких типов веществ. Например, могут одновременно содержать жирное масло и алейроновые зерна (плоды аниса, кориандра, малины, можжевельника и др.), крахмал и алейроновые зерна (зеленые плоды можжевельника).
1.16. Структура мезофилла листьев
I. Гомогенный мезофилл. Листья содержат мезофилл одного типа. К листьям этого типа относятся листья сушеницы топяной.
II. Дифференцированный мезофилл. Листья содержат палисадную и губчатую паренхиму.
А. Палисадная паренхима (рис. 236) - паренхима мезофилла листа, характеризующаяся вытянутой формой клеток и расположением их длинных осей перпендикулярно поверхности листа.
Б. Губчатая паренхима - паренхима мезофилла листа с хорошо выраженными межклетниками. Форма клеток губчатой ткани может быть:
В зависимости от расположения палисадной и губчатой паренхимы структуру листа подразделяют на два типа.
-
Изолатеральный лист (рис. 237, 238) - палисадная паренхима расположена с обеих сторон листа, а губчатая находится в середине листа. Подобную структуру имеют листья эвкалипта, листья сенны.
-
Дорсовентральный лист (рис. 239, 240, 242 - 244) - палисадная паренхима расположена с одной стороны листа, а губчатая паренхима расположена с другой стороны листа. Такое строение имеют листья зверобоя, чабреца, мяты перечной, толокнянки, пустырника, душицы.









III. Наличие аэренхимы (см. рис. 241, 245). Аэренхима - паренхимная ткань, содержащая особенно крупные межклетники. Аэренхима может наблюдаться в листьях, лепестках, чашелистиках, черешках, стеблях, подземных органах, плодах и семенах. В структуре листа между клетками губчатой паренхимы образованы полости. К листьям этого типа относятся листья мать-и-мачехи, листья вахты трехлистной, листья фиалки.

1.17. Характер проводящей системы
Данный анатомо-диагностический признак имеет наибольшее значение для корней и корневищ.
1.17.1. Структура сосудисто-волокнистых пучков.
-
Открытые сосудисто-волокнистые пучки - пучки, в которых первичная ксилема и флоэма отделены одна от другой вторичными проводящими тканями, при этом между вторичной ксилемой и расположенной от нее снаружи вторичной флоэмой находится прослойка камбия. Характерны для двудольных растений.
-
Закрытые сосудисто-волокнистые пучки (см. рис. 237, 240, 244, 246) - пучки, которые состоят только из первичных тканей и не имеют камбия. Характерны для однодольных растений и большинства жилок (преимущественно мелких) листьев двудольных, в связи с чем структура сосудисто-волокнистых пучков не является анатомо-диагностическим признаком листьев.
1.17.2. Типы сосудисто-волокнистых пучков по взаимному расположению флоэмы и ксилемы.

-
Биколлатеральные сосудисто-волокнистые пучки - тяжи ксилемы располагаются между двумя тяжами флоэмы - внутренним и наружным. Характерны для двудольных растений, встречаются в стеблях, корневищах и листьях.
-
Радиальные сосудисто-волокнистые пучки - тяжи ксилемы чередуются с тяжами флоэмы, так как находятся на разных радиусах. Типичны для многих корней первичного строения.
-
Концентрические сосудисто-волокнистые пучки - одна из тканей (флоэма или ксилема) полностью окружает другую. Характерны для стеблей и корневищ.
-
Беспучковое строение - отсутствует характерное для пучков расположение флоэмы и ксилемы, в центре сосредоточена ксилема, флоэма расположена небольшими участками снаружи от ксилемы. Беспучковое строение характерно для многих корней вторичного строения и корневищ. Данный диагностический признак имеет значение для цельного сырья - корней и корневищ, реже стеблей. У большинства семенных растений листья имеют закрытые коллатеральные пучки, что обычно не отражается в микроскопической характеристике, так как наблюдается у многих растений и не является диагностическим признаком.
1.17.3. Типы утолщенности оболочек сосудов и трахеид.
-
Спиральное утолщение (рис. 247) - утолщение представляет собой спирально закрученные ленты. Встречаются, например, в корневищах имбиря.
-
Кольчатое утолщение - вторичная оболочка откладывается в виде колец, удаленных одно от другого или сближенных.
-
Пористое утолщение - небольшие участки стенок (поры) не подвергаются утолщению и одревеснению. Такая перфорация носит еще название «точечное утолщение».
-
Сетчатое утолщение (рис. 249 - 251) - возникает при срастании витков спиральных утолщений - вторичная оболочка откладывается на первичную, образуя рисунок в виде сети. Является подтипом пористого утолщения.
-
Лестничное утолщение (рис. 248, 250) - возникает при срастании витков спиральных утолщений - вторичная оболочка откладывается на первичную, образуя рисунок в виде лестницы. Является подтипом пористого утолщения.
Утолщения оболочек трахеид и сосудов могут представлять собой комбинацию нескольких типов утолщения, например сетчато-лестничное утолщение, кольчато-спиральное утолщение. Данный признак является актуальным обычно для корней и корневищ (реже стеблей и листьев). Проводящая система листьев, цветков и плодов чаще всего включает трахеиды со спиральным утолщением оболочек, что не является анатомо-диагностическим признаком и не отражается в микроскопической характеристике лекарственного растительного сырья.
1.17.4. Наличие кристаллоносной обкладки.
Обычно наблюдается вдоль проводящей системы корней семейства Fabaceae (корней солодки, корней софоры, корней стальника), может быть также вдоль жилок листьев (в листьях сенны, золототысячника) (рис. 252 - 256). В корнях и корневищах кристаллы расположены вдоль волокон, сопровождающих проводящую систему.










1.17.5. Особенности флоэмы.
Одновременное присутствие групп разрушенных ситовидных трубок, утративших более или менее клеточный характер, так называемого облитерированного луба, и функционирующих является анатомо-диагностическим признаком и часто встречается в структуре корней семейства бобовых (рис. 257 - 259).



1.18. Характер механической системы
1.18.1. Наличие колленхимы. Типы колленхимы.
-
Уголковая (см. рис. 238) - стенки многогранных клеток утолщены в углах.
-
Пластинчатая (рис. 260) - утолщены наружные и внутренние стенки клеток, клетки более или менее вытянутые параллельно поверхности органа (стебля, листа).
-
Рыхлая - в богатой межклетниками рыхлой колленхиме утолщены стенки клеток, ограничивающие межклетники.

1.18.2. Расположение колленхимы в листьях.
1.18.3. Наличие склеренхимы. Типы склеренхимы.
-
Склеренхимные волокна (рис. 261, 262) - длинные прозенхимные клетки с острыми концами и толстыми 1-2-слойными оболочками, имеющими немногочисленные простые щелевидные поры; в поперечных сечениях клетки многоугольные либо более или менее округлые.
-
Склереиды - паренхимные разветвленные или довольно длинные клетки с очень толстыми многослойными оболочками, пересеченными многочисленными поровыми канальцами, которые нередко выглядят ветвистыми. Морфологически очень разнообразны.
A. Каменистые клетки или брахисклереиды (рис. 263 - 273) - короткие изодиаметрические склереиды, обычно часто встречаются в плодах, корах, редко - в корнях, листьях.
Б. Астросклереиды - разветвленные склереиды, часто образуются в тканях, имеющих межклетники.
B. Волокнистые склереиды - по форме имеют сходство с волокнами (рис. 274).
Г. Остеосклереиды - склереиды, напоминающие берцовые кости.














-
Лубяные волокна (стереиды) - клетки, входящие в состав проводящей ткани (флоэмное волокно), морфологически схожи со склеренхимными волокнами, но отличаются происхождением. Группы лубяных волокон могут иметь кристаллоносную обкладку, например в коре крушины (рис. 275, 276), корнях семейства бобовых (рис. 277, 278).




Мелкие жилки обычно механических тканей не содержат (боковые жилки в листьях, жилки цветков и плодов).
Итак, в настоящем разделе работы рассмотрены и охарактеризованы анатомо-диагностические признаки лекарственного растительного сырья, которые можно использовать в той или иной совокупности для микроскопического описания различных морфологических групп. Далее разберем более подробно применение представленных признаков для характеристики конкретных морфологических групп.
ГЛАВА 2. Техника микроскопического анализа с учетом морфологической группы сырья
Техника микроскопического анализа описана и регламентируется общей фармакопейной статьей «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» ГФ IV, т. 2. При анализе различных морфологических групп лекарственного растительного сырья применяют разные методологические подходы при изготовлении микропрепаратов, их просветлении и окрашивании, учитывая степень измельченности сырья.
2.1. Листья
Цельное сырье. Для анализа цельного лекарственного растительного сырья берут цельные листья или кусочки пластинки листа с краем и жилкой, кусочки листа от основания и верхушки, кусочки черешка (если лист имеет черешок).
Просветляют двумя способами.
-
Несколько кусочков сырья помещают в колбу или пробирку, прибавляют 5% раствор натрия гидроксида, разведенный водой (1:2), и кипятят в течение 2-5 мин в зависимости от толщины и плотности объекта, не допуская сильного размягчения. Более жесткие листья (толокнянка, брусника, эвкалипт) кипятят до 5 мин, более хрупкие листья (крапива, чистотел) - до 2 мин. Затем содержимое переливают в стеклянный стакан, жидкость сливают через 2-4 слоя марли, которой закрывают стакан, и сырье тщательно промывают водой, каждый раз сливая воду через ту же марлю. Затем содержимое стакана переносят в небольшом количестве воды в чашку Петри. Частички сырья, оставшиеся на марле, также смывают в ту же чашку Петри. Из воды кусочки вынимают скальпелем или лопаточкой и помещают на предметное стекло в каплю раствора хлоралгидрата или глицерина.
-
Кусочки кипятят в растворе хлоралгидрата, разведенного водой (1:1), в течение 5- 10 мин (до просветления). Просветленный кусочек сырья помещают на предметное стекло в каплю раствора хлоралгидрата или глицерина.
Кусочки сырья, просветленные тем или иным способом и помещенные на предметное стекло, разделяют скальпелем или препаровальными иглами на две части, одну из них осторожно переворачивают. Кожистые и толстые листья раздавливают скальпелем или обратным концом препаровальной иглы. Кусочек черешка помещают на предметное стекло. Тонкие черешки раздавливают скальпелем или обратным концом препаровальной иглы для высвобождения эпидермиса. С толстых черешков снимают эпидермис с помощью препаровальных игл или бритвы, убирая грубые внутренние части черешка, мешающие получению хорошего микропрепарата эпидермиса. Объект накрывают покровным стеклом, при необходимости легко придавливают сверху чистым обратным концом препаровальной иглы. Слегка подогревают до удаления пузырьков воздуха и после охлаждения рассматривают лист с обеих сторон и эпидермис черешка под микроскопом сначала при малом, затем при большом увеличении. При разных увеличениях, пользуясь макро- и микровинтом, исследуют верхний и нижний эпидермис, а также глубинные структуры листа, расположенные под эпидермисом (паренхима, включения, сосуды и т.д.).
При анализе толстых и кожистых листьев (эвкалипт, толокнянка, брусника) готовят поперечные срезы. При необходимости также готовят поперечные срезы черешков, для чего используют два способа размачивания.
-
Листья (черешки) кипятят в растворе хлоралгидрата в течение 10 мин.
-
При отсутствии хлоралгидрата выбранные листья (черешки) и их кусочки помещают в воду на 1-2 ч, после размачивания переносят в смесь глицерин-вода-этанол (1:1:1), где выдерживают 1-2 сут до полного пропитывания тканей жидкостью. В этой жидкости материал можно хранить продолжительное время, для чего при приготовлении смеси к ней добавляют кристаллик фенола.
Из размоченных объектов делают срезы, зажимая кусочки листа (черешка) в бутылочную пробку (коровую) или сердцевину бузины. При использовании бутылочной пробки ее предварительно кипятят в воде 15 мин. Кусочек бузины или бутылочной пробки разрезают пополам между двумя половинками зажимают кусочек листа. Для изготовления поперечных срезов поверхность кусочка следует подготовить так, чтобы она была строго перпендикулярна к оси черешка или жилке листа. Для поперечного среза из листа вырезают небольшой участок, так чтобы попала средняя или боковая жилка, срез ведут перпендикулярно к жилке. Готовые срезы помещают в чашку Петри с водой, откуда срезы вынимают, просматривают под микроскопом, отбирая удачные.
При использовании первого способа размачивания срезы для их изучения заключают на предметном стекле в растворе хлоралгидрата. При втором способе размачивания срезы требуют дополнительного просветления, для чего их помещают в 5% раствор натрия гидроксида на предметном стекле, накрывают покровным стеклом и осторожно нагревают над пламенем горелки до полного просветления. После охлаждения микропрепарата с левой стороны покровного стекла помещают небольшой кусочек фильтровальной бумаги, а с правой начинают понемногу вводить пипеткой 33% раствор глицерина до получения препарата с бесцветной включающей жидкостью. Полученный микропрепарат изучают под микроскопом.
Измельченное сырье. Для анализа берут кусочки пластинки листа с краем и жилкой, кусочки листа от основания и верхушки, кусочки черешка (если лист имеет черешок). Далее с выбранными кусочками поступают так же, как с цельным сырьем.
Порошок. Для изучения порошка можно использовать два способа получения микропрепаратов.
-
При отсутствии хлоралгидрата на предметное стекло наносят 1-2 капли 5% раствора натрия гидроксида и небольшое количество порошка. Порошок берут кончиком препаровальной иглы, смоченной раствором натрия гидроксида, тщательно размешивают, закрывают покровным стеклом и нагревают над пламенем горелки до просветления. После охлаждения отсасывают фильтровальной бумагой раствор натрия гидрокси-да с одной стороны покровного стекла, добавляя с противоположной стороны пипеткой 33% раствор глицерина.
2.2. Цветки
Цельное сырье. Для анализа берут чашечку, венчик и цветоножку. Способы просветления используют те же, что и для листьев. Следует учесть, что тонкие лепестки кипятят в растворе натрия гидроксида не более 1 мин. Анализ цветоножки проводят аналогично анализу черешка листа. При необходимости делают поперечные срезы цветоножки.
Измельченное сырье. Для анализа берут кусочки чашечки, венчика и цветоножки. Если сырье имеет небольшие размеры, то берут цельные чашечку и венчик. Далее с выбранными кусочками поступают так же, как в случае с цельным сырьем.
Порошок. Микропрепараты готовят аналогично микропрепаратам порошка листьев.
2.3. Травы
Цельное сырье. Для анализа берут цельные листья или кусочки пластинки листа с краем и жилкой, кусочки листа от основания и верхушки, кусочки черешка (если лист имеет черешок); чашечку, венчик и цветоножку; кусочки стеблей; если есть и при необходимости - плоды. Используют способы просветления, описанные для листьев, цветков и плодов. Для исследования стеблей их кусочки кипятят в 5% растворе натрия гидроксида в течение 3-5 минут в зависимости от толщины и грубости объектов. Эпидермис снимают скальпелем или препаровальными иглами; из остальных тканей готовят препарат, раздавливая объект скальпелем на предметном стекле в растворе хлоралгидрата или глицерина. При необходимости готовят поперечные срезы, для чего используют методику приготовления поперечных срезов черешка листа, учитывая, что при помещении кусочков стеблей между двумя половинками пробки необходимо сделать бритвой соответствующие углубления для предотвращения сдавливания тканей исследуемого объекта.
Измельченное и резаное сырье. Выбирают кусочки листьев, цветков, стеблей, плодов или при их небольших размерах цельные перечисленные объекты. Далее с ними поступают так же, как с цельным сырьем.
Порошок. Микропрепараты готовят аналогично микропрепаратам листьев.
2.4. Плоды, семена
Цельное сырье. Готовят препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности или поперечные срезы.
Препараты кожуры и околоплодника с поверхности. Два-три семени или плода кипятят в пробирке в 5% растворе натрия гидроксида в течение 2-3 мин и тщательно промывают водой. Объект помещают на предметное стекло, препаровальными иглами отделяют кожуру семени или ткани околоплодника и рассматривают их в растворе хлоралгидрата или глицерина.
Ткани мезокарпия и эндокарпия рассматривают в давленых препаратах и на срезах. Давленые препараты получают при использовании обратного конца препаровальной иглы или скальпеля путем надавливания на объект в заключающей среде на предметном стекле.
Для приготовления срезов сухие плоды и семена предварительно размягчают, поместив их на сутки во влажную камеру (влажной камерой служит эксикатор с водой, в которую добавлено несколько капель хлороформа) или водяным паром в течение 15-30 мин или более в зависимости от твердости объекта.
Можно также использовать второй способ размачивания перед получением поперечных срезов, описанный в разделе «Листья», помещая при этом анализируемые объекты в воду на 1 сут, а затем в смесь глицерин-вода-этанол (1:1:1) на 3 сут.
Мелкие плоды и семена запаивают в парафиновый блок размером 0,5×0,5×1,5 см. Кончиком нагретой препаровальной иглы расплавляют парафин и в образовавшуюся ямку быстро погружают объект. Поверхность объекта должна быть сухой. Срезы объекта делают вместе с парафином; срезы выбирают из парафина препаровальной иглой, смоченной жидкостью, и готовят микропрепараты в растворе глицерина или хлоралгидрата.
Для изготовления срезов из мелких плодов и семян можно также использовать пробку бузины или бутылочную пробку. Техника приготовления срезов описана в разделе «Листья». Необходимо при этом в используемых половинках пробки делать углубления, соответствующие размерам плодов и семян.
Измельченное и дробленое сырье. Выбирают крупные кусочки плодов и семян. Получают препараты аналогично препаратам цельного сырья. Более удобно проводить анализ в давленых препаратах, для чего просветленные объекты раздавливают обратным концом препаровальной иглы или скальпелем на предметном стекле в заключающей жидкости.
Из более крупных кусочков при необходимости готовят поперечные срезы, заливая анализируемые объекты в парафиновый блок или используя пробку бузины или бутылочную пробку.
Порошок. Микропрепараты готовят аналогично микропрепаратам порошка листьев.
При исследовании строения клеток кожуры и околоплодника в порошке из плодов и семян, содержащих крахмал или незначительное количество жирного масла, препарат готовят в растворе хлоралгидрата при легком подогревании. При необходимости порошок обезжиривают и просветляют.
Для обезжиривания порошок сырья помещают в пробирку с притертой пробкой и заливают 2-3 раза смесью спирта с эфиром (1:3) и после настаивания каждый раз в течение 20 мин растворитель сливают. Вместо смеси спирта с эфиром для обезжиривания можно использовать ксилол или эфир.
Для просветления 0,5-1 г порошка насыпают в фарфоровую чашку, прибавляют 5-10 мл разведенной азотной кислоты и кипятят в течение 1 мин, затем жидкость процеживают через ткань и порошок промывают горячей водой. Остаток на ткани собирают лопаточкой обратно в фарфоровую чашку, обливают 5- 10 мл 5% раствора едкого натра, кипятят в течение 1 мин, снова процеживают через ту же ткань и промывают горячей водой. После этого порошок рассматривают под микроскопом.
Крахмал
-
Цельные плоды или кусочки плодов, размоченные по второму способу, или полученные срезы, или порошок сырья на кончике препаровальной иглы, смоченном заключающей жидкостью, помещают в 2-3 капли воды или 33% раствора глицерина на предметном стекле и рассматривают крахмальные зерна. Из цельного, измельченного и дробленого сырья делают давленые препараты. При изучении крахмальных зерен определяют их форму, строение, размеры измеряют окулярным микрометром.
-
Цельные плоды или кусочки плодов, размоченные по второму способу, или полученные срезы, или порошок сырья на кончике препаровальной иглы, смоченном реактивом, помещают в 2-3 капли раствора Люголя, накрывают покровным стеклом и рассматривают крахмальные зерна. Из цельного, измельченного и дробленого сырья готовят давленые препараты, в которых рассматривают крахмал. Крахмальные зерна приобретают синее или сине-фиолетовое окрашивание. Необходимо учитывать, что окраска исчезает при нагревании. Приготовленный препарат следует анализировать сразу после его приготовления, так как окраска сохраняется недолго.
Жирное и эфирное масло
-
Эфирные масла наблюдают без применения красителей в виде капель светло-желтого, темно-желтого, зеленовато-желтого, коричневато-красного цвета.
-
Жирные и эфирные масла обнаруживают по реакции окрашивания с раствором судана III, для чего цельные плоды, кусочки плодов, готовые срезы или порошок на кончике препаровальной иглы, смоченном реактивом, помещают в 2-3 капли раствора судана III, накрывают покровным стеклом и нагревают. Из цельного, измельченного и дробленого сырья готовят давленые препараты в используемом реактиве. Капли жирного или эфирного масла окрашиваются в оранжево-розовый или оранжево-желтый цвет.
-
Для отличия эфирных масел от жирных масел объекты погружают в 2-3 капли водного раствора метиленового синего. Через несколько минут их рассматривают в воде или глицерине. Эфирное масло окрашивается в синий цвет.
Слизь. Цельное и дробленое сырье измельчают в порошок. Для обнаружения слизи готовят препарат порошка в растворе черной туши, для чего порошок сырья на кончике препаровальной иглы, смоченном в используемом реактиве, помещают в 2-3 капли раствора черной туши, тщательно размешивают, накрывают покровным стеклом и тотчас рассматривают под микроскопом (малое увеличение); слизь заметна в виде бесцветных масс на черном фоне.
2.5. Кора
Цельное сырье. Готовят поперечные или продольные срезы коры. Кусочки коры размером 2-3×0,5-1 см кипятят в колбе или пробирке с водой в течение 5 мин. Размягченные куски выравнивают скальпелем так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в растворе хлоралгидрата или глицерина. При необходимости готовят препараты в соответствующих реактивах для выявления различных структур или веществ в соответствии с ГФ IV, т. 2, ст. «Кора».
Измельченное, резаное и дробленое сырье. Анализируют согласно методикам ГФ IV, т. 2, ст. «Кора».
Порошок. Проводят анализ согласно методикам ГФ IV, т. 2, ст. «Кора».
2.6. Корни, корневища, клубни, луковицы, клубнелуковицы
Цельное, измельченное, резаное и дробленое сырье. Анализируют согласно ГФ IV, т. 2, ст. «Корни, корневища, клубни, луковицы, клубнелуковицы».
Порошок. Микропрепараты порошка готовят аналогично микропрепаратам порошка листьев. Наличие одревесневших элементов, крахмала, слизи, жирного и эфирного масел, дубильных веществ и производных антрацена определяют, как указано в разделе «Плоды и семена» и ГФ IV, т. 2, ст. «Кора».
2.7. Количественная характеристика анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья
Метод микроскопии используется для получения различных количественных характеристик. В ботанике, цитологии, цитоэмбриологии и биологии в целом для проведения измерений и подсчетов применяют объект-микрометры и окулярмикрометры [6, 17, 22, 27, 35, 40, 41, 46, 47, 51, 52, 65, 67, 69, 72, 73]. С их помощью определяют величину различных объектов: клеток, устьиц, волосков, трихом, желёзок и т.д. С помощью микрометрического винта микроскопа можно измерить толщину объекта. Зная площадь поля зрения микроскопа, можно произвести пересчет количества структурных элементов (устьиц, волосков и др.) на единицу площади (на 1 мм2 ) органа, ткани. В ботанических исследованиях прибегают к количественной оценке при определении влияния внешней среды на структуру вегетативных органов высших растений. Для этого определяют толщину и площадь тканей на поперечных срезах, количество слоев клеток, составляющих ткань; измеряют диаметр межклетников в листьях и диаметр сосудов главной жилки; устанавливают число проводящих пучков в 1 мм листовой пластинки (у злаков), определяют размеры некоторых других элементов; определяют соотношение разных тканей органа, которое выражается числами, характеризующими площадь каждой ткани в процентах от площади поперечного среза всего органа или его части; рассчитывают удельную площадь черешка (стебля), флоэмы черешка, ксилемы черешка, удельную проводящую площадь черешка (стебля), соотношение ксилемы и флоэмы в органе или отдельном проводящем пучке [40, 41, 69, 73]. Для характеристики засухоустойчивости растений определяют анатомические коэффициенты посредством подсчета устьиц на единицу площади [11, 12].
Определение размеров анатомо-диагностических признаков. Для снятия размеров анатомо-диагностических признаков пользуются объект-микрометром и окуляр-микрометром. Единицей для измерения микроскопических объектов служит микрометр (мкм), ранее использовался микрон (μ), составляющие 0,001 мм. Окуляр-микрометр вкладывается в окуляр, его шкала может быть различной в зависимости от объектива. Объект-микрометр имеет шкалу, представляющую собой 1 мм, разделенный на 100 частей, то есть 1 деление равно 0,01 мм, или 10 мкм. Объект-микрометр ставят на столик микроскопа, а шкалу ставят так, чтобы она совпала со шкалой окуляр-микрометра. Определив значение одного деления окуляр-микрометра, снимают объект-микрометр и при том же объективе измеряют требуемый объект.
Пример 1. При совмещении шкал окуляр-и объект-микрометров обнаружено, что 50 делений окуляр-микрометра совпадает с 10 делениями объект-микрометра.
50 делений окуляр-микрометра = 10 делениям объект-микрометра × 10 мкм = 100 мкм. Цена деления окуляр-микрометра составляет:
1 деление окуляр-микрометра = 100 мкм / 50 = 2 мкм.
При измерении простого волоска установлено, что его высота составляет 10 делений окуляр-микрометра. Реальный размер этого волоска составит: 10 × 2 мкм = 20 мкм.
Пример 2. 40 делений окуляр-микрометра точно совпадают с 9 делениями объект-микрометра. Цена деления окуляр-микрометра соответствует:
1 деление окуляр-микрометра = 9 × 10 мкм / 40 = 2,25 мкм.
При измерении диаметра эфиромасличной желёзки установлено, что он составил 5 делений окуляр-микрометра. Реальный размер эфиромасличной желёзки соответствует: 5 × 2,25 мкм = 11,25 мкм.
Определение частоты встречаемости анато-мо-диагностических признаков на единицу площади (1 мм2 ) органа, ткани (эпидермиса). Для определения частоты встречаемости сначала необходимо вычислить площадь поля зрения микроскопа (при той же комбинации объектива и окуляров, при которой будет проводиться подсчет) по формуле:
S = рr2 ,
где S - площадь поля зрения микроскопа; r - радиус поля зрения микроскопа; р = 0,1416.
Диаметр (d) поля зрения микроскопа измеряется объект-микрометром. Зная цену деления объект-микрометра (см. маркировку на пластинке объект-микрометра), легко вычислить диаметр поля зрения микроскопа. Затем подсчитывают количество изучаемых структурных элементов (анатомо-диагностических признаков) в поле зрения микроскопа (при условии, что изучаемая ткань или орган занимают все поле зрения микроскопа). Количество изучаемых структурных элементов (анатомо-диагностических признаков) на единицу площади в 1 мм2 определяют по формуле:
N = n × 1 (мм2 ) / S,
где N - количество изучаемых структурных элементов (анатомо-диагностических признаков) на единицу площади в 1 мм2 ; n - количество изучаемых структурных элементов (анатомо-диагностических признаков) в поле зрения микроскопа; S - площадь поля зрения микроскопа.
Отношение 1 (мм2 ) / S является постоянным коэффициентом для данной оптики, на который можно умножать подсчитанное количество структурных элементов в поле зрения, не составляя каждый раз уравнение.
Пример 3. d = 420 мкм = 0,42 мм; r = 210 мкм = 0,21 мм; r2 = 0,0441 мм2 ; S = 3,1416 × 0,0441 = 0,138 мм2 .
В поле зрения подсчитано 52 устьица. Количество устьиц на площадь 1 мм2 вычисляют:
N = 52 × 1 / 0,138 = 52 × 7,25 = 377.
Таким образом, на площадь эпидермиса листа в 1 мм2 приходится 377 устьиц. 7,25 - постоянный коэффициент для данной оптики.
Измерение толщины объекта (лепестков и чашелистиков). При измерении толщины пользуются микрометрическим винтом микроскопа. Сначала наводят на резкость верхнюю поверхность измеряемого объекта, а затем - нижнюю. Отмечают разность в обоих положениях микровинта по делениям, которые на нем имеются. Эти деления обычно соответствуют микрометрам. При применении иммерсионных объективов эта величина равна толщине объекта, при объективах сухих систем ее надо умножить на 1,5, то есть на соотношение между показателями преломления стекла и воздуха.
Таким образом, в зависимости от морфологической группы сырья и степени его измельченности используют различные подходы техники микроскопического анализа. Количественная оценка анатомо-диагностических признаков проводится во всех рассматриваемых морфологических группах лекарственного растительного сырья одинаково. Однако частота встречаемости признаков обычно учитывается на эпидермисе листьев, черешков, лепестков, чашелистиков, цветоножек, стеблей, плодов, семян, плодоножек. При необходимости измеряется толщина лепестков и чашелистиков.
ГЛАВА 3. Выбор оптимальной совокупности анатомо-диагностических признаков в фармакогностическом анализе разных морфологических групп лекарственного растительного сырья
3.1. Анатомо-диагностические признаки листа
Для описания листа рекомендуется использовать следующие признаки.
Примечание. А - верхний эпидермис; Б - нижний эпидермис; В - поперечный срез;* - снятие размеров; ** - снятие размеров и определение частоты встречаемости.
В диагностике листьев наибольшее значение обычно имеют анатомо-диагностические признаки, расположенные на эпидермисе, которые обнаруживаются на препаратах с поверхности. Поперечные срезы используются редко, так как проводящая система листьев лекарственных растений обычно мало различается, а структура мезофилла как вспомогательный признак имеет значение, но четко определить видовую принадлежность лекарственного растительного сырья не всегда позволяет. Наличие аэренхимы, просвечивающей под эпидермисом, можно обнаружить в поверхностных препаратах листа. Аналогично наблюдаются всевозможные эндогенные структуры, включая кристаллы, для чего можно воспользоваться вращением микровинта. Техника приготовления поперечного среза листа для рядового аналитика-фармакогноста вызывает трудности. Особенно трудно приготовить поперечный срез из измельченного сырья. Для порошка признаки поперечного среза значения не имеют, хотя чаще лекарственное растительное сырье используется именно измельченным и порошкованным. Тем не менее в некоторых случаях все же прибегают к приготовлению поперечных срезов. Такая необходимость возникает при рассмотрении кожистых толстых листьев, плохо просветляющихся (толокнянка, эвкалипт), глубинные элементы которых становятся доступными для рассмотрения при приготовлении поперечных срезов.
Все рассмотренные признаки будут иметь место при анализе цельного и измельченного сырья. В растительном порошке будут наблюдаться обрывки различных участков листа.
В порошке с размером частиц свыше 0,5 мм в рассматриваемых обрывках можно будет различить практически все указанные признаки. В силу того что некоторые частицы могут быть плохо просветленными и иметь трудноразличимый эпидермис на толстом кусочке листа; у растений с сильным опушением эпидермис может быть густо закрыт волосками; из-за технологических особенностей получения порошка и особенностей структуры листа некоторые элементы эпидермиса могут быть утеряны (обломаны волоски, желёзки); из-за разрушения клеток могут быть высыпаны кристаллы, и они появятся на разных обрывках, реальные анатомо-диагностические признаки могут быть искажены, поэтому все вышеперечисленные особенности должны быть учтены при индивидуальном отборе признаков порошка каждого вида лекарственного растительного сырья.
Еще более затруднено выделение анатомо-диагностических признаков в порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм. Здесь также могут быть обрывки различных участков эпидермиса листа, но вышеуказанные особенности будут проявляться в большей степени. Поэтому больше внимания следует уделить единичным элементам: отдельным волоскам, желёзкам, кристаллам, особенностям клеток и др.
Таким образом, в силу индивидуальных особенностей каждого растения необходим и индивидуальный подход выбора признаков каждого вида лекарственного растительного сырья.
3.2. Анатомо-диагностические признаки травы
Анатомо-диагностические признаки травы включают признаки листа (рассмотренные выше), стебля, цветков (будут рассмотрены ниже), в некоторых случаях - плодов (будут рассмотрены ниже).
В диагностических целях в стебле необходимо рассматривать следующие признаки.
Примечание: * - снятие размеров; ** - снятие размеров и определение частоты встречаемости.
Поскольку более всего элементы стебля интересны при диагностике растительных порошков, рассмотрение проводящей и механической систем стебля можно исключить, так как в порошке обычно индивидуальность этих систем теряется (расположение их практически рассмотреть невозможно, а сами составляющие этих систем встречаются у большинства растений). Цельные и измельченные травы достаточно полно можно диагностировать, используя указанные анатомо-диагностические признаки стебля в совокупности с признаками листьев, цветков и плодов. Поэтому рассмотрение поперечных срезов стеблей возможно в исключительных случаях, например при возникновении спорных вопросов или других причин. Наибольшее значение для фармакогнозии имеют препараты стебля с поверхности. Эндогенные структуры и запасающие вещества легко обнаруживаются в давленых препаратах и продольных срезах, приготовление которых менее трудоемко в сравнении с изготовлением поперечного среза. Секреторные каналы, млечники и другие подобные структуры в растительных порошках встречаются именно в продольном сечении.
Следует отметить, что чаще встречаются стебли с клетками эпидермиса прямоугольной формы, с ровными стенками и более редко, чем на листе, расположенными устьицами. Остальные анатомо-диагностические признаки чаще всего совпадают с таковыми листа, но могут иметь иные размеры и частоту встречаемости.
Порошок травы представлен обрывками листьев, стеблей, цветков и плодов. Среди обрывков стебля будут иметь значение обрывки эпидермиса, обрывки более глубинных структур с млечниками, вместилищами, кристаллами и другими характерными анатомо-диагностическими признаками.
3.3. Анатомо-диагностические признаки цветков
Анатомо-диагностические признаки цветков рассматривают в препаратах лепестков, чашелистиков, листочков обвертки корзинки (при ее наличии). Описание эпидермиса названных элементов проводят в соответствии с рассмотренным описанием анатомо-диагностических признаков листа. Мезофилл названных элементов цветка обычно бывает однороден, проводящая система чаще представлена спиральными трахеидами, механическая ткань отсутствует, поэтому для микроскопической диагностики цветков названные признаки значения не имеют и, следовательно, не вызывают необходимости приготовления поперечных срезов рассматриваемых объектов. Кроме перечисленного, рассматривают пыльцу. Это достаточно важный диагностический признак, особенно для порошкованного сырья, которому до сих пор внимания уделялось незаслуженно мало.
3.3.1. Форма пыльцы.
-
Округлая (см. рис. 279 - 286, 288 - 294, 298 - 302). Такую пыльцу имеют цветки пустырника, бессмертника, ландыша, боярышника, череды, пижмы.
-
Овальная (см. рис. 287, 291, 292, 295 - 97, 301, 302). Подобная пыльца наблюдается в цветках чабреца, василька, душицы.
-
Округло-угловатая. В свою очередь, может быть:
-
A. Округло-трехгранная (см. рис. 279 - 282, 289, 290, 293, 298 - 300, 303). Данный тип пыльцы отмечается в цветках ромашки, боярышника, липы.
-
Б. Округло-четырехгранная (см. рис. 284, 288, 291). Присутствует, например, в цветках фиалки, чабреца.
-
B. Округло-пятигранная (см. рис. 291, 292). Имеется в цветках чабреца.
-
Г. Округло-шестигранная (см. рис. 291, 292). Наблюдается в цветках чабреца, душицы.
-
Д. Округло-многогранная. Е. Сочетание нескольких типов (см. рис. 284, 291, 292). Например, в цветках чабреца одновременно присутствует четырех-,пяти-, шестигранная пыльца.
-
-
Комбинация нескольких типов (см. рис. 279 - 282, 289 - 293, 298 - 302). Цветки пустырника содержат округлую и округло-угловатую (трехгранную) пыльцу, цветки чабреца - овальную и округло-многогранную.
3.3.2. Характер поверхности пыльцы.
-
Гладкая - поверхность экзины ровная (см. рис. 288 - 290, 293, 294, 298 - 300). Гладкую поверхность имеет пыльца чабреца, василька, пустырника, душицы, боярышника, ландыша.
-
Шиповатая - поверхность экзины имеет выросты в виде бугорков, шипиков (см. рис. 283 - 286). Такой характер поверхности пыльцы встречается в цветках бессмертника, ромашки, пижмы, череды.
-
Шероховатая - поверхность экзины имеет многочисленные незначительные неровности, что придает ей неровный (шероховатый) вид (см. рис. 279 - 282, 287, 291, 292, 295 - 297, 301, 302). Наблюдается в цветках душицы, чабреца, василька.
3.3.3. Характер апертур (утонченных мест) экзины.
-
Бороздные пыльцевые зерна - экзина имеет утонченные места (апертуры), через которые прорастают пыльцевые трубки, в виде борозд. Борозд может быть от одной до множества. Трехбороздную (см. рис. 279 - 282, 287, 289, 290, 293, 298 - 303) пыльцу имеют цветки бузины, зверобоя, пустырника; четырехбороздную (см. рис. 287, 288, 291) - цветки фиалки, цветки чабреца; пятибороздную (см. рис. 291, 292) - цветки чабреца; шестибороздную (см. рис. 291, 292) - цветки душицы, чабреца.
-
Поровые пыльцевые зерна - экзина имеет утонченные места (апертуры), через которые прорастают пыльцевые трубки, в виде пор. Пор может быть от одной до множества. Трехпоровую (см. рис. 283 - 286, 295 - 297) пыльцу имеют цветки тысячелистника, череды, пижмы, ромашки, бессмертника, сушеницы, то есть в основном представители семейства Asteraceae. Четырехпоровую и трехпоровую пыльцу одновременно имеют цветки ноготков (см. рис. 284).

























Все описанные признаки будут проявляться в цельном и измельченном сырье. Порошок будет представлен обрывками лепестков, чашелистиков, обвертки корзинки (при ее наличии) и цельными названными элементами (у растений с малыми размерами цветков). Кроме того, в порошке будет присутствовать пыльца.
3.4. Анатомо-диагностические признаки плодов
С диагностической целью рассматривают препараты гипантия (если имеется), плодов (эпидермис, мезокарпий, эндокарпий) и семян. Анатомо-диагностические признаки семян будут рассмотрены ниже. Для анализа имеет значение следующая совокупность анатомо-диагностических признаков.
Примечание: * - снятие размеров; ** - снятие размеров и определение частоты встречаемости.
Описанные признаки имеют место в цельном сырье, при рассмотрении препаратов с поверхности, поперечных и продольных срезов, давленых препаратов. Для резаного, дробленого и порошкованного сырья имеют значение анатомо-диагностические признаки, выявляемые на обрывках эпидермиса, эндокарпия и мезокарпия. Обрывки эпидермиса чаще проявляют признаки цельного сырья. В обрывках мезокарпия и эндокарпия наблюдают форму клеток паренхимы, наличие идиобластов, различных эндогенных секреторных структур (или их обрывков), кристаллов, запасающих веществ, механических и проводящих элементов и их обрывков.
3.5. Анатомо-диагностические признаки семян
В диагностике семян заслуживает внимания семенная кожура, включая эпидермис семени (наружный слой кожуры). Для общей микроскопической картины учитывают величину и форму эндосперма (перисперма), форму и строение зародыша (все вместе эти структуры составляют семенное ядро). Диагностическое значение имеют следующие признаки.
-
Наличие и характеристика волосков, особенности их мест присоединения**.
-
-
в) многослойная - включает одновременно или в разных сочетаниях и в разной последовательности различные слои: твердый (состоит из одного или нескольких рядов толстостенных склеренхимных плотно сомкнутых клеток, часто палисадных, вытянутых параллельно или перпендикулярно поверхности семени), пигментный (клетки этого слоя содержат пигмент, или стенки клеток пропитываются пигментом), разбухающий или слизистый (состоит из одного или нескольких рядов парен-химных клеток, которые благодаря особенностям своего химического состава могут впитывать большое количество воды и сильно разбухать), паренхимный (состоит из живых паренхимных тонкостенных клеток, которые могут содержать запасные питательные вещества, при созревании запасные питательные вещества истощаются, клетки спадаются, формируя бесструктурный слой, состоящий из деформированных сжатых элементов, утративших свой клеточный характер) и др.
-
Характер и структура эндосперма (перисперма) и зародыша. Эндосперм обычно состоит из плотно сложенных клеток без межклетников с оболочкой разной толщины, более или менее изодиаметрических многоугольной формы, содержащих запасные питательные вещества, кристаллы оксалата кальция (семена аниса, кориандра), эфирное масло (семена перца черного). Структура перисперма часто схожа с таковой эндосперма. Существуют семена, не содержащие эндосперм (перисперм), накапливающие запасные питательные вещества в семядолях зародыша (семена лоха узколистного, облепихи крушиновидной).
Примечание: * - снятие размеров; ** - снятие размеров и определение частоты встречаемости.
3.5.1. Форма зародыша.
-
Дугообразный (некоторые представители семейства гвоздичных).
-
Наподобие плоской пружины (хмель). Перечисленные признаки имеют место в цельном сырье при рассмотрении препаратов с поверхности, поперечных и продольных срезов, давленых препаратов. В порошке семян имеют диагностическое значение обрывки семенной кожуры, в которых можно установить последовательность расположения составляющих ее слоев и их структуру, характер эпидермиса, наличие кристаллов, механических и проводящих элементов, эндогенных секреторных структур, а также обрывки эндосперма с жирным маслом, кристаллами, слизью, алейроновыми зернами, крахмалом и отдельные зерна крахмала, кристаллы, капли масла.
3.6. Анатомо-диагностические признаки коры
Анатомо-диагностические признаки коры достаточно подробно описаны в ГФ IV, т. 2 [16]. Для анализа рассматривают следующую совокупность признаков.
-
Форма клеток пробки, ее толщина, окраска (обычно клетки имеют прямоугольную сплющенную форму с прямыми стенками, расположены ровными рядами, возможны и другие варианты).
-
Наличие механической ткани (особо важный признак коры): отмечают присутствие колленхимы; расположение, строение, количество лубяных волокон и каменистых клеток* (других элементов механической ткани); механические элементы могут располагаться одиночно и группами, рассеянно и поясами.
Примечание: * - снятие размеров.
Все указанные признаки обнаруживаются в цельном сырье (в поперечных, продольных срезах и давленых препаратах). В резаном сырье и порошке наибольшее значение имеют механические элементы (их структура, расположение) на рассматриваемых обрывках тканей, а также различные включения (особенно кристаллы), млечники, секреторные каналы. В микроскопии резаного сырья и порошка отмечают также особенности обрывков пробки.
3.7. Анатомо-диагностические признаки корней и корневищ
Анатомо-диагностические признаки корней и корневищ описаны в ГФ IV, т. 2 [16].
Отметим наиболее важные признаки в диагностике корней и корневищ.
3.7.1. Для корней: определение первичного или вторичного строения.
А. Первичное строение обычно характеризуется следующим:
Б. Вторичное строение обычно характеризуется следующим:
3.7.2. Для корневищ: определение строения, характерного для однодольных (пучковое) или двудольных (пучковое или беспучковое) растений.
A. Пучковое строение корневищ однодольных растений обычно характеризуется следующим:
Б. Пучковое строение корневищ двудольных растений обычно характеризуется следующим:
B. Беспучковое строение корневищ двудольных растений обычно характеризуется следующим:
3.7.3. Форма клеток пробки, ее толщина, окраска (обычно клетки имеют прямоугольную сплющенную форму с прямыми стенками, расположены ровными рядами, возможны и другие варианты), при первичном строении корня отмечают особенности строения эпидермы или ризодермы (наличие корневых волосков).
3.7.4. Наличие эндодермы. Эндодерма - самый внутренний слой коры, представленный основной тканью, образующей влагалище вокруг участка, занятого проводящими тканями, и характеризуется присутствием пояска Каспари на антиклинальных стенках клеток; позже клетки могут иметь вторичные оболочки (рис. 304, 305).
3.7.5. Выраженность камбия - может отсутствовать, быть плохо выраженным, выраженным участками и хорошо выраженным (указать толщину).
3.7.6. Отметить лучистое строение (указать ширину сердцевинных лучей) или отсутствие сердцевинных лучей.
3.7.7. Секреторные каналы, млечники, вместилища.
3.7.8. Включения (клетки с эфирным маслом, кристаллы* и др.).
3.7.9. Запасающие вещества (инулин, крахмал*).
3.7.10. Характер проводящей системы (отметить структуру и тип проводящих пучков или беспучковое строение; указать тип утолщенности стенок сосудов и трахеид).
3.7.11. Наличие аэренхимы.
3.7.12. Наличие механической ткани - расположение, строение лубяных и древесинных волокон и каменистых клеток* (других элементов механической ткани).
Примечание: * - снятие размеров.
Все указанные признаки обнаруживаются в цельном сырье (в поперечных, продольных срезах и давленых препаратах). В резаном сырье и порошке наибольшее значение имеют механические и проводящие элементы (их структура, расположение) на рассматриваемых обрывках тканей; различные включения (кристаллы) и запасающие вещества (крахмал); млечники, эфиромасличные вместилища, секреторные каналы (их обрывки). В микроскопическом описании резаного сырья и порошка отмечают также особенности обрывков пробки (эпидермы, ризодермы).
Обнаруженные анатомо-диагностические признаки в микропрепаратах, удостоверяющие подлинность лекарственного растительного сырья, фиксируют в виде рисунков или фотографий. При этом данные виды документов имеют каждый свое значение.
С помощью рисунка можно легко представить схематичную микроскопическую картину расположения тканей на срезах корня, корневищ, кор, стеблей, плодов и др. Кроме того, одновременное присутствие всех анатомо-диагностических признаков в одном микропрепарате найти и сфотографировать бывает трудно. На рисунке же это можно отразить. Специалист средней подготовки, ограничиваясь использованием одного-трех рисунков со всеми известными анатомо-диагностическими признаками анализируемого лекарственного растительного сырья, способен «читать» эти признаки в микропрепаратах аналогично инженерам, «читающим» чертежи деталей и не запрашивающим фотографии этих деталей.


Однако для подтверждения найденных в лекарственном растительном сырье анатомо-диагностических признаков использование фотографии неоспоримо. Фотография является хорошим дополнением к рисунку, так как может демонстрировать всевозможные нюансы анатомо-диагностических признаков. Но соответственно для получения фотографии требуются: более тщательная подготовка микропрепаратов; больший навык в работе по микроскопии; получение более тонких срезов, хорошо просветленных и окрашенных препаратов, содержащих типичные анатомодиа-гностические признаки. Кроме того, для этого требуется и более дорогое оснащение рабочего места микроскописта. Тем не менее микрофотография в фармакогнозии является документом, объективно подтверждающим анатомо-диагностические признаки лекарственного растительного сырья, рассматриваемые при диагностике его подлинности.
На наш взгляд, использование рисунков и фотографий в фармакогнозии должно быть равноценным, поскольку анатомо-диагностические признаки лекарственного растительного сырья могут быть хорошо представлены и на рисунках, и на фотографиях. Индивидуальность лекарственного растительного сырья требует разумного подхода к выбору анатомо-диагностических признаков и способу их фиксации: в некоторых случаях отражение этих признаков будет лучше в фотографии, в других - в рисунках или в рисунках и фотографиях одновременно.
Заключение
Таким образом, в настоящей работе методологически обоснована и разработана система единых требований к микроскопическому описанию лекарственного растительного сырья. Упорядочена терминология описания анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья. Приведены и расшифрованы конкретные термины, характеризующие кутикулу, форму клеток, извилистость стенок клеток, их утолщенность, формы устьиц, погруженности устьиц в эпидермис, тип устьичных клеток, тип волосков и желёзок, разновидности эндогенных секреторных структур и запасающих веществ, характер проводящей и механической систем. Используемые термины проиллюстрированы рисунками и фотографиями.
Разработаны различные методологические подходы к технике микроскопического анализа в зависимости от морфологической группы сырья и степени его измельченности. Представлены методики определения количественных характеристик анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья.
Приведены алгоритмы составления и поиска совокупности анатомо-диагностических признаков, удостоверяющих подлинность в конкретных морфологических группах лекарственного растительного сырья, с учетом их особенностей, а именно в листьях, травах, цветках, плодах, семенах, корах, корнях и корневищах. Даны рекомендации поиска анатомо-диагностических признаков в цельном, измельченном, резаном, дробленом, порошкованном сырье.
Все это в дальнейшем будет использовано при описании микроскопии конкретных видов лекарственного растительного сырья, о которых пойдет речь во втором томе настоящей работы.
Литература
-
Анели Н.А. Атлас эпидермы листа. Тбилиси : Мецниереба, 1975. 110 с.
-
Анели Н.А. Об использовании двух новых анатомических признаков в диагностике лекарственных растений // Изучение и использование лекарственных растительных ресурсов СССР. Труды Всесоюзной научной фармацевтической конференции. Баку : Медицина, 1964. С. 47-50.
-
Аносова О.Г., Попов Д.М. Исследование морфолого-анатомических признаков цветков бузины черной, красной, сибирской // Современные аспекты изучения лекарственных растений. Научные труды НИИФ. Москва, 1995. Т. XXXIV.
-
Аносова О.Г. Фармакогностическое исследование бузины черной, бузины красной, бузины сибирской : дис. … канд. фармацевт. наук. Москва, 1995. 210 с.
-
Аносова О.Г., Асеева Т.А. Результаты микроскопического анализа и разработка методики определения подлинности корней софоры желтоватой // Материалы III международного конгресса «Народная медицина России - прошлое, настоящее, будущее». Научно-практические аспекты народной медицины. Москва, 1997. Ч. 2. С. 360-361.
-
Аппельт Г. Введение в методы микроскопического исследования. Москва, 1959. 425 с.
-
Бобкова Н.В. Исследования по контролю качества растительных порошков в лекарственных средствах : дис. … канд. фармацевт. наук. Москва : ММА им. И.М. Сеченова, 1998. 300 с.
-
Будаева С.Б., Потанина О.Г. Анатомо-диагностические признаки травы зубчатки обыкновенной // Тибетская медицина Бурятии - достояние России : материалы конференции, посвященной 10-летию Центра Восточной медицины. Улан-Удэ, 2000. С. 95.
-
Будаева С.Б., Потанина О.Г. Исследование микроскопического строения и анатомо-диагностических признаков цветков зубчатки обыкновенной // Научные труды НИИФ. Москва, 2000. Т. ХХХIХ. С. 25-27.
-
Васильев Б.Р. Строение листа древесных растений различных климатических зон. Ленинград : Изд-во ЛГУ, 1988. 208 с.
-
Василевская В.К. Анатомо-морфологические особенности растений // Ученые записки. Серия биологических наук. Ленинград : Изд-во ЛГУ, 1941. Вып. 14. С. 48-158.
-
Василевская В.К. О значении анатомических коэффициентов, как признаке засухоустойчивости растений // Ботанический журнал СССР. 1938. Т. 23, № 4. С. 304-317.
-
Гаммерман А.Ф. Курс фармакогнозии. Москва : Высшая школа, 1968. 702 с.
-
Гаммерман А.Ф. Определитель древесин по микроскопическим признакам. Москва; Ленинград : Изд-во Академии наук СССР, 1946. 102 с.
-
Гаммерман А.Ф. Определитель растительного лекарственного сырья. Ленинград : Медгиз, Ленинградское отд-е, 1952. 151 с.
-
Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издания (ГФ XIV) / Министерство здравоохранения Российской Федерации. 2018. Т. II. С. 2213-2407; том IV. С. 5834-6675.
-
Дженсен У. Ботаническая гистохимия. Москва : Мир, 1965. 377 с.
-
Гриневич Н.И., Ладыгина Е.Я. Фармакогнозия. Атлас растений. Москва : Медицина, 1989. 512 с.
-
Долгова А.А., Игнатьева Н.С. Микроскопический анализ некоторых видов брикетированного лекарственного растительного сырья // Фармация. 1968. № 2. С. 18-25.
-
Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии по фармакогнозии. Москва : Медицина, 1977. 255 с.
-
Дондукова С.Б., Потанина О.Г., Попов Д.М. Исследование анатомического строения травы зубчатки красной (Odontites rubra (Baumg.) Pers.) // Научные труды НИИФ. Москва, 1999. Т. ХХХVIII. С. 17-19.
-
Дубянская Е.А., Радциг Н.Т. Ботаника. Москва : Медгиз, 1950. 352 с.
-
Дубянская Е.А. Руководство к практическим занятиям по ботанике. Москва : Медгиз, 1956. 327 с.
-
Ермакова В.А. Фармакогностическое изучение и стандартизация сборов, брикетов, растительных порошков : дис. … д-ра фармацевт. наук. Москва : ММА им. И.М. Сеченова, 1999. Т. 1. 375 с.
-
Ермакова В.А., Бобкова Н.В., Самылина И.А. Идентификация растительных порошков в препаратах «Викалин» и «Викаир» // Научные труды НИИФ. Москва, 1997. T. XXXVI., ч. 2. С. 243-248.
-
Ермакова В.А., Кривошеева Е.В., Лобанчикова Н.В. Стандартизация лекарственного сбора для профилактики и комплексного лечения алкоголизма» // Научные труды НИИФ. Москва, 1995. T. XXXIV. C. 71-74.
-
Егорова О.В. С микроскопом на «ты». Санкт-Петербург : Интермедика, 2000. 328 с.
-
Жадовский А.Е. Микроскопический анализ пищевых и вкусовых веществ растительного происхождения. Москва; Ленинград, 1934. 287 с.
-
Захаревич С.Ф. К методике описания эпидермиса листа // Вестник Ленинградского университета. 1954. № 4. С. 65-75.
-
Идентификация растительных порошков в препаратах «Викалин» и «Викаир» / Ермакова В.А., Бобкова Н.В., Самылина И.А. // Научные труды НИИФ. Москва, 1997. Т. XXXVI, ч. 2. С. 243-249.
-
Изучение анатомического строения и анатомо-диагностических признаков коры калины гордовины и калины обыкновенной / О.Г. Потанина, С.Н. Ильясова, Д.М. Попов, Ю.Н. Смирнов // IХ Международный съезд. Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения. Санкт-Петербург, 22-25 июля 2005 г. Санкт-Петербург, 2005.
-
Исследование анатомо-диагностических признаков лекарственного растительного сырья «гибискуса цветки» / О.Г. Потанина, И.А. Самы-лина, Ю.Н. Смирнов, М.Е. Кузьминова, В.Г. Алпатова // IХ Международный съезд. Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения. Санкт-Петербург, 22-25 июля 2005 г. Санкт-Петербург, 2005.
-
Карпович В.Н., Беспалова Е.И. Фармакогнозия. Москва : Медицина, 1976. 448 с.
-
Киселева Н.С., Шелухин Н.В. Атлас по анатомии растений. Минск : Вышейшая школа, 1969. 288 с.
-
Комаров В.Л. Практический курс анатомии растений. Москва; Ленинград : Изд-во АН СССР, 1941. 311 с.
-
Ладыгина Е.Я. Практикум по фармакогнозии. Москва : Медицина, 1966. 181 с.
-
Лекарственные растения Государственной Фармакопеи. Фармакогнозия / под ред. И.А. Самылиной, В.А. Северцева. Москва : АНМИ, 1999. 488 с.
-
Лотова Л.И. Морфология и анатомия высших растений. Москва : Эдиториал УРСС, 2000. 528 с.
-
Методические рекомендации к выполнению практических занятий и самоконтролю знаний по анатомии растений / сост.: Е.М. Васильева, А.Н. Васильев. Красноярск : Красноярский государственный педагогический институт, 1979. 74 с.
-
Методы биохимического анализа растений / под ред. В.В. Полевого, Г.В. Максимова. Ленинград, 1978. 191 с.
-
Микроскопический анализ порошка листьев крапивы различных способов измельчения и идентификация его в комплексных лекарственных препаратах / Бобкова Н.В., Ермакова В.А., Самылина И.А. // Научные труды НИИФ. Москва, 1997. Т. XXXVI, Ч. 2. С. 231-237.
-
Микроскопический анализ порошка плодов боярышника / Евдокимова О.В., Самылина И.А., Ермакова В.А. и др. // Научные труды НИИФ. Москва, 1997. Т. XXXVI, Ч. 2. С. 241-243.
-
Москалева В.Е. Методы микроскопического исследования лекарственных растений // Изучение и использование лекарственных растительных ресурсов СССР. Труды Всесоюзной научной фармакологической конференции. Баку : Медицина, 1964. С. 131-134.
-
Морфолого-анатомические признаки некоторых новых видов лекарственного растительного сырья / Е.А. Коняева, О.Г. Алентьева, О.Л. Сайбель, Т.Д. Даргаева, О.Г. Потанина, П.Г. Мизина, Н.И. Сидельников. Москва : ВИЛАР; Наука, 2020. 211 с.
-
Наумов Н.А. Методы микроскопических исследований. Москва; Ленинград : Государственное изд-во сельскохозяйственной и колхозной литературы, 1932. 223 с.
-
Наумов Н.А., Козлов В.Е. Основы ботанической микротехники. Москва : Советская наука, 1954. 312 с.
-
Никитин А.А., Панкова И.А. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений. Ленинград : Наука, 1982. 767 с.
-
Николаевский В.Г. Методика ботанических исследований // Ботанический журнал. 1964. Т. 49, № 6. С. 833-838.
-
Оленников Д.Н., Потанина О.Г., Танхаева Л.М., Николаева Г.Г. Фармакогностическая характеристика листьев какали копьевидной (Cacalia hastate L.) // Химия растительного сырья. 2004. № 3. С. 43-52.
-
Паушева З.П. Практикум по цитологии растений. Москва : Колос, 1970. 250 с.
-
Пермяков А.И. Микротехника : учебно-методическое пособие для слушателей ФПК и студентов биологического факультета МГУ. Москва : Изд-во Московского университета, 1988. 58 с.
-
Потанина О.Г., Попов Д.М. Исследование анатомо-диагностических признаков цельного и измельченного сырья софоры желтоватой // Фармацевтическая наука в решении вопросов лекарственного обеспечения. Научные труды. Москва, 1998. Т. ХХХVII. С. 193-198.
-
Потанина О.Г., Попов Д.М. К вопросу микроскопического анализа листьев и стеблей сушеницы топяной // Научные труды НИИФ. М., 2000. Т. ХХХIХ. C. 258-263.
-
Потанина О.Г. Новые анатомо-диагностические признаки некоторых лекарственных растений // Материалы 3-й международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в ХХI веке», 29-31 марта 2002 г. Москва, 2002. С. 330.
-
Потанина О.Г. К вопросу микроскопии травы золототысячника // Материалы 3-й международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в ХХI веке», 29-31 марта 2002 г. Москва, 2002. С. 331.
-
Потанина О.Г. К вопросу микроскопии травы пустырника // Материалы 3-й международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в ХХI веке», 29-31 марта 2002 г. Москва, 2002. С. 331.
-
Потанина О.Г. Определение подлинности некоторых видов лекарственного растительного сырья микроскопическим методом // Современные методы исследования в медицине и фармации : материалы научно-практической конференции, посвященной 40-летию ЦНИЛ КГМУ. Казань, 2002. С. 137-138.
-
Потанина О.Г., Самылина И.А. Анатомо-диагностические признаки цельных и измельченных плодов Malus Pallasiana Juz // Фармация. 2002. № 2. С. 16-18.
-
Потанина О.Г. Совершенствование стандартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм из него на основе микроскопического метода исследования : дис. … д-ра фармацевт. наук. Москва, 2003. Т. 1. 432 с., Т. 2. 217 с.
-
Потанина О.Г., Самылина И.А Фармакопейные требования к микроскопическому анализу лекарственного растительного сырья // Фармация. 2015. № 4. С. 47-48.
-
Потанина О.Г., Самылина И.А Разработка общих фармакопейных требований к анализу лекарственного растительного сырья // Фармация. 2016. № 3. С. 48-50.
-
Потанина О.Г., Самылина И.А Совершенствование требований к разработке общих фармакопейных методов анализа лекарственного растительного сырья // Фармация. 2011. № 3. С. 46-47.
-
Поульсен В.А. Ботаническая микрохимия. Москва : Издание книгопродавца А.Л. Васильева, 1883. 110 с.
-
Прозина М.Н. Ботаническая микротехника. Москва : Высшая школа, 1960. 206 с.
-
Пыльца, как анатомо-диагностический признак при определении подлинности лекарственного растительного сырья / О.Г. Потанина, И.А. Самылина, В.М. Баева, Ю.Н. Смирнов // IХ Международный съезд. Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения. Санкт-Петербург, 22-25 июля 2005 г. Санкт-Петербург, 2005.
-
Раздорский В.Ф. Анатомия растений. Москва : Советская наука, 1949. 522 с.
-
Разработка методики определения подлинности измельченного лекарственного растительного сырья различных морфологических групп / Ермакова В.А., Самылина И.А., Бобкова Н.В. и др. // Научные труды НИИФ. Москва, 1995. Т. XXXIV, Ч. 2. С. 135-141.
-
Световая микроскопия в биологии. Методы / под ред. А. Лейси ; пер. И.А. Воробьева. Москва : Мир, 1992. 462 с.
-
Терпило Н.И. Анатомический атлас лекарственных растений. Киев : Государственное медицинское изд-во УССР, 1961. 363 с.
-
Фармакогнозия. Атлас : учебное пособие / под ред. Н.И. Гринкевич, Е.Я. Ладыгиной. Москва : Медицина, 1989. 512 с.
-
Фурст Г.Г. Методы анатомо-гистохимического исследования растительных тканей. Москва : Наука, 1979. 154 с.
-
Цитологическая и цитоэмбриологическая техника для исследования культурных растений. Методические указания / Сост.: Л.И. Абрамова, И.Н. Орлова, М.А. Вишнякова и др.; ВАСХНИЛ. Ленинград : ВИР, 1982. 118 с.
-
Эсау К. Анатомия семенных растений : в 2 т. Москва : Мир, 1980. 558 с.
-
Яковлев Г.П., Челомбитько В.А. Ботаника. Москва : Высшая школа, 1990. 369 с.
-
Яценко-Хмелевский А.А. Краткий курс анатомии растений. Москва : Высшая школа, 1961. 282 с.
-
Tibetan medicinal plants / eds C. Kletter, M. Kriechbaum. Boca Raton; London; New York; Washington; Stuttgart : Medpharm Scientific Publishers, 2001. 383 p.